粗毛栓菌漆酶基因的克隆、序列分析及荧光定量PCR分析

本研究通过提取不同培养条件下的粗毛栓菌总RNA,利用RT-PCR的方法克隆到1个新的漆酶基因,命名为Tglac3,编码区长1,560bp,预测编码519个氨基酸残基,其分子量为56.6kDa,理论等电点为5.77.用荧光定量RT-PCR法分析了该漆酶基因在不同培养条件下的表达水平,结果显示,高浓度的碳源和氮源均能诱导Tglac3基因的表达.     

一株高效羽毛降解菌株Bacillus aryabhattai S-2的分离鉴定及酶活力特性研究

为解决家禽养殖业中大量羽毛废弃物及其污染问题,从环境中筛选生长速度快、产酶量高、应用潜力好的菌株进行研究.从土壤中分离得到一株高效降解羽毛的S-2菌株,对其菌落形态、生理生化特性及16S rRNA序列进行分析,并进一步分析在不同培养基中的羽毛降解率及最适产酶条件.结果发现该菌株与Bacillus aryabhattai...     

聚乙烯降解菌白浅灰链霉菌LBX-2烷烃羟化酶基因SaalkB的克隆与表达分析

白浅灰链霉菌(Streptomyces albogriseolus)LBX-2能够高效降解聚乙烯(polyethylene, PE),而烷烃羟化酶alkB基因在聚乙烯降解中可能发挥重要作用.以LBX-2基因组为模板，利用PCR技术扩增SaalkB基因，该基因全长1 086 bp,编码361个氨基酸.对该基因编码蛋白进行生物信息学分析，发现AlkB蛋白包含5个跨膜结构域，无信号肽，属于亲水性蛋白，二级结构主要由无规则卷曲和α螺旋组成，与链霉菌Stretomyces sp.XY006的AlkB蛋白的同源性达100%.将克隆得到的SaalkB基因连接到表达载体pDE1上进行原核表达，且重组工程菌株能够降解PE. SDS-PAGE结果显示得到与预期蛋白分子量(40.9 kDa)大小一致的蛋白.利用荧光定量PCR发现，白浅灰链霉菌LBX-2在以PE为唯一碳源的培养基中SaalkB基因的表达量约为在高氏一号培养基中的30倍；蛋白质组学数据分析发现，白浅灰链霉菌LBX-2在以PE为唯一碳源培养48 h和84 h时，AlkB蛋白的表达量比在高氏一号培养基中分别上调了2.35和1.57倍，表明Saalk...     

ABA-PAM协同处理对冷胁迫条件下牧草及根际土壤的影响

以冷胁迫处理青藏高原地方草种青海冷地早熟禾幼苗,并联合施用ABA和保水剂(PAM),经处理后对冷地早熟禾的生长情况、细胞内CAT、SOD、POD等酶的活力、MDA和脯氨酸含量,以及土壤蔗糖酶、磷酸酶、多酚氧化酶、脲酶活性进行测定.结果发现ABA-PAM协同处理可以提升牧草的抗冻能力,提升CAT和SOD的酶活力,降低MD...