乙酰胆碱酯酶电极反应机理

在研究酶电极基础上探讨了电极上的反应机理。以乙酰胆碱酯酶催化活性为基础的抑制型酶电极的电极反应是:1)催化底物水解;2)底物中的I-被氧化为I2;3)底物氯化硫代乙酰胆碱分解产生的硫代胆碱含有的-SH基在银基汞膜电极上与汞生成硫醇汞盐。硫代胆碱在玻碳电极表面的氧化,为具有吸附性的不可逆过程,电极反应的电子转移数n=2,反应速率常数k=0.29s-1。     

Bis(7)-Tacrine Ameliorates Cognitive Impairment Caused by Cerebral Hypoperfusion in Rats

The effects of bis(7)-tacrine, a novel acetylcholinesterase inhibitor, on cognitive impairment and neuronal degeneration induced by permanent ligation of bilateral common carotid arteries (2VO) were investigated using the Morris water maze in rats. Once daily oral administration of bis(7)-tacrine (0.025, 0.05 and 0.1 mg\5kg-1) was started 14 days after 2VO operation. Over a three-week treatment bis(7)-tacrine effectively reversed 2VO-induced spatial memory deficits in a dose-dependent fashion. Furthermore, histological observation showed bis(7)-tacrine decreased the neuropathological changes in the 2VO rats brain. These results suggest that bis(7)-tacrine has therapeutic potential for the treatment of dementia caused by chronic cerebral hypoperfusion.     

瑞香狼毒对东亚飞蝗作用机理的初步研究

利用硅胶柱分离瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ段粗分物,并测定对东亚飞蝗毒杀活性最高的I段粗分物对东亚飞蝗的致死性及对其体内Na~+-K~+-ATPase、Ca~(2+)/Mg~(2+)-ATPase、乙酰胆碱酯酶的抑制活性.研究表明:瑞香狼毒I段粗分物对东亚飞蝗具有较强的毒杀作用,在药物浓度为10mg/mL、72h对东亚飞蝗的校正死亡率为92.50%;同时,毒杀作用具有浓度和时间依赖性;而且瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物I段粗分物对上述3种酶均有一定的抑制作用,且对Na~+-K~+-ATPase的抑制作用最强,在药物浓度为5mg/mL、96h对Na~+-K~+-ATPase的抑制率为40.38%;分析发现瑞香狼毒活性成分对东亚飞蝗的毒杀作用与对Na~+-K~+-ATPase的抑制作用之间具有显著相关性,据此推测,Na~+-K~+-ATPase可能是瑞香狼毒活性成分的主要作用靶标之一.     

海洋真菌杀虫活性的初步研究

对采集自浙江舟山海域底泥、福建省九龙江口红树林及福建省云霄县红树林共188株海洋真菌代谢产物的杀小杆线虫（Rhabditis sp．）和卤虫（brineshrimp）活性进行初步研究．筛选出#164菌株代谢产物对小杆线虫显示了较好的杀害活性，其LC90小于0．5mg／mL．#122菌株代谢产物对卤虫显示了较强的麻痹效应．#305菌株代谢产物对卤虫的LG。仅为75μg／mL．此外，对188株海洋真菌代谢产物的乙酰胆碱酯酶抑制活性进行研究．筛选出#229菌株代谢产物和#170菌株代谢产物具有较强的乙酰胆碱酯酶抑制活性,IC50分别为30／μg／mL和25／μg／mL．这些活性菌株具有产生杀线虫剂或乙酰胆碱酯酶抑制剂的特性．     

饲养温度对小菜蛾(Plutella xylostella)AchE和CarE活力的影响

在湿度定义为干、湿球温度差为3℃、光照强度10000—12000lx、光照周期14L：10D条件下，探索饲养温度（X：24—36℃）之变化对小菜蛾（Plutella xylostella）4龄幼虫乙酰胆碱酯酶（Ache）和羧酸酯酶（CarE）活力（Y）的影响效应。实验结果表明，活力指数随着饲养温度的升高而降低，两者之间存在显著的线性相关关系：温度与乙酰胆碱酯酶（AchE）活力两者间的相关关系函数式为Y=0．3327—0．0068X；与羧酸酯酶（CarE）活力的为Y=3．1278—0．0780X。     

小菜蛾Plutella xylostella羧酸酯酶、酰胺酶及乙酰胆碱酯酶的研究

研究结果表明,小菜蛾(Plutella xylostella)乙酰胆碱酶、酰胺酶的最适pH值分别为8.0和8.5。pH值对闳酸酯酶活力影响较小,酰胺酶和羧酸酯酶反应速度在反应开始60钟内,仍在线性范围,乙酰胆碱酯酶反应速度在反应开始的8分钟内呈线性关系。羧酸酯酶、酰胺酶和乙酰胆碱酯酶的Vmax分别为551.81(nmol/mg,mln)、5.25×10~(-4)(μmol/mg.min)和20.36(nmol/mg.min);km分别为5.52×10~(-5)(mol)、1.18×10~(-3)(mol)和8.33×10~(-3)(mol)。     

人胎肺细胞培养液中类血小板生成素的初步研究

人正常胎肺细胞用含１０％小牛血清的ＭＥＭ培养液原代培养,后用无血清的１９９培养液继续培养．硝酸纤维膜的斑点酶联免疫印迹法测定显示所收集的无血清培养液中含有能与人重组血小板生成素单抗结合的蛋白质．免疫细胞化学检测发现培养的肺细胞与血小板生成素单抗有明显阳性反应．用小鼠骨髓乙酰胆碱酯酶阳性细胞法测定肺细胞在不同培养时间所收集的培养液促血小板生成活性的大小,结果显示收集的培养液有明显刺激活性并且其活性与肺细胞的密度有相关性．     

固定化乙酰胆碱脂酶的研究

以戊二醛为交联剂,将乙酰胆碱脂酶交联固定到硅胶载体上,研究了影响固定化酶的主要因素．通过酶活力的测定,确定了最佳戊二醛浓度、pH值、固定化时间、酶用量、固定化酶的最适作用温度、pH值、酶的稳定性及其回收率．结果表明：戊二醛浓度为0．5％,pH值为8．0,固定3．0h,酶与载体比例为30mg／g可制备良好的功能化载体．固定化乙酰胆碱脂酶最适作用温度和pH范围分别为40℃和6．0～9．0．重复使用10次固定化酶,回收率约为70％．     

Toxicity of Diphenyl-pentenone Against Three Aphids （Homoptera： Aphididae） and Its Effects on the Esterases and Glutathione S-transferase

The most provocative aspect of this study is its original findings on the toxicity of diphenyl-pentenone (1,5-diphenyl-2-penten-l-one, DP) against the three kinds of aphids (Maerosiphum granarium Kirby, Lipaphis erysimi (kaltenbaeh), Schizaphis aurantiae (Fosc.) and the inhibitory effects of DP againstdetoxification enzyme system of the aphid (S aurantiae). The result of bioassay in the laboratory shows that the product has strong contact activity and very good antifeeding activity, with higher efficacy than anabasine and nicotine, two botanical aphidicides. The median lethal concentrations of the three products against the apterous adult (Mgranarium) are 175.85, 217.23 and 245.22 mg/L, respectively, at 24h of pest treatment. DP is inferior to methomyl in contact assay but superior in antifeeding activity assay against the three aphides. DP has strong inhibitory effects on nonspecific esterases, carboxylesterase of aphid (S aurantiae), but it can not inhibit AchE. DP also has strong inhibitory effects on glutathione Stransferase of the aphid.