利用稻草液体发酵产纤维素酶优化培养基

选用液体发酵产纤维素酶的优良菌株里氏木霉HC-415,在摇瓶阶段,通过正交试验等对稻草培养基中稻草粉与豆粕粉的用量等因素进行了研究,确定了优化的培养基配方和产酶条件.当一级种接种体积分数为15%,一级种培养时间24 h;产酶培养基稻草粉与豆粕粉质量比为6:1,p(KH2PO4)=0.01 g/mL,p(CaCl2)=0.006g/mL,聚醚不加,装瓶量为50 mL/250 mL瓶,培养120 h时,发酵液纤维素酶活性最高.此时,CMC'ase酶活性平均为94.62 U/mL;FPA酶活性平均为16.04 U/mL.     

表达大鼠FoxA1的慢病毒制备和鉴定

通过PCR扩增获得大鼠FoxA1的cDNA,构建慢病毒重组载体plv-rFoxA1-IRES-EGFP,并瞬时转染293T细胞观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达及Western blot检测FoxA1的表达.通过钙转将该重组载体与辅助质粒△8.91,pVSV-G共转染293T细胞制备慢病毒.研究结果表明,大鼠FoxA1慢病毒质粒成功构建,并且证实所制备的慢病毒能感染细胞,使细胞有效表达FoxA1蛋白,为FoxA1的功能研究奠定了材料基础.