有机磷农药与牛血清白蛋白的相互作用及分析应用

应用荧光光谱、同步荧光光谱和紫外吸收光谱研究了3种有机磷农药(敌百虫、乐果和甲基对硫磷)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.实验表明敌百虫和甲基对硫磷与BSA的相互结合作用是单一静态猝灭过程,而乐果与BSA的相互结合作用是静态为主、动态为辅的猝灭过程.首次发现有机磷药物与BSA结合作用同药物疏水性直接相关:随着有机磷药物疏水性增大,猝灭常数KSV增大、BSA构象改变增大、药物与BSA的结合距离减小.有机磷药物与BSA的结合作用随着有机磷疏水性增强而增加.基于蛋白质与有机磷的结合作用研究,初步探讨了水产品中有机磷药物残留的提取方法,并利用气相色谱法检测了水产品中乐果和甲基对硫磷的含量,方法的回收率为85.71％～107.21％.该方法准确度高、简单、快速.     

变性剂对重组牛肠激酶活性的影响

肠激酶(EK,EC 3.4.21.9)是一种在基因工程产品中广泛应用的工具酶.以小分子荧光物质Gly-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-β-萘胺为底物,采用荧光跟踪法研究了变性剂盐酸胍、硫脲、尿素对重组牛肠激酶(rEK)活力的影响及抑制动力学.结果表明:盐酸胍、硫脲、尿素均对该酶的活性有较强的抑制作用,它们对该酶的半抑制浓度(IC50)分别为0.025,0.080和0.750 mol/L.研究的3种变性剂对该酶的抑制均显示可逆抑制机理;抑制类型也均为竞争性类型,测定它们对酶的抑制常数KI分别为0.015,0.060和0.553 mol/L.     

乙基紫分光光度法测定牛血清白蛋白

研究了乙基紫 (EV)与牛血清白蛋白 (BSA)的结合反应 .在pH =7.2的条件下 ,BSA的加入使乙基紫的最大吸收峰波长红移 5nm(5 95→ 6 0 0nm) ,并使染料吸光度增大 .6 0 0nm处吸光度与BSA在一定浓度范围内有线性关系 ,线性响应范围为 1.0 0× 10 -7～ 2 .0 0× 10 -6mol/L ,检测下限为 8.0 0× 10 -8mol/L .该法简便、快速、干扰少、灵敏度较高 ,用于牛血清白蛋白样品测定结果满意 .初步探讨了EV -BSA结合机理 ,Scatchard图表明有两类结合 ,第一类结合的最大结合数为 2 .3,结合常数为 6 .5× 10 5L/mol;第二类结合的最大结合数为 5 .6 ,结合常数为 2 .0× 10 5L/mol.讨论了乙醇、十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB) ,十二烷基苯磺酸钠 (DBS)对结合反应的影响     

奶牛精子尾部颈段的超微结构

奶牛精子尾部颈段的中央结构是连接片(connecting piece).连接片具横纹,由踝状突(capitulum)和9条节柱(segmented columns)构成。踝状突位于核后端的植入窝中。踝状突的腹面与节柱相连。有3条节柱在近踝状突腹面处聚集成为一条较大的节柱,与踝状突前端的腹面相连。另有2条节柱也在近踝状突腹面聚集成为另一条较大的节柱,与踝状突后端的腹面相连。其余4条节柱与踝状突两侧的腹面相连。9条节柱的末端分别与9条外周致密纤维(outer dense fibers)相连。近端中心粒位于踝状突之中,远端中心粒分裂成为9条柱状结构。每条柱状结构分别依附于每一条节柱与外周致密纤维连接处的内侧。在远端中心粒的中央有轴丝的两条中央微管和两条内棒(internal robs)。在连接片的外侧方还有线粒体。线粒体不形成线粒体鞘。     

