基因转录后沉默信号可以在拟南芥嫁接体内快速双向传递

RNA干扰(RNAi)是引起生物体基因转录后沉默的新技术之一, 通过转基因向植物体内引入特异的RNA沉默信号, 已成功用于基因功能研究. 我们利用拟南芥动蛋白异型体KatB和KatC两个基因上共有的一段同源编码序列(168 bp)构建了能导致目标基因KatB和KatC双基因转录后沉默的DEX (dexamethazone) 诱导性RNAi载体. RT-PCR和Northern blot结果显示, 转基因拟南芥纯合体植株(简称RNAi型植株)经DEX诱导后,KatB和KatC的mRNA逐渐减少, 表明这两个基因发生了转录后沉默作用. 用改进后的简易方法将RNAi型与野生型拟南芥植株进行高效率嫁接, 对砧木和接穗中目标基因mRNA变化进行了半定量RT-PCR检测. 结果表明, 无论用RNAi型植株作为砧木或接穗, DEX诱导产生的基因沉默信号均能导致相应野生型接穗或砧木中KatB和KatC mRNA的减少, 证明说明基因转录后沉默信号可以通过嫁接面在拟南芥体内双向传递; 与已报道的基因沉默信号在烟草嫁接体内传递速度相比, 拟南芥基因沉默信号的传递更为迅速．     

盘基网柄菌肌球蛋白分子缺失对生长、发育的影响

将４种在盘基网柄菌肌球蛋白分子尾部不同部位缺失突变（ｉｎｔｅｒｎａｌ ｄｅｌｅｔｉｏｎ ｍｕｔａｔｉｏｎ）的重链基因ＭｙａａΔ８２４－９４１,ＭｙａａΔ９３４－１４５４,ＭｙａａΔ９３４－１１９４,ＭΔ１１５７－１４５４,用标准电转化方法导入内源肌球蛋白重链基因封闭了细胞（ｍｙｏｓｉｎ ｈｅａｖｙ ｃｈａｉｎ ｇｅｎｅ Ｔ－ｎｕｌｌ ｃｅｌｌ）中表达,以野生型肌球蛋白重链基因细胞为对照,测试比较了     

冻藏对面筋蛋白二级结构的影响

采用圆二色谱法表征了不同冻藏模式和冻藏时间对小麦面筋蛋白二级结构的影响.结果表明:在SDS溶液中,未经冻藏的面筋蛋白二级结构主要由β折叠和无规则卷曲组成;当冻藏时间小于60天时,两种冻藏模式对小麦面筋蛋白的二级结构影响不大;恒温冻藏模式中面筋蛋白二级结构在冻藏90天时变化最显著,易溶部分中α螺旋转化为β折叠和β转角,难溶部分中β折叠和β转角转化为α螺旋和无规则卷曲;冻融冻藏模式中面筋蛋白二级结构在冻藏60天时变化最显著,易溶部分中α螺旋转化为β折叠和无规则卷曲,难溶部分中β折叠和β转角转化为α螺旋和无规则卷曲.这说明,在恒温冻藏模式下,只有当冻藏时间达到或超过90天的时候,才对面筋蛋白的二级结构产生影响,而在冻融模式下,冻藏时间仅为60天时便可对面筋蛋白的二级结构产生影响.     

油脂引发的OH·对食源性羧甲基赖氨酸生成的影响

羧甲基赖氨酸(CML)对人体健康具有潜在危害性,为此,文中建立了赖氨酸+葡萄糖+油脂食品模拟体系,采用高效液相色谱-质谱对目标产物进行检测,并利用Fenton试剂证明羟基自由基(OH.)对模拟体系中生成CML的3条路径的促进作用.结果表明:OH.对模拟体系中生成CML的3条路径均具有促进作用;5种植物油脂能够诱发食品模拟体系产生更多的OH.,这些OH.促进了模拟体系中果糖基赖氨酸和乙二醛向CML的转化,其对模拟体系中CML的促进作用从大到小依次为大豆油>玉米油>橄榄油>棕榈油>菜籽油.以上结果证实,油脂在食品体系中引发了更多的OH.,进而促进了模拟体系中CML的生成.     

冻融对面筋蛋白结构及面粉粉质特性的影响

探讨冻融（以10 d作为一个冻融周期,在每个冻融周期的第5天,将冷冻在-18 ℃的样品升温至0 ℃,并在此温度下保持12 h后降温至-18 ℃继续冻融）对小麦面筋蛋白分子结构、自由氨基、自由巯基及粉质特性的影响.研究发现,随着冻融时间的延长,〖WTBX〗I〖WTBZ〗(0)值（散射角度为0时散射强度）呈现下降趋势,尤其是冻融前60 d,〖WTBX〗I〖WTBZ〗(0)由原样品的2.75105下降到1.75105,说明面筋蛋白的相对分子质量随着冻融时间的延长而降低.在冻融过程中自由氨基含量没有变化,而自由巯基含量上升,表明面筋蛋白相对分子质量下降的原因是由于二硫键断裂使得高聚物发生了解聚现象.添加冻融后面筋蛋白的粉质特性高于未添加的样品,而相对分子质量的下降对面粉粉质特性的影响表现在稳定时间和衰减时间上,而随着冻融时间延长其粉质特性呈现下降趋势,且与面筋蛋白的平均相对分子质量呈正相关.     

