靶向hTERT的shRNA腺病毒载体的构建及其对MCF-7细胞hTERT表达的影响

设计针对人端粒酶逆转录酶催化亚基(hTERT)的干扰靶序列GGAACACCAAGAAGTTCATCT,构建siRNA表达质粒PgenesilhTERT;随后将shRNA表达框克隆到入门载体pENTRTM1A,构建重组质粒pENTR/U6-hTERT-polyA;使用同源重组方式在体外将该表达框重组到腺病毒载体pAd/PL-DEST,得到重组腺病毒质粒pAd/U6 –TERT-polyA;线性化的重组腺病毒质粒在HEK 293细胞内包装为具有感染能力的病毒颗粒rAd-hTERT.同时构建不针对任何基因的shRNA阴性对照rAd-HK,空病毒对照rAd-blank和只含EGFP的rAd -EGFP.四种病毒经酶切、电泳分析表明插入序列正确,腺病毒载体构建成功.Western blotting测定转染后各组hTERT蛋白的表达情况,证实转染rAd-hTERT 48 h后,hTERT的表达明显被抑制.实验表明基于Gateway技术的腺病毒介导的shRNA载体构建成功,rAd-hTERT可有效抑制乳腺癌MCF-7细胞hTERT基因的表达.本研究为针对端粒酶的基因治疗奠定了实验基础.     

MF浸渍纸贴面定向刨花板钢框模板的力学分析与计算

根据ＭＦ浸渍纸贴面定向刨花板的结构特点和现场混凝土地施工条件，对ＭＦ浸渍纸贴面定向刨花板钢框模板进行了受力分析与力学计算。确定了模板在允许应力和允许挠度的范围内，在不同支撑条件下的允许载荷。力学计算的结果表明，ＭＦ浸渍纸贴面定向刨花板钢框模拓结构上是合理、适用的；在 支撑条件下，其载能力可达５９ｋＰａ以上，能满足一般建筑施工的要求。     

浅谈图书馆人员素质的提高

一、图书馆人员素质的基本内涵和构造简单地说，图书馆人员的素质，就是图书馆工作人员所具有的各种要素的总和。既有物质、生理的要素，又有精神，智力方面的要素。而不论图书馆人员的哪一方面的要素，都是直接或间接地在图书馆的实践活动中生成、强化、完善和发展起来的。现代图书馆人员的素质，主要包括以下三个方面。1、身体、心理素质这指身体健康水平及其大脑机能状况，反映于健康程度、体质强弱、脑力高低及意志品质、心理素质等环节，是图书馆人员的生理基础和自然属性。在我国现阶段，图书馆工作既是一项知识性、学术性很强的工作…     

学校田径运动会组织与编排工作的浅谈

本文从实践经验出发,浅析学校田径运动会的规律性,提出了组织与编排工作的简单方法。     

关于走中国自己的高技术发展道路的思考

以发展高新技术为主导的新科技革命,正在使世界的经济和社会发生革命性的变革。这一趋势必将对21世纪的经济发展、思想文化、社会生活、国际关系以及国家安全等各个方面产生深刻的影响。我们必须有所准备,以迎接人类新纪元的来临。 目前,关于发展高技术,已引起我国社会各界的普遍关注和广泛讨论。新的纪元,新的目标,也需要新的思维。实现现代化,最重要的莫过于根据国情选择正确的道路。因此,在这场讨论之中,一个最主要的论题应该是,我们应该走什么样的高技术发展之路,如何发展具有中国特色的高技术?有     

交流电路中电压的意义

本文通过库场仑线积分定义电压方用总电场线积分定义电压的讨论认为以库仑场线积分定义电压为恰当。