玻璃介质寡核苷酸DNA Microarrays的研制

建立了一种快速，简便的寡核苷酸链固定在普通玻璃介质上的ＤＮＡ微矩阵并通过荧光检测的方法。首先将２种不同的寡核苷酸在固定在普通玻璃介质上，使寡核苷酸共价结合在经过处理的普通玻璃片表面形成点直径大约３ｍｍ的ＤＮＡ微矩阵，然后先后分别与其对应互补的红黄不同颜色的荧光寡核苷酸链进行杂交实验。     

CCoAOMT基因反义表达载体的构建及转化苎麻的研究

采用RT-PCR的方法,克隆烟草木质素合成关键酶咖啡酰甲基转移酶(CCoAOMT)基因并测序．构建CCoAOMT基因反义表达载体,通过农杆菌介导法对苎麻进行遗传转化,得到转基因植株．采用PCR方法对其进行分子检测．为利用基因工程技术,创造适合我国国情的环保型低木质素苎麻转基因新品种奠定了基础。     

Effect of antisense oligonucleotides targeting telomerase catalytic subunit on tumor cell proliferationin vitro

To screen specific antitumor drugs targeting telomerase catalytic subunit (hEST2), 12 differenthEST2 antisense oligonucleotides were designed based on hEST2 mRNA second structure and transfected into tumor cell lines by the lipofectin-mediated method. Cell growth activity was evaluated by MTT assay.hEST212 was picked out and its specificity, antitumor tree and continuous effect were analyzed. The results showed thathEST212 had promising antitumor activityin vitro, hEST2 can be used as a pratical target and an antisense drug candidate for cancer.     

应用压电型生物传感器研究寡核苷酸在石英金膜表面的固定

应用课题组自行研制的压电型生物芯片分析仪,利用分子自组装技术将5端巯基修饰的寡核苷酸固定在石英金膜表面,制成DNA传感器,并用它进行了寡核苷酸在石英金膜表面的定量分析,初步检测了所研制的分析仪的基本性能。     

LZF-Ⅰ探针及草鱼等三种鱼类的DNA指纹图的初步研究(英文)

研究鲤鱼,草鱼和鲢鱼等三种鱼类DNA指纹图的结果是;在大于4kb的谱带中,草鱼为15条,鲤鱼11条,鲢鱼仅3条.我们自己制备的LZF—I探针,能与鱼类基因组DNA中的简单重复序列杂交形成杂交分子.据分子杂交原理知,三种鱼类基因组DNA中存在同源DNA片段,同时,草鱼和鲤鱼间的亲缘关系较草鱼和鲢鱼间的关系近.     

杂交捕获抑制聚腺苷二磷酸核糖聚合酶基因的体外翻译

体外转录载体ｐＳＰ７２—Ｃ１２和ｐＳＰ７２—Ｃ１．４分别经ＸｂａⅠ和ＸｈｏⅠ酶切线性化后，用ＳＰ６ＲＮＡ聚合酶与Ｔ７ＲＮＡ聚合酶进行体外转录得到编码人聚腺苷二磷酸核糖聚合酶基因的ｍＲＮＡ全序列（３．７ｋｂ）及与其５’端编码区的起始密码子ＡＵＧ上游区域互补的反义ＲＮＡ片段（１．４ｋｂ）。等摩尔数的正、反义ＲＮＡ通过酚相乳浊杂交技术进行分子杂交。在网织红细胞裂解物体外翻译系统中，正义ＲＮＡ能正常地翻译出蛋白质；而反义ＲＮＡ与正义ＲＮＡ杂交可阻断翻译的进行。     

生命金属寡核苷酸螯合物的制备及反应机理

制备了５′端共价连接ＥＤＴＡ的寡聚核苷酸与生命金属的螯合物ＯＤＮ－５′－ＥＤＴＡＭ（ｎ＋），其中Ｍ（ｎ＋）为Ｆｅ（Ⅱ），Ｃｏ（Ⅱ）或Ｃｕ（Ⅱ）；分析、计算了这３个螯合物形成的最佳ｐＨ值范围，ＯＤＮ－ＥＤＴＡＦｅ（Ⅱ）为ｐＨ５．８～８．６，ＯＤＮ－ＥＤＴＡＣｏ（Ⅱ）为ＰＨ４．６～８．１，ＯＤＮ－ＥＤＴＡＣｕ（Ⅱ）为ｐＨ３．４～５．７；在此条件下，剪切反应必须的Ｍｇ２＋并不与Ｆｅ（Ⅱ），Ｃｏ（Ⅱ）或Ｃｕ（Ⅱ）竞争ＥＤＴＡ，也不会形成沉淀；讨论了ＯＤＮ－ＥＤＴＡＭ（ｎ＋）切割ＤＮＡ双链的反应机理：修饰寡核苷酸通过氢键在ＤＮＡ双链的大沟结合形成三链体，在Ｏ２和还原剂ＤＴＴ作用下，Ｆｅ作为催化剂，产生羟基自由基，氧化糖环，切割ＥＤＴＡＦｅ（Ⅱ）附近的ＤＮＡ双链．