小麦线粒体肌球蛋白的纯化和特性分析

通过DE-52离子交换层析和Sephacryl S-300凝胶过滤等方法从小麦线粒体中纯化出了一种脱球蛋白,其重链分子量约为210ku,与骨骼肌肌球蛋白Ⅱ的分子量相近（205ku）,并且可以被抗人骨骼肌肌球蛋白多克隆抗体识别.小麦线粒体肌球蛋白的ATP酶活性可以被鸡骨骼肌肌动蛋白丝激活,达到202.5 nmol/min·mg.此外,其ATP酶活性还可以被Ca2+激活,却不被高浓度的Ca2+抑制.结果表明小麦线粒体肌球蛋白与骨骼肌肌球蛋白具有一些相似的生化特性.     

拟南芥中AtMEK5激活导致不依赖于水杨酸信号途径的细胞死亡

用MBP作为磷酸化底物的凝胶内激酶活性分析结果显示，在转基因拟南芥植株中诱导表达组成型激活的AtMEK₅蛋白（AtMEK₅^DD）引起的细胞死亡和用带有avr Rpt2基因的病原菌P. Syringe处理转基因植株导致的超敏性细胞死亡过程中，44kDa和48kDa的两个MAPK均被激活；AtMEK₅^DD在NahG转基因烟草叶片中瞬时表达和在拟南芥杂交植株AtMEK₅^DD x NahG中诱导表达依然引起细胞死亡，且杂交植株中AtMEK₅^DD表达并未引起水杨酸含量的显著变化； Northern检测结果显示，病原菌处理可显著诱导AtMEK₅^DD转基因植株中PAL、PR1和PR5 基因的大量转录，而AtMEK₅^DD的表达仅导致PR5 基因的大量转录；表明有别于超敏性细胞死亡的水杨酸依赖特性，AtMEK₅激活引起的细胞死亡不依赖于水杨酸信号途径。     

小麦湿面筋蛋白的流变学性质

采用HAAKE（RS600）流变仪，分别用动态（应力和频率扫描）和稳态（蠕变-恢复实验）方法研究不同湿面筋含量和品质的三种小麦面粉湿面筋蛋白（湿面筋蛋白Ⅰ，Ⅱ和Ⅲ）的临界应用、弹性模量等流变学性质．结果表明：应力扫描时，湿面筋蛋白Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ的临界应力分别为49．59，24．88和12．48Pa；频率扫描时，当频率为1．117rad／s时它们的弹性模量分别为1194，789和583Pa；蠕变-恢复实验时。当时间为5．11min时它们的形变分别为7．09％，9．43％和14．29％．这表明湿面筋含量越高，面筋品质越好，其临界应力越大；弹性模量越大；形变率越小，面筋蛋白形变恢复时间越短．     

基质和托盘对烤烟幼苗素质和生理反应的影响

研究育苗基质和育苗托盘对烤烟出苗、幼苗生长和生理代谢变化,为烤烟托盘育苗基质和育苗托盘的筛选提供参考。结果表明:在播种后20、26和33 d,160孔托盘在6种不同基质下的出苗率大小为T2T1T3T5T4T6,322孔托盘为T6T5T4T1T2T3;除T6基质外,其余5种基质的出苗率都是160孔托盘高于322孔托盘。烤烟幼苗生长到49、56和63 d时,T1、T2和T6基质下160孔托盘烟苗的最大叶长、最大叶宽、茎高、茎直径、地上部干鲜重和根系干鲜重都显著高于322孔托盘。T6基质下两种规格托盘的烟苗根系活力没有显著差异,而其余5种基质都是160孔烟苗根系活力显著高于322孔。160孔托盘下,T2基质幼苗叶片可溶性蛋白含量显著高于T1、T4和T5,322孔托盘下,T6基质幼苗叶片可溶性蛋白含量显著高于其它5种基质。烤烟幼苗生长期间,基质和托盘不同叶片光合色素含量也有差异。     

利用地震速度预测岩性的计算机辅助设计

利用地震速度进行砂岩含量定量解释是碎屑岩地区区域储层分布研究中的一项大工作量的繁琐工作。借助于计算机及其外设进行计算，使工作效率有显著的提高。文章详细叙述了该方法的技术思路及通过计算机与数字化仪完成原始数据的自动录用和数据处理的技术方法。