川西北草地牛皮蝇蛆病的研究

对川西北草地牛皮蝇蛆病的流行情况、季节动态及防治技术的研究表明：（１）临床检查牦牛１１４９头、黄牛５９９头，皮蝇蛆寄生率分别为８４．２５％和７０．２８％，寄生强度为１８．３２个和２．１７个；剖杀检查牦牛１１４头，皮蝇蛆寄生率为１００％，寄生强度为７１．６６个．（２）川西北草地皮蝇的种类，经形态学和生化特性鉴定定为牛皮蝇Ｈ．ｂｏｖｉｓ、纹皮蝇Ｈ．ｌｉｎｅａｔｕｍ和中华皮蝇Ｈ．ｓｉｎｒｎｓｅ等三种．（３）弄清了皮蝇各期幼虫在牛体内的寄生季节、寄生部位、移行动态、三期幼虫寄生方位、入土化蛹羽化规律、成虫活动规律等．（４）害获灭（Ｉｖｏｍｅｃ）是防治牛皮蝇蛆病的首选药物，具有效果好、广谱、剂量小、安全、使用方便、易于推广等优点，防治后可获显著经济效益和明显社会效益     

疯牛病诊断技术现状及前景

牛海绵样脑病(BSE)是动物传染性海绵样脑病(TSE)中的一种,潜伏期2～6年,临床上常表现出神经紧张、不安、恐惧,具有攻击性,BSE病牛的病理组织学变化多局限于中枢神经系统,用SAF的抗体对病牛脑组织切片进行免疫组织化学染色,可以检出变性的PrP 神经元的特征性病理变化常出现在延髓、小脑腹侧角处延髓、脑桥中 诊断方法有PrP的生物学测定法、组织病理学检查、PrPSc的免疫学检测(细胞免疫化学染色、免疫印迹、组织印迹、ELISA)、SAF检查和PrP基因分析等,其中的PrPSc检测对TSE的诊断具有特异性     

3-甲基-6-氨基-5-氰基-4-（4-对甲氧基）苯基-1-苯基-1，4-二氢吡喃并[2，3-c]吡唑与牛血清白蛋白相互作用的研究

采用荧光光谱法研究了人体生理pH值条件下,3-甲基-6-氨基-5-氰基-4-(4-对甲氧基)苯基-1-苯基-1,4-二氢吡喃并[2,3-c]吡唑(Ⅰ)与牛血清白蛋白(BSA)分子间的相互结合反应;获得了不同温度下Ⅰ与BSA作用的结合常数K和结合位点数n;并根据Forster非辐射能量转移机理,计算出其与BSA相互作用时给体-受体间距离r为5.01 nm及能量转移效率E为0.280.证实了Ⅰ与BSA的相互结合作用为单一的静态猝灭过程,确定了其与BSA分子间有较强的结合作用,且结合力以疏水作用力为主.     

甲基红与牛血清白蛋白结合的光谱研究

牛血清白蛋白在不同pH的溶液中存在N(Native,pH～7.0),B(Basic,pH～9.0),E(Expanded,pH3.5以下)等几种结构形态.用光谱技术研究了染料甲基红(Methyl red,MR)和BSA的结合机理,研究了MR和BSA在不同pH的三酸缓冲溶液中的结构和构象变化,荧光猝灭方法测得两者在pH3.0,4.9,7.0,9.0溶液中结合常数分别为7.544×105 L/mol,7.594×105 L/mol,4.728×105 L/mol,4.880×105 L/mol;结合位点数分别为17.89,0.978 3,3.079,8.865.同步荧光显示MR加入对Tyr残基微环境没有影响,但对Trp残基产生微扰,使其最大发射波长发生蓝移.图5,表1,参20.     

光谱法研究一种含咪唑啉酮类衍生物与牛血清白蛋白的相互作用

应用荧光光谱及紫外可见光谱的方法研究了2-氨基-5-苯亚甲基-4H-咪唑啉-4-酮衍生物(BPH5)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.实验发现BPH5能强烈猝灭牛血清白蛋白的荧光强度,其荧光猝灭机理为动态猝灭.在此基础上计算了二者相互作用的结合常数、结合位点数及△H,△G,△S等热力学参数等.结果表明BPH5与BSA以1∶1结合,其反应主要是熵驱动的,相互作用力主要为疏水作用力.根据F(o)rster无辐射能量转移理论计算了给体(BSA)与受体(BPH5)之间的结合距离.