Se-scFv-B3对过氧化氢诱导的大鼠乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

用H₂O₂损伤大鼠乳鼠的心肌细胞建立氧化应激损伤模型, 考察谷胱甘肽过氧化物酶模拟物Se-scFv-B3对H₂O₂诱导的大鼠乳鼠心肌细胞氧化损伤的影响. 结果表明, Se-scFv-B3能部分增加心肌细胞存活率, 减少细胞凋亡, 恢复线粒体膜电位, 下调Caspase-3活力并降低细胞内活性氧的含量. 表明Se-scFv-B3可以保护心肌细胞抵制H₂O₂诱导的氧化应激损伤.     

人谷胱甘肽过氧化物酶的生物信息学分析

目的应用生物信息学技术,全面了解人谷胱甘肽过氧化物酶(Human Glutathione Peroxidase,h GPx)蛋白家族的理化性质、结构及功能.方法以NCBI中报道的h GPx家族8个成员为研究对象,利用Prot Param,Net NGlyc,Net OGlyc,Net Phos,SOPMA,Clustal W,Pymol,MEGA 5.05等多种生物信息学软件,分别对其分子量、等电点、亲水性、糖基化、磷酸化和结构等方面进行分析,并建立其分子系统进化树.结果通过比对发现:h GPx超家族8个成员的物理性质存在明显差异,而在结构及功能上存在相似特征.结论 h GPx是一类具有明确酶活性的硒蛋白,具有清除体内过量的ROS、保护机体免受氧化损伤的作用.     

Se-scFv-B3对过氧化氢诱导的大鼠乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

用H2O2损伤大鼠乳鼠的心肌细胞建立氧化应激损伤模型,考察谷胱甘肽过氧化物酶模拟物Se-scFv-B3对H2O2诱导的大鼠乳鼠心肌细胞氧化损伤的影响.结果表明,Se-scFv-B3能部分增加心肌细胞存活率,减少细胞凋亡,恢复线粒体膜电位,下调Caspase-3活力并降低细胞内活性氧的含量.表明Se-scFv-B3可以保护心肌细胞抵制H2O2诱导的氧化应激损伤.     

具有GPX活性单链抗体的制备及其抗氧化效应

为实现单链抗体的可溶性表达, 制备具有谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）活力的单链抗体, 在单链抗体表达载体pTMF-2F3上去除原2F3基因N端非必需的18个氨基酸, 采用新的表达载体pRose质粒, 在2F3的N端引入13个氨基酸的前导肽, 转入BL21（lys S）中, 使其分泌到大肠杆菌的周质腔中得以表达, 获得可溶性表达产物. 产物经过分离纯化、 Wester n Blot印迹和硒化测活确定具有GPX活性的鼠单链抗体, 其GPX活力为2 530 U/μmol. 以脂质过氧化、 细胞存活率和细胞膜完整性为指标的抗氧化实验研究表明, 具有GPX活性的单链抗体对大鼠乳鼠表皮细胞有抗紫外线损伤的作用, 是膜脂质过氧化的有效抑制剂.