利用RSM法优化副干酪乳杆菌HD1.7产细菌素发酵培养基

用RSM法以MRS培养基为基础对副干酪乳杆菌HD1.7的液体培养基进行优化.首先采用Plackett-Burman试验设计筛选显著因子,确定了影响细菌素产生的主要成分:牛肉膏、葡萄糖、酵母粉;运用最陡爬坡试验逼近最大细菌素产生区域;利用RSM法对培养基进行优化.试验结果表明培养基最佳配方为酵母粉0.26%、牛肉膏0.88%、蛋白胨1.5%、葡萄糖2.45%、Mg-SO40.06%、K2HPO40.2%、吐温80 0.1%、MnSO40.005%、NaC1 0%.     

苏云金杆菌4.0718菌株InhA的鉴定和不同生长时期的表达分析

免疫抑制因子A (Immune Inhibitor A, InhA)是苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis, Bt)分泌的一种锌金属蛋白酶,具有水解昆虫抗菌肽的活性.为了研究InhA在Bt 4.0718菌株中的重要功能,利用SDS-PAGE分离了Bt 4.0718菌株营养生长中期、芽胞早期和芽胞晚期的细胞总蛋白质,通过MALDI-TOF/TOF MS分析以及数据库搜索,鉴定到了相对分子质量为86.5kD、pI为5.37的InhA蛋白质.然后采用双向电泳(2-DE)技术检测该蛋白质在不同时期表达量的差异,发现分离和鉴定到的InhA及相对分子质量为75kD、pI为5.13的InhA precursor蛋白质在营养生长中期的表达量比较高,说明InhA在营养生长中期前已开始形成,直到芽胞早期达最大表达量,但芽胞晚期的图谱分析和质谱鉴定均未发现InhA. InhA在营养期的高效表达说明:Bt进入昆虫体内后,InhA在Bt细胞生长繁殖初期表达,并抑制昆虫体内的抗菌肽对Bt细胞的裂解作用,从而有助于Bt在昆虫宿主中的生存,为芽胞期晶体和芽胞的形成以及菌株毒力的发挥奠定了基础.     

龙柚芽变系的RAPD分析鉴定

利用100个10bp的随机引物对龙柚的4个芽变系的基因组DNA进行RAPD扩增分析,探讨芽变系遗传物质的变化．在这100个随机引物中,筛选出能在4个芽变系中扩增出稳定多态性片段的引物11个,一共扩增出了63条片段,其中多态性片段有19个,占30．16％．聚类分析的结果,芽变系2和4的遗传距离最小（0．1001）,相似系数最大（0．9048）．表明了芽变引起的遗传物质的改变能够通过无性繁殖的方式存在,用RAPD的方法来分析不同芽变系的遗传关系是可行的．     

绿色荧光蛋白标记的芽孢杆菌在幼龄畜禽体内的动态分布

应用DNA重组技术构建了表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组芽孢杆菌(Baci1010).以GFP为标记研究该工程菌在仔猪和小鸡体内的动态分布.试验结果表明:投喂含质量分数为0.1%工程菌(Baci1010)菌液的全价配合饲料12h后,在仔猪和小鸡的肠道内可检测到该工程菌的存在,36h后在小鸡盲肠内该工程菌的数量达到(155±33)×105个/g,48h后在仔猪盲肠内该工程菌的数量达到(133±35)×105个/g,在仔猪和小鸡体内,该工程菌都能在肠道内迅速复活并繁殖成为有益菌.     

嗜酸乳酸杆菌生物学特性研究及其发酵参数优化

采用均匀设计法优化嗜酸乳酸杆菌的发酵培养基,研究一株可作为益生素使用的嗜酸乳酸杆菌CGMCC0842的生物学特性,包括菌体生长曲线、耐热存活率、耐酸存活率、贮藏存活率等．结果表明,嗜酸乳酸杆菌的活菌浓度在开始时缓慢上升,3h后从10^5CFU／mL迅速上升,第18h超过10^11CFU／mL,到第32h,细菌数量则缓慢下降,菌体的适宜收获期宜在发酵后18～23h．嗜酸乳酸杆菌的75℃处理15min耐热存活率为62．5％,贮藏1个月的存活率为59％,pH2．0处理6h的存活率69．5％．优化的发酵参数为：时间,20h;葡萄糖,110g／L;蔗糖,10g／L;胰蛋白胨,5g／L;酵母浸粉,30g／L;柠檬酸盐,12g／L．研究表明该乳酸杆菌CGMCC0842是一株优良的饲用益生素菌种．     

灵芝胞外多糖液体发酵培养基的优化

灵芝液体发酵过程中培养各主要成分之类间的比例对灵芝胞外多糖产量有明显影响。正交试验结果表明,当发酵培养基的配方为葡萄糖3.5%、（NH4）2SO40.1%、MgSO40.05%、KH2PO40.2%、酵母膏0.2%,培养基初始pH6.0,此时得到的胞外多糖（EPS）的量可以达到最大,实验中还进行了在不同培养基中灵芝菌丝体的生物量测定,结果表明生物量最高的培养基中灵芝胞外多糖的产量并非最高。     

假单胞菌AD1菌株对阿特拉津污染土壤的生物修复

向每克土壤含1mg阿特拉津的模拟污染土壤中接种假单胞菌AD1菌株,补加适量碳源和磷源,30℃培养4周以后,96％的阿特拉津被去除。     

甲胺磷降解菌的生长特性及其降解活性的研究

从农药厂污水中分离到一株能以甲胺磷为唯一碳源、氮源和能源生长的铜绿假单胞菌,在充分供氧条件下,研究了该菌株降解甲胺磷的降解过程,生长条件以及影响因素,结果表明：当甲胺磷浓度为0.5g/L时,培养5d降解率达79.6%,该菌甲胺磷的最佳生长浓度为0.5g/L,最适pH为7.0,温度为30℃,对甲胺磷的最高耐受浓度为30g/L,12种金属离子对该菌的生长和甲胺磷的降解有不同程度的抑制作用,加入较低浓度的碳氮源,能促进该菌对甲胺磷的降解。     

红假单胞菌的分离及菌种保存试验研究

从不同来源的样品中分离出四株光合细菌,经鉴定均属于红假单胞菌,同时分别采用液体种自然条件下、液体种蜡封、穿刺物蜡封、砂土管等方法对其菌种进行了保存试验研究,最后得出两种最佳保存方法：蜡封液体试管种法和试管穿刺蜡封法。     

泥鳅外周血细胞形态的观察

报道了泥鳅泥周血细胞的显微观察结果,用Wright氏染料染色,泥鳅的外周血中可区分出下列各种类型的血细胞,红细胞,嗜中性粒细胞,嗜酸性粒细胞,单核细胞,淋巴细胞和血栓细胞,还可见到幼红细胞,幼嗜中性粒细胞和幼单核细胞,白细胞中嗜中性粒细胞,淋巴细胞和血栓细胞较多;单核细胞体积最大,血栓细胞体积最小。