外源乳酸脱氢酶基因在双歧杆菌中的表达

以大肠杆菌 双叉双歧杆菌的穿梭质粒pHJ为基础,插入从Lactococcuslactis总DNA中用PCR方法扩增得到的报告基因乳酸脱氢酶基因(ldh),构建了双叉双歧杆菌的表达质粒pHJ LDH,并采用电转化法导入双叉双歧杆菌进行了表达研究.对双叉双歧杆菌总蛋白的SDS PAGE分析结果表明,ldh报告基因的表达产物形成了明显的条带,Western blotting结果确认了该条带为ldh基因的产物.LDH的酶活性定量测定结果表明,重组双叉双歧杆菌的蛋白粗抽提液中LDH的比活性为5.5U/mg,菌中LDH的表达量约为2mg/L.此工作为今后双叉双歧杆菌的基因工程奠定了基础.     

异亮氨酸拉链结构对可溶性CD40L生物学活性的影响

CD40配基(CD40L)为TNF超家族中的一员，瞬时表达于激活的CD4^ 的T淋巴细胞上．自然状态下膜上三聚体的CD40L通过和CD40受体(CD40R)结合，在免疫监视和肿瘤免疫中发挥作用．以PCR方法从peDNA3-CD40L质粒上扩增得到编码CD40L基因的胞外部分sCD40L，并将该片段插入大肠杆菌表达质粒pET30a上，构建得到大肠杆菌表达质粒pET30a-sCD40L；同时，在sCD40L的N端融合了异亮氨酸拉链(Isoleucine Zipper，IZ)结构，构建得到表达质粒pET30a-IZ-sCD40L．表达质粒在大肠杆菌中表达，得到可溶性的重组人CD40L和IZ-CD40L．SDS-PAGE分析结果表明重组人rhsCD40L和IZ-rhsCD40L在相应分子质量位置都有明显的条带产生，并得到Western blotting的确认．非SDS-PAGE电泳结果显示，异亮氨酸拉链结构有利于rhsCD40L蛋白形成聚合体结构．B细胞增殖实验和人骨髓瘤细胞株XG2凋亡实验结果都表明，异亮氨酸拉链结构提高了rhsCD40L的生物学活性．     

猪口蹄病毒VP1活性肽融合蛋自的纯化

在猪口蹄疫病毒（FMDV）活性肽VP1融合蛋白基因工程菌E．coliC500构建成功的基础上,确定了融合蛋白的分子质量约为71．0ku．对于融合蛋白的提纯,确定了超声波破壁,尿素分级纯化,葡聚糖G－100柱层析,DEAE纤维素DE－52柱层析的方法,将目的蛋白提纯了6．75倍,SDS－PAGE呈一条带．并比较了融合蛋白的半乳糖苷酶反应（ONPG）和酶的温度敏感性等性质的变化．     

氟原子对光伏聚合物性能的影响

以二(2-辛基十二烷氧基)苯并二噻吩(ODBDT)为供体单元,分别与受体单元二噻吩苯并噻二唑(DTBT)和二氟代二噻吩苯并噻二唑(DTffBT)共聚,合成了两种具有给-受体(D-A)结构的共轭聚合物PODBDT-DTBT和PODBDT-DTffBT。利用紫外-可见吸收光谱、循环伏安法研究了聚合物的光物理与电化学性能,并通过光伏性能测试研究了氟原子对聚合物太阳能电池的影响规律。结果表明,氟原子的引入使得聚合物的光学带隙变窄,溶解性变差;基于PODBDT-DTBT或PODBDT-DTffBT与PC71BM共混制备的本体异质结太阳能电池,光电转化效率分别为3.01%和2.00%。     

乳酸克鲁维酵母(Kluveromces lactis)β-半乳糖苷酶的稳定性研究

探讨了乳酸克鲁维酵母（Ｋ．Ｌａｃｔｉｃ）β－ 半乳糖苷酶金属离子稳定性和热稳定性．证明某些金属离子对β－半乳糖苷酶具激活作用,另一些金属离子对β－半乳糖苷酶活性影响不大,但是在高浓度的条件下均表现出对酶活性不同程度的抑制作用．Ｃａ２＋ 对酶的抑制可以被磷酸盐、脱脂乳以及Ｍｇ２＋ ,Ｍｎ２＋ 所恢复．Ｋ＋ 单独存在就可以大大地提高酶的热稳定性,Ｍｎ２＋ 可以增加Ｋ＋ 对β－半乳糖苷酶的热稳定性作用,而Ｍｇ２＋ ,Ｍｎ２＋ 和Ｎａ＋ 自身不能提高酶的热稳定性．甘油、脱脂乳均可以提高酶的热稳定性,脱脂乳成分如乳糖、酪蛋白酸钠对酶的热稳定作用有赖于Ｋ＋ 的存在