应用gE-MGB-TaqmanPCR方法检测冰冻动物组织样品

伪狂犬病毒是严重影响养猪业发展的重要病毒,病毒粒子具有较强的抵抗力。gE基因是伪狂犬病毒的毒力基因和gE-基因缺失疫苗的缺失基因。本实验应用gE-MGB-TaqmanPCR检测18份冰冻组织样品,阳性率为15/16(除2份弃去),与血清中和结合细胞MTT比色实验结果比较,符合率为100%。此方法以闭管的模式操作,减少了以后步骤污染的可能性,整个PCR检测过程少于2个小时。     

猪圆环病毒的分子生物学特性及诊断方法

猪圆环病毒(PCV)病是近年来阻碍养猪业发展的重要传染病,PCV因而成为各国学者的研究热点.本文就猪圆环病毒的基因组结构与功能,主要的编码蛋白质及其功能,分子生物学诊断方法等领域的最新研究进展进行了综述.     

伪狂犬病病毒主要毒力基因缺失后的免疫原性研究

本试验研究伪狂犬病病毒（PRV）基因缺失疫苗株D1、D2和D3的免疫原性．对4周龄仔猪按不同剂量分别肌注接种D1、D2、D3后,于7、14d后采血：14d后用10^7pFU强毒株PRVFa滴鼻攻毒所有试验猪,攻毒7d后检查PRV在猪体内器官的分布．基因缺失毒株接种后试验组仔猪体温略有升高,接种部位未发生炎性反应,不向外散毒．PRVFa攻毒后试验组的仔猪体温稍有升高但不超过40℃,对照接毒组连续4d均超过40℃、有1头出现明显神经症状并死亡．强毒攻毒后,各剂量免疫组散毒均为2～3d,而对照组、同居猪散毒均为5d．对照组10个器官组织（大脑、小脑、三叉神经、心、肺、肝、肾、淋巴结、脾和扁桃体）均检测出PRV;D1组除大脑、小脑、肺脏外均检测出PRV;D2、D3组除大脑、小脑外,其它均检出PRV．免疫组的保护率均为100％,对照组为75％．试验结果表明D1、D2和D3能对接种猪提供充分的保护;攻毒后疫苗接种猪都向外排毒,但散毒天数均远低于对照组且未从同居感染猪中分离出病毒;D1、D2和D3是具有高度免疫原性且接种安全的基因缺失疫苗株．     

伪狂犬病基因缺失疫苗SA215的研究

伪狂犬病分布广泛、危害严重,全世界有40多个国家和地区,40余种动物曾感染发生该病,给畜牧业尤其是集约化养猪业和毛皮动物的生产造成了极大的损失.我国自1947年首次报道猫的伪狂犬病以来,已有20多个省市报道发现该病,诸多调查研究资料显示该病在我国的流行正呈不断上升趋势,特别对种猪场和集约化养猪场造成了严重经济损失,业已成为严重影响我国畜牧业特别是养猪业发展的重要制约因素.鉴于,伪狂犬病引起的损失十分巨大,流行的范围相当广泛,在欧美、日本和前苏联等许多国家已将其列为重点防治的猪病之一.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒SCM株ORF5基因抗原表位克隆表达及其免疫性研究

为鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒SCM株(PRRSV-SCM)囊膜糖蛋白GP5的免疫原性,利用RT-PCR方法从PRRSVSCM株ORF5中扩增大小为231bp的目的基因并构建表达载体PET32-GP5,将其转入大肠埃希菌Rosetta,运用IPTG通过条件优化诱导其表达.检测结果表明:最佳诱导条件为IPTG浓度1mmol/L在37℃下作用5h,表达大小约28kU的融合蛋白.通过Western-blot和间接酶联免疫吸附试验检测表达蛋白,结果显示该原核表达的融合蛋白可与PRRSV阳性血清发生反应,证明该蛋白具有免疫反应性.这为将来研制检测试剂盒以及后续研究PRRSV亚单位疫苗提供了重要依据.     

病毒基因变异的分子基础与意义

本文通过对病毒基因变异的分子基础进行综述,希望对监控病毒的遗传变异有一定的参考作用。