2008年大理学院附属医院肠杆菌科细菌耐药性监测

目的:研究大理学院附属医院2008年临床分离肠杆菌科细菌的耐药状况,为更好地指导临床应用抗生素.方法:收集本院所分离的190株肠杆菌,分析其菌种来源、临床分布和耐药性.细菌分离、培养按常规方法,菌种鉴定采用Vitek-32全自动微生物分析仪,药敏试验采用K-B法.结果:190株肠杆菌科细菌中,菌种来源于口痰76株(40%)、尿液42株(22.1%)、消化道分泌物26株(13.7%)、其它46株(24.2%).分离菌种前3位分别是大肠埃希菌103株(54.2%)、克雷伯菌属37株(19.5%)、肠杆菌属15株(7.9%)、其它35株(18.4%).耐药性分析提示大肠埃希菌对头孢他啶/棒酸、阿米卡星、亚胺培南、氨苄西林,棒酸、哌拉西林/舒巴坦等耐药率较低,分别为5.2%、11.1%、11.3%、13.4%、14.3%;而对氨苄西林高度耐药,为78.9%.结论:临床分离的肠杆菌科细菌耐药性较严重,而头孢他啶,棒酸有一定的效果.     

食品中四环素残留快速检测方法的初步建立

为了建立金标记快速检测试纸条检测食品中四环素(TC)残留的新方法,用硝酸纤维素微孔滤膜(NC膜)作为包被材料;实验室自制金标记抗TC单抗,选择原溶胶40%制备金标记抗体溶胶;以TC-BSA包被检测线(T线),包被浓度选择1.5 mg/mL;实验室自制兔抗鼠IgG包被质控线(C线),包被浓度选择2.5 mg/mL.该试纸条灵敏度可达50 ng/mL,与酶联免疫法试剂做对比,100份牛奶样品的灵敏度等各项指标符合率为100%.该试纸条具有质量优良、操作简便、不需仪器设备、保质期长等特点,适用于食用动物养殖场、食品加工企业和食品进出口检验检疫等单位食品中TC的快速检测.     

岩黄连与抗生素配伍后对金黄色葡萄球菌体外抑菌效果的比较

目的 为了探讨岩黄连与抗生素配伍后体外联合抑菌效果。方法 使用岩黄连、青霉素、左氧氟沙星、磷霉素、头孢拉定作为试验药物,以金黄色葡萄球菌作为试验菌株,采用倍比稀释法测定岩黄连与四种常用抗生素的最小抑菌浓度,采用棋盘稀释法测定岩黄连与四种抗生素的联合抑菌浓度。结果 岩黄连、青霉素、左氧氟沙星、磷霉素和头孢拉定最小抑菌浓度分别为20 mg/mL、0.25 μg/mL、0.5 μg/mL、0.5 μg/mL和1 μg/mL;岩黄连与青霉素、头孢拉定、左氧氟沙星联用后表现为协同作用;岩黄连与磷霉素联用后表现为无关作用。结论 岩黄连与青霉素、头孢拉定、左氧氟沙星联用可达到高效抑制金黄色葡萄的作用,对临床应用具有一定的参考意义。     

水环境中头孢他啶降解行为规律探讨

利用高效液相色谱分析技术,研究了水环境中头孢他啶的降解行为规律,考察的影响因素包括温度、pH、水体类型、水体是否灭菌及光照等.结果表明,头孢他啶在试验条件下的降解过程符合一级动力学方程,半衰期为1.83 d.温度从5 ℃升高到45 ℃,头孢他啶降解速率加快了38.27倍;pH值从5升高到9,其降解速率加快了13.03倍;在污水中降解也较快.本研究为头孢他啶在水环境中的行为规律探讨和生态风险评价提供了基础数据.     

四环素类和磺胺类双重抗生素抗性菌的特性

为了研究抗生素抗性菌、抗性基因的扩散和污染可能产生对环境和人类健康的威胁,分8 次采集城市污水处理厂（sewage treatment plants,STPs）水样,应用肉汤微量稀释法和聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction, PCR)方法,分离、鉴定对四环素、磺胺甲恶唑敏感菌株,分析其抗生素抗性,检测抗性基因．结果：本研究中,从某污水处理厂出水中分离22株四环素类抗性菌、26株磺胺类抗性菌,检测其对常用抗生素耐受性及抗生素浓度、抗性基因(antibiotic resistance genes,ARGs)含量。四环素类和磺胺类双重抗性菌在5.04×102～2.51×103 CFU·mL-1（colony-forming unit,CFU）范围内,抗性菌对9 种抗生素具有抗性,最高耐受力为512mg·mL-1,其中,对氯霉素耐受能力最强,对青霉素、氨苄青霉素、头孢氨苄、环丙沙星、庆大霉素、阿奇霉素耐受力次之,对利福平耐受力最弱;检测到双重抗性基因,其中tet W和sul1的含量较高. 结果表明：城市污水处理厂的四环素类和磺胺类抗生素含量较高,存在双重抗性菌、抗性基因。     

