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21.
检验唐氏综合症的法医学方法研究 总被引:1,自引:0,他引:1
利用荧光标记的PCR法,对唐氏综合症的检验进行研究.采用法医学检验常用试剂盒AmpFe STR^TM Profiler Plus^TM对唐氏综合症病例进行PCR扩增,扩增产物用ABIPRISMT”310型DNA全自动测序仪分型判断.结果表明,该检验方法具有简便、快速、直接、准确的特点,检验效果非常好,而且可用于产前诊断.该方法用于检验唐氏综合症是一种理想的方法. 相似文献
22.
多胺在真核生物DNA复制过程中对聚合酶和解旋酶的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
段江燕 《山西师范大学学报:自然科学版》1997,11(3):56-58
多胺存在于一切细胞中,调控着细胞的生长、增殖、分裂和分化.本文着重阐述了多胶在真核生物DNA复制过程中对聚合酶和解旋酶的作用. 相似文献
24.
建立了一种简便、快速、准确的检测CYP2C9基因Arg144Cys位点和Ile359Leu位点多态性的新方法.该方法采用与模板具有1个碱基错配的引物通过PCR在扩增产物中引进限制性酶切位点,即扩增引进限制性酶切位点(amp lification-created restriction sites,ACRS),其中通过上游引物在扩增Arg144Cys位点的片断中引入AvaⅡ切点,使得野生型基因CYP2C9*1和突变型基因CYP2C9*2的PCR产物中分别含有2个和1个AvaⅡ切点;通过下游引物在扩增Ile359Leu位点的片断中引入MvaⅠ切点,使得野生型基因CYP2C9*1和突变型基因CYP2C9*3的PCR产物中分别含有1个和2个MvaⅠ切点.将来自Arg144Cys位点和Ile359Leu位点的PCR产物各取一份测序,表明错配碱基成功引入PCR产物中.将包含Arg144Cys位点的PCR产物用AvaⅡ消化,将包含Ile359Leu位点的PCR产物用MvaⅠ消化,然后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染进行基因分型.由于野生型基因和突变型基因的PCR产物中都至少含有1个酶切位点,能完全避免因限制性核酸内切酶失活或酶切不完全而导致的基因分型错误. 相似文献
25.
作者研究的目的是建立一种较为灵敏、简便的方法检测环氧合酶COX 2 .先设计了一对针对COX 2的特异性引物 ,建立了以半定量逆转录 聚合酶链反应 (Semi QuantitativeReverseTranscrip tionPCR ,SQRT PCR)方法检测COX 2的mRNA ,用该方法检测 7种结肠癌细胞和非甾体类抗炎药吲哚美辛 ,作用于其中一种细胞后的COX 2mRNA .实验结果显示 ,半定量RT PCR法可以灵敏、快速地反映COX 2mRNA表达水平的变化 ,为寻找新的COX 2选择性抑制剂和分析NSAIDs抗炎作用机理提供了一种新的方法 . 相似文献
26.
FD-TRT耐热逆转录酶的特性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
殷长传!遗传工程国家重点实验室 颜学恒!遗传工程国家重点实验室 郑佐华!遗传工程国家重点实验室 黄啸宇!遗传工程国家重点实验室 毛裕民!遗传工程国家重点实验室 《复旦学报(自然科学版)》1998,37(2):225-228
从嗜热细菌FD3009中克隆并分离纯化得到的耐热逆转录酶(FD-TRT),逆转录反应在65℃高温下进行,可克服常温逆转录酶的许多缺点,以酵母核糖体rRNA为模板,以与255和18S rRNA匹配的寡聚脱氧核苷酸为引物,探明了FD-TRT的最适反应条件: 25mmol/L Tris-HCl(pH 8.5,25℃),25 mmol/L(NH4)2SO4,2 mmol/L MnCl2,100 μg/ml明胶.5 unit RNasin,250 mmol/L 4种 dNTP, 1μCi3 H-dCTP, 12ug RNA,25 pmol引物,并在此条件下测得 FD-TRT和 Taq DNA 聚合酶逆转录活力与聚合酶活力的相对比值分别为0.056,0.0045. 相似文献
27.
了解成人呼吸道感染患者急性肺炎衣原体感染的发病情况。呼吸道感染患者110例,同时采集痰和咽拭子标本,应用聚合酶链式反应(PCR)检测肺炎衣原体DNA及采静脉血检测肺炎衣原体抗体。本组患者17例(16%)有肺炎衣原体近期感染的急性抗体,12例(11%)痰和(或)咽拭子肺炎衣原体PCR检测阳性,联合应用两种方法的阳性率为23%(25/110例)。肺炎衣原体急性感染以哮喘急性发作、肺炎、COPD急性加重和急性支气管炎患者多见(分别为57%、35%、26%和25%),其临床表现无特征性。本组成人呼吸道感染患者肺炎衣原体急性感染的发病率较高,提示肺炎衣原体是呼吸道感染的重要致病原。 相似文献
28.
29.
正交设计优化山茱萸ISSR-PCR反应体系研究 总被引:2,自引:0,他引:2
利用正交试验设计法,从引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度、Mg2 浓度和dNTP浓度4种因素3个水平,对山茱萸ISSR-PCR反应体系进行优化分析,并在此基础上对模板DNA浓度、PCR反应过程中的退火温度进行梯度检测.结果表明,20 μL ISSR-PCR反应体系中各因素的最佳浓度分别为:1×PCR buffer、150 μmol/L dNTP、1.0 μmol/L引物、2.5 mmol/L Mg2 和2.0 U TaqDNA聚合酶,最佳模板DNA浓度为20~80 ng,引物UBC835的最佳退火温度为57.2℃. 相似文献
30.
Novel protein detection method based on proximity-dependent polymerase reaction and aptamers 总被引:1,自引:0,他引:1
Yang XiaoHai Wang Lei Wang KeMin Tan WeiHong Tang HongXing Meng XiangXian Guo QiuPing 《科学通报(英文版)》2008,53(2):204-208
In recent years, specific detection of proteins is one of the hot issues about aptamers in proteomics. Here we reported a simple, sensitive and specific proximity-dependent protein assay with dual DNA aptamers. Thrombin was used as the model protein, and two aptamer probes with complementary sequence at 3′-end were designed for the two distinct epitopes of the protein. Association of the two aptamers with thrombin resulted in stable hybrids due to the proximity of 3′-end, then polymerase reaction was induced. The amount of obtained dsDNA was indicated using the fluorescence dye Sybr Green I. The results showed that the initial velocity of polymerase reaction had a positive correlation with concentration of thrombin. The advantages of this dual-aptamer-based approach included simple and flexible design of aptamer probes, high selectivity and high sensitivity. The detection limit was 6.9 pmol/L. 相似文献