宫颈癌组织差异表达基因的检测及分析

选取三例经分型明确为HPV16感染的宫颈癌病例,取癌组织(T)、癌旁组织(N)及远瘤正常宫颈组织(F)标本,用Roche NimbleGen芯片系统筛选出差异表达的基因并进行分析.三例标本中,癌组织与远瘤正常宫颈组织相比,差异表达基因共有673个,其中261个上调,412个下调;差异表达基因主要有原癌基因、抑癌基因、细胞信号转导、代谢、免疫应答、细胞受体、蛋白翻译合成有关基因等.     

重庆南川区道地药材玄参遗传多样性ISSR分析

本研究利用ISSR-PCR分子标记技术分析研究了重庆市南川区五个地方人工种植玄参的遗传多样性,利用7条UBC引物共扩增出了61条DNA片段,其中多态性片段为48条.片段长度约为250~2000bp,每条引物扩增出的DNA片段数为4~14条.同时采用NTSYSpc2.1软件计算出五个区域之间和区域内部子区域的玄参的Nei’s遗传距离,并用UPGMA法分别构建了系统树.结果表明五个地方人工种植玄参存在一定的遗传多态性,但其地方之间差异并不明显,其遗传多样性主要在同一地方内的子区域间被观察到.     

成都地区人乳头瘤病毒型别分布研究

应用反向膜杂交技术对1668例标本进行型别鉴定和统计分析.在1668例标本中,共检出阳性标本673例,感染率为40.3%;其中单重感染512例,占阳性标本的76.1%,双重感染96例,占阳性标本的14.3%;单重感染中的高危型感染318例,占阳性标本的47.3%,低危型感染194例,占阳性标本的28.8%.结果表明成都地区HPV感染率较高,且以单一基因型感染为主,其中HPV-16感染率最高,其次是HPV-18,低危型HPV感染以HPV-6和HPV-11为主.     

液相芯片快速检测结核耐药基因方法建立

基于Luminex100^TM技术平台,结合多重PCR技术,以5’生物素标记引物为信号指示,在H₉37)RV结核标准株做对照下,对104株结核分枝杆菌分离株的LFP耐药rpoB基因和INH耐药的katG,inhA基因进行检测,并与药敏试验绝对浓度法和测序结果比较.结果表明:液相芯片检出结果与药敏法比较,104株分离株中LFP、INH、多重耐药的检出结果分别为:液态芯片检测73株、50株、48株;药敏检测结果为74株、58株、53株;对比检出率98.6%,86.2%,90.6%.液相基因芯片技术对耐药,耐多药结核的检测,具有特异性高,敏感性强的特点,是检测结核分枝杆菌耐药基因的有效方法,可用于临床检测.     

过表达has-miR-145对人恶性多发性畸胎瘤细胞增殖凋亡的影响

通过构建hsa-miR-145的重组体pGenesil-1-miR-145, 并瞬时转染到人恶性多发性畸胎瘤细胞(NTERA-2)后, 利用qRT-PCR法检测hsa-miR-145, 以及肿瘤发生相关基因OCT4, SOX2, c-Myc, KLF4, FSCN1在转录水平的表达差异;同时利用MTT法和流式细胞术Annexin V-APC/7-AAD双染法检测hsa-miR-145对NTERA-2细胞增殖的生物学效应和细胞凋亡的影响. 结果表明:hsa-miR-145的高表达导致NTERA2细胞增殖明显减弱, 凋亡率增加;转染重组质粒hsa-miR-145后, OCT4, SOX2, c-Myc, FSCN1基因的表达量均有所降低, 提示miR-145的过表达可能通过抑制靶基因的表达从而影响生殖肿瘤细胞的生物学功能.     

金佛山特有杜鹃花遗传多样性分析

利用ISSR分子标记初步分析了重庆金佛山特有的4种杜鹃花的亲缘关系,从100个引物中筛选出13个能扩增出清晰条带并具有多态性的引物.共扩增出了239条DNA片段,分子量约为200~1500bp.其中多态性片段约为171条,平均每条引物扩增出18.38条DNA片段.同时采用DPS软件计算出4种杜鹃花的Nei’S遗传距离,并用NTSYSpc2.1中的UPGMA法构建了系统树.结果表明4种杜鹃花之间既有相同的遗传背景,又存在一定的差异.4种杜鹃花明显分为两类:树枫杜鹃为一类,疏花美容杜鹃,金佛山美容杜鹃与阔柄杜鹃为一类.     

CEA、NSE、SCC-Ag和CYFRA21-1在肺癌化疗前后表达水平的分析

应用电化学发光法测定110例肺癌患者化疗前、90例肺癌患者化疗后和65例肺良性疾病患者血清中CEA、NSE、SCC-Ag和CYFRA21-1的表达水平,计算阳性率,并进行统计学分析.结果表明:肺癌患者化疗前血清中CEA、NSE、SCC-Ag和CYFRA21-1表达水平显著高于肺部良性病变组(P0.01);CEA在肺腺癌、SCC-Ag在肺鳞癌、NSE在SCLC中水平最高,与其他组比较差异有统计学意义((P0.01或P0.05));NSCLC组CYFRA21-1表达显著高于SCLC组,两组比较差异有统计学意义(P0.05).肺癌组90例患者化疗后CEA、NSE、SCC-Ag和CYFRA21-1的表达较前下降,差异均有统计学意义(P0.05));复查CT发现化疗无效病例SD+PD组4种肿瘤标志物表达水平较化疗前升高,与化疗前比较P0.05.     

液相芯片技术在人乳头瘤病毒检测和分型中的应用

从50例疑似感染人乳头瘤病毒（Human Papillomavirus, HPV）患者的标本中提取DNA,运用液相芯片技术对提取的DNA进行7种低危型和19种高危型检测,并与反向点杂交检测结果进行比较.50例标本中,液相芯片检出阳性26例,阳性率为52%,其中单一亚型感染20例占40%,多重感染6例占12%,比反向点杂交的多重感染阳性检出率高4%.