基于SPR生物传感器的抗生素残留检测及影响因素分析

为了检测抗生素提出了采用生物分子相互作用原理的检测方法.采用基于表面等离子体共振技术的光学传感器,通过自组装分子技术将单克隆抗体固定到传感器金膜表面用于检测对应抗原,即待测抗生素,并记录传感器表面液体折射率的变化曲线,其反映了被吸附抗生素的浓度的大小.对不同浓度的氨苄青霉素水溶液进行了测定,得到该传感器的工作曲线,整体工作曲线呈单调上升,且线性关系较好,同时得到了该检测方法的最低检测极限为1.25ng/mL,明显低于欧盟规定的最大残留限量(4μg/kg).进一步分析了流速、温度、pH值和离子浓度对检测的影响,获得了该检测方法的最佳测量条件,提高了该方法的检测精度,从而保障了该方法的有效性.     

蘘荷与抗生素配伍前后对金黄色葡萄球菌抑菌效果的比较

目的为了探讨常用抗生素与蘘荷配伍后的联合抑菌效果。方法使用蘘荷、头孢拉定、左氧氟沙星、头孢曲松、青霉素和头孢呋辛为试验药物,使用金黄色葡萄球菌作为试验菌种,采用倍比稀释法和棋盘稀释法分别检测最小抑菌浓度和联合抑菌浓度指数。结果表明蘘荷、青霉素、头孢拉定、头孢曲松、头孢呋辛、左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为32 mg/mL和0.25、2、2、0.5、0.125μg/mL,蘘荷分别与头孢曲松、青霉素联用后表现为相加作用,蘘荷分别与头孢拉定、头孢呋辛联用后表现为无关作用,蘘荷与左氧氟沙星联用后表现为拮抗作用。结论表明蘘荷分别与头孢曲松、青霉素联用可以达到高效抑制金黄色葡萄的作用,对蘘荷临床应用具有参考意义。     

Flow microcalorimetry as a tool for an improved analysis of antibiotic activity: The different stages of chloramphenicol action

Summary Flow microcalorimetry in combination with photometric mass determination of staphylococci in suspension was used to reveal alterations in the intensity, extent and efficiency of bacterial metabolism during inhibition of protein synthesis by chloramphenicol. It could be demonstrated that these three parameters of metabolic activity were distinctly affected by this drug, and that the method described promises to be a more reliable tool for assaying the degree and the mode of bacteriostatic inhibition than the conventional determination of the minimum inhibitory concentration.     

降低酶联核酸适配体分析方法中非特异性吸附的分析研究

以检测蜂蜜中的四环素残留为例，构建间接竞争酶联核酸适体分析法（ic-ELAA），就ic-ELAA中非特异性吸附的影响因素进行分析，探讨降低非特异性吸附的措施。结果表明：选择2 μg/mL四环素-牛血清蛋白在10 mmol/L Tris-HCl（pH 8.0）中过夜包被，次日用0.5 g/mL酪蛋白封闭1 h，竞争反应后用6 μg/mL链霉亲和素-辣根过氧化物酶催化颜色反应放大竞争效果，最后采用450 nm和630 nm双波长读数，可得到灵敏度为0.035 ng/mL的竞争曲线。同时，根据长期实验经验，提出其他降低非特异性吸附的注意事项。     

纳滤/反渗透膜去除水中四环素的性能

基于动态与静态试验方法对芳香聚酰胺纳滤膜(NF)与反渗透(RO)膜去除饮用水中四环素物质(TC)进行了研究.试验结果表明,NF膜和RO膜对水中TC具有吸附作用;NF膜和RO膜对TC的吸附质量分数分别为35%和40%,且与水中TC的质量浓度成正比,平衡吸附率与初始质量浓度无明显关系;TC在NF膜和RO膜表面的静态吸附特性均遵循Freundlich吸附等温线.通过膜表面的红外光谱图和扫描电子显微镜图发现,NF膜和RO膜对TC的吸附作用较为显著,膜表面存在多种吸附位点,膜孔吸附造成膜的不可逆膜污染.