生物活性环糊精衍生化蛋白质的合成

合成了2种新型的环糊精衍生化蛋白质.将牛血清白蛋白和胰酶分别与β-环糊精以乙二醇二缩水甘油醚为交联剂,在pH=8.7的硼酸缓冲液中进行反应,反应温度为37 ℃,反应时间为4 h,反应后的衍生化蛋白质具有生物活性.产物应用红外光谱及质谱进行结构测定.实验证明,这种新型的衍生物可以作为手性选择剂用于手性化合物的分离.     

基于双反相二维色谱串联质谱技术的大鼠海马膜蛋白分析

色谱与质谱联用技术在蛋白质组学研究中应用广泛,特别是二维色谱分离技术的发展,为复杂生物样品的分离分析提供了更为精准的技术手段.海马是大脑颞叶内侧的一个重要脑区,主要负责哺乳动物的学习和记忆,实现这些功能的生理过程与海马膜蛋白密切相关,但由于海马膜蛋白具有强疏水性和低丰度的特点,因此在分离和鉴定上难度较高.运用差速离心的方法分离纯化得到成年大鼠的海马膜蛋白,采用双反相二维色谱串联质谱技术进行分离分析.最终鉴定2 502个蛋白,结合生物信息学分析发现,所鉴定到的2 502个蛋白在包含蛋白定位、突触可塑性、蛋白运输以及囊泡转运等在内的与学习记忆功能密切相关的生理过程中均有涉及.这一分析结果为更加全面的揭示海马膜蛋白与脑海马区的特定功能间的具体关系提供了重要的参考.     

基于风险偏好的知识型员工激励机制

基于知识型员工风险偏好的讨论,利用H-M扩展模型,分别研究了确定及不确定环境下知识型员工风险偏好与激励机制风险分担之间的关系,并利用收益成本法讨论了如何协调两者的冲突.研究表明:随着知识型员工风险规避程度的减小,激励机制应增加其风险分担;企业可通过改变风险分担调节知识型员工的风险偏好,从而提高企业产出和知识型员工收入;风险分担的改变具有上限,该上限取决于知识型员工能力和环境不确定性等因素.最后给出了案例分析.     

P-糖蛋白的核酸适配体筛选及应用研究

基于SELEX技术筛选P-糖蛋白（permeability glycoprotein,P-gp）的特异性核酸适配体（aptamer,Apt）,并用酶联免疫吸附测定（ELISA）法、表面等离子体共振（SPR）法表征了Apt与P-gp的结合能力,采用与P-gp结合能力最强的Apt5在人结直肠腺癌细胞（Caco-2）、人脑微管内皮细胞（hCMEC/D3）两种细胞系上考察了对P-gp外排功能的抑制效果.筛选得到10条长度为81 bp的P-gp核酸适配体,结合能力大小顺序为:Apt5>Apt8>Apt1>Apt4>Apt6>Apt10>Apt7>Apt2>Apt9>Apt3.Apt5使hCMEC/D3及Caco-2细胞内罗丹明123的蓄积量分别增加了40.77%（P<0.01）,32.39%（P<0.05）,能潜在抑制P-gp的外排功能.本研究首次报道了P-gp的多条核酸适配体,与P-gp有较强的结合能力,并能抑制P-gp的外排功能,有望成为P-gp的潜在新型抑制剂.      

可逆加成-断裂链转移聚合制备温度敏感色谱材料

利用可逆加成-断裂链转移聚合(RAFT)成功制备了温度敏感色谱材料,FT-IR,XPS,元素分析和TG等方法对改性后的硅胶表征,结果显示成功在硅胶表面接枝了具有温敏性的N-异丙基丙烯酰胺(PNIPAAm).首先将二硫代苯甲酸苄酯(BDTB)作为RAFT的链转移剂固定到硅胶表面,然后在硅胶表面通过RAFT接枝NIPAAm.接枝率随链转移剂与引发剂(CTA/I)的减小而增大.以4种类固醇为分析物,分别在10,30和50℃的温度下,研究不同接枝率的固定相对它们保留时间的影响,HPLC分析结果显示,固定相的温度敏感性能和色谱分离性能随接枝率的增大而提高.结果表明RAFT聚合成功制备了温度敏感色谱材料.     

