胎儿宫内发育迟缓疾病标志物的初步研究

目的筛选胎儿宫内发育迟缓大鼠血清中差异表达的蛋白质，寻找与胎儿宫内发育迟缓相关的疾病标志物。方法收集大鼠疾病正常组、IUGR组血浆各3例；TCA法沉淀血清蛋白，建立疾病组和正常组蛋白质的双向凝胶电泳图谱；ImageMaster分析软件分析差异蛋白质；飞行时间质谱（MALDI—TOF—MS）获得差异蛋白肽指纹图谱，MASCOT引擎搜索蛋白质种类。结果鉴定出个差异蛋白点3个，分别为：IGF—I、IGF-Ⅱ、IGFBP-3。结论IGF—I、IGF-II、IGFBP-3，可能是胎儿宫内发育迟缓疾病诊断的生物标志物。     

测定肿瘤细胞内外5-氟尿嘧啶含量的方法研究

目的建立了高效液相色谱法测定A549组胞内外5-氟尿嘧啶含量的方法，为探索5-氟尿嘧啶的作用机理奠定基础。方法色谱柱采用Hypersil ODS柱（4．6mm×250mm，5μm）；流动相为甲醇·水=2：98（V／V）；流速：0．8ml／min；柱温：30℃；检测波长：265nm；进样量为5μl。结果细胞内液中5-氟尿嘧啶在0.1～50．0μg/ml范围内线性关系良好（r=0．9996），平均回收率为97．65％，RSD为0．40％，日内和日间精密度分别为1．30％，1．04％；细胞跨液中5-氟尿嘧啶在1．0～250．0μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9999），平均回收率为102.34％，RSD为2．11％，日内和日间精密度分别为1．32％，1．06％。结论该色谱方法简便易行，准确度高，重现性好，可用于细胞内外5-氟尿嘧啶浓度的动态变化规律研究。     

刚地弓形虫RH株感染对BALB／c小鼠情绪行为的影响

目的研究刚地弓形虫RH株感染对BALB／c小鼠学习记忆行为的影响及可能机制。方法将72只周龄、大小相近的雄性BALB／c小鼠采用随机数字表分为生理盐水对照组与不同数量（3×10^3／ml、3×10^4／ml、3×10^5／m1）弓形虫RH株感染组，每组18只。于感染第5周从每组各随机抽取6只分别进行高架十字迷宫实验、旷场实验及强迫游泳实验，观察各组小鼠在实验中情绪行为变化。并记录各项指标进行统计分析。结果在高架迷宫试验与旷场实验中，3×10^3／ml弓形虫感染组小鼠与生理盐水对照组小鼠比较，各项行为学指标无明显差异。在3×10^4／ml、3×10^5／ml弓形虫感染组小鼠与对照组小鼠比较出现明显降低（P〈0．05）．以3×10^5／ml感染组最为明显，其小鼠运动活力（0E＋cE）、进入开放臂次数比例（OE％）、开放臂停留时间比例（OT％）小鼠爬行总格数、中央格在总格数中比例分别为11．08±2．12、28．73±0．59％、25．62±2．33％、32．30±17．26、2．42±0．65％。在强迫游泳试验中，各弓形虫感染组小鼠游泳的静止时间均高于对照组小鼠（P〈0．05），3×10^5／ml感染组静止时间最长，达226．6±1．9S。结论刚地弓形虫RH株感染可引起小鼠情绪行为改变，具有焦虑抑郁倾向。     

基于MODIS数据的百色水利枢纽水库水域提取研究

利用2006年11月4日的美国EOS-MODIS/TERRA卫星的MODIS遥感数据,采用图像差值运算和阈值法提取百色水利枢纽水库蓄水后的水域范围,统计像元数计算水域面积。结果表明,在差值图像上,水域具有较高的灰度值,表现为灰白色或白色,而陆地具有较低的灰度值,表现为灰黑色到黑色的过渡变化,水陆边界较为清晰,可以用于水域的目视判别和阈值的选定;提取出的百色水利枢纽库区水域呈树枝状分布,蓄水后形成一个大型人造湖泊,湖泊内形成多个岛屿,提取出的水域面积为167.875km2;受MODIS空间分辨率的限制,对于实际较细小的线状水域,提取出来的结果出现不连续现象。     

食管鳞癌淋巴结转移的蛋白质组分析

分析食管鳞癌转移淋巴结中鳞癌细胞与食管鳞癌组织中鳞癌细胞的蛋白质的表达差异,获取鉴别两者的分子标志物。用激光捕获显微切割技术分离出食管鳞癌转移淋巴结和食管鳞癌组织中较纯的鳞癌细胞,运用双向电泳和质谱的方法检测两者表达的差异蛋白,并用免疫印迹技术对差异候选蛋白进行分析、验证。发现29个差异蛋白点,通过质谱鉴定出6种有意义的蛋白,转移淋巴结中的鳞癌细胞中如peroxiredoxin 1等5种蛋白表达明显增高,1种蛋白MTCBP-1表达下调。因此激光捕获显微切割可以有效地解决组织异质性的问题;食管鳞癌组织中的鳞癌细胞与转移淋巴结中的鳞癌细胞的2-DE蛋白质图谱具有明显的差异表达,提示食管鳞癌的淋巴结转移过程的发生是多种蛋白质功能共同作用的结果,从而造成肿瘤细胞迁移性和侵袭性的进一步增强。     

齐墩果酸抑制肝癌细胞QGY增殖和诱导凋亡的作用研究

目的研究齐墩果酸对人肝癌细胞QGY增殖的作用及与细胞内钙离子浓度（[Ca2＋]i）关系。方法将浓度分别为40、80、100μg／ml齐墩果酸作用肝癌H细胞QGY24h后，DAPI染色，以荧光显微镜观察细胞形态变化；以11组不同浓度齐墩果酸（5—400μg／ml）作用QGY细胞24h后，用四甲基偶氮唑蓝（Myr）法检测QGY增殖情况；分别以不同浓度齐墩果酸（80、100、120μg／ml）作用QGY细胞24h后，流式细胞仪检测细胞周期改变、细胞凋亡率和[Ca2＋]i。结果细胞增殖被抑制并发生凋亡：不同浓度齐墩果酸能够抑制QGY细胞株增殖，且在5—120μg／mL范围内呈剂量依赖性，药物作用细胞24h、48的Ic50分别为76．27μg／mL和66．56μg／mL；处理组细胞周期在s期产生阻滞、细胞内[Ca2＋]i较对照组显著增加，细胞凋亡率和[Ca2＋]i与药物浓度存依赖关系。结论齐墩果酸能够抑制肝癌细胞QGY增殖和诱导其凋亡；诱导凋亡可能与细胞内[Ca2＋]i增加有关。     

蛋白质组学在药物及疾病标志物研究中的应用进展

蛋白质组学提供了整体水平研究蛋白质的表达、翻译后修饰,以及蛋白质的功能的思路,由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生、细胞代谢等过程的全面认识,逐渐被广泛应用于药物及生物标志物研究中.本文介绍了蛋白质组学的经典技术路线和新策略,并综述了其在药物及疾病标志物研究中应用进展.