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利用聚合酶链式反应(PCR)方法,以IGF-IcDNA为模板,扩增IGF-I的基因,在序更测定确证后,将其定向克隆到载体pExSecl上,构建了IGF-I融合表达载体pExIGF,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析表明:含有重组表达质粒的菌株可表达出约32.58%的6KD融合蛋白,且主要以可溶性形式存在。经IgG-Sepharose亲和层析一步纯化后,可获得纯度的90%的融合蛋白,经Wes 相似文献
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利用聚合酶链式反应(PCR)方法,以IGF-IcDNA为模板,扩增IGF-I的基因。在序列测定确证后,将其定向克隆到载体pExSecI上,构建了IGF-I融合表达载体pExIGF,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析表明:含有重组表达质粒的菌株可表达出约32.58%的26KD融合蛋白,且主要以可溶性形式存在。经IgG-Sepharose亲和层析一步纯化后,可获得纯度约90%的融合蛋白,经Western-Blot分析,免疫学活性呈阳性反应。 相似文献
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