苦绳中木脂素类化学成分的分离与结构鉴定

为明确苦绳Dregea sinensis Hemsl中的主要化学成分,采用AB-8大孔吸附树脂、硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶和反相制备液相等色谱方法从苦绳中首次分离得到5个木脂素类化合物. 通过一维和二维核磁共振波谱、有机质谱等方法确定它们分别为4',4"-二羟基-3,3',3",5,5',5"-六甲氧基-7,9':7',9-二环氧-4,8"-氧-8,8'-倍半新木脂素-7",9"-二醇(1),4',4"-二羟基-3,3',3",5,5'-五甲氧基-7,9':7',9-二环氧-4,8"-氧-8,8'-倍半新木脂素-7",9"-二醇(2),(+)-异落叶松树脂醇(3),赤式-愈创木酚基甘油基-β-O-4'-松柏醇(4),diasyringaresinol (5).      

蛋白质分离玻璃微流控芯片的制作方法

对湿法刻蚀和键合两个芯片制作关键步骤进行了研究和优化. 首先比较了两种刻蚀配方的效果,并对刻蚀时间和刻蚀过程中的振荡方向等条件进行了考察,对键合预处理方法做了进一步改进. 通过对常温键合和高温键合方法比较,证明高温键合才能保证芯片的使用寿命. 最后将所制得的芯片成功地应用于非变性蛋白质的二维芯片电泳分离. 实验结果表明,通过对芯片制作方法的改进,不仅获得了良好的蛋白分离效果,而且芯片制作方法更为简便、成本低、制作成功率提高.      

龙抗Ⅰ号对模拟微重力大鼠血液流变学的影响及心肌氧化损伤的保护研究

观察传统名贵中药龙抗I号对尾吊模拟微重力大鼠血液流变学的影响及心肌氧化损伤的保护作用. SD大鼠分为对照组、模型组、给药组,分别在5,21 d取静脉血检测红细胞压积、红细胞变形和全血黏度,取血后取心肌测定过氧化氢（H₂O₂）、丙二醛（MDA）和总超氧化物歧化酶（T-SOD）水平. 给药5 d后,给药组与模型组比较,红细胞压积、心肌MDA水平明显降低;全血黏度、心肌H₂O₂质量分数有降低趋势;红细胞最大变形指数、心肌T-SOD活力有升高趋势. 21 d后,给药组与模型组比较,全血黏度显著下降,红细胞最大变形指数显著升高;其余指标均表现出向正常水平恢复的趋势. 龙抗I号对尾悬吊模拟微重力引起的大鼠红细胞压积升高、全血黏度增大、红细胞变形能力下降有明显的抑制并且对模拟微重力引起的心肌氧化损伤有一定的保护作用.      

基于可控液压阀的微流体驱动结构

一种基于液压驱动的微阀结构的微流体驱动结构及其驱动方法,微阀结构采用压电陶瓷作为能量输出单元,以作用于压电陶瓷的可控PWM波实现实时开关控制.在该驱动结构中置有主泵腔以及多个液压微阀,采用高速动态调节各微阀开关状态的方式实施流体的驱动.该驱动结构具有体积小,控制精确,易于集成于微流控芯片等特点,可用于微全分析系统中的流体驱动,POCT小型化设备的流体控制等方面.     

多反应监测结合重组蛋白和18O同位素标记对脂肪合成代谢通路进行蛋白质相对定量的新方法

建立了多反应监测结合肽段串联体蛋白（concatamers of Q peptides,QconCATs）和¹⁸O同位素标记对脂肪合成代谢通路的蛋白质进行相对定量的新方法.挑选待检测蛋白的特异性肽段构建QconCAT质粒并将其转化导入大肠杆菌体系后进行表达.通过优化对QconCAT蛋白的酶切条件及考察¹⁸O标记效率.建立脂肪合成代谢通路蛋白多反应监测的蛋白质相对新定量方法,并对肥胖大鼠与正常大鼠脂肪代谢通路的蛋白质进行定量分析.结果发现脂肪合成通路的丙二酸单酰辅酶A-ACP转移酶,烯酰-ACP还原酶表达量均有显著上升（P<0.05）.该结论与之前报道肥胖相关的文献结果吻合,证明了本方法在定量生物样品应用中的可靠性.