rhBMP-6的表达和纯化

骨形态发生蛋白(bone　morphogenetic protein，BMP)—6属于转化生长因子(transforming growth fac-tor)—β超基因家族，在骨的形成中具有重要作用，并受雌激素选择性上调．本研究利用RT—PCR从人胎盘组织中扩增BMP—6成熟肽的DNA片段，克隆到pGEx—5x—1中，构建GST—BMP6融合蛋白表达载体pGEx—BMP—6，转化E.coli DH5a．克隆质粒转化的工程菌，经IPTG诱导4h后，高效表达GST—BMP6融合蛋白，在SDS—PAGE上出现一新蛋白带，分子量约为42kD，约占总蛋白的25％，表达产物以包涵体形式存在．菌体超声破碎，经0．3％N—十二烷基肌氨酸钠(SKL)溶解包涵体，离心后的上清液加入0．6％　Triton　x—100整合SKL，然后利用谷胱甘肽Sepharose—4B亲和层析纯化．结合GST—BMP6的介质经洗涤、xa因子酶切得到纯度达95％的rhBMP—6蛋白。     

关于Pro/E2001用非闭合截面创建实体特征的探讨

文章探讨了Pro/E用非闭合截面创建实体特征的几种特定情况,通过实例介绍了创建这些实体特征的具体工作步骤,指明了不同特定情况用非闭合截面创建实体特征的本质区别以及注意事项。     

对创建高校课余体育俱乐部的一点思考

随着中国加入WTO、《基础教育课程改革纲要》的实施，高校体育将面临前所未有的机遇和挑战，诸多方面必须进行一系列的改革和整合，课余单项体育俱乐部的创建就是高校体育教育改革的重要一环。本对创建高校课余体育俱乐部进行了研究和探讨，希望能为意欲创建体育俱乐部的学校提供借鉴和参考。     

无线局域网IEEE802.11标准安全机制研究

从无线局域网的组成和应用环境出发,结合Internet系统的体系结构,按照密码学的基本原则对无线局域网IEEE802.11标准的安全机制进行了分析,指出了现有的无线局域网IEEE802.11标准所存在的安全缺陷以及常见的对其进行攻击的方法.     

成就动机的激发与维持在体育专业足球教学中的实验研究

运用麦克利兰的成就动机理论，采用文献资料法、问卷调查法、实验对比法和数理统计的方法，在高等师范体育教育专业足球教学中进行激发与维持学生成就动机的实验研究．结果表明：实验班成绩优于对照班，且有显著性的差异．在足球教学中激发与维持学生的成就动机，可以有效地提高足球教学的效果和学生的足球成绩．     

Inhibitory effect of the adenovirus type 5 E1A protein expressed in the yeast system

The human adenovirus type 5 E1A, a tumor- suppressor gene[1], codes for two major related proteins of 243 amino acids (12S) and 289 amino acids (13S) by al-ternative splicing in two exons[2]. Studies have been shown that E1A can regulate expression of many genes and cell cycle[3]. Both in vitro and in vivo experiments indicated that E1A could induce tumor cells differentia-tion, convert tumor cells into an epithelial phenotype, in-hibit tumor cell growth and metastasis and strongly en-ha…     

箭叶淫羊藿及近缘种的分类研究

对箭叶淫羊藿Epimediumsagittatum及近缘种进行了分类研究。将箭叶淫羊藿光叶变种E sagittatumvar glabratum、宽序变种E sagittatumvar pyramidale,毡毛淫羊藿龙头虎变种E coactumvar longtouhum并入天平山淫羊藿E myrianthum;描述了2个新变种,即贵州淫羊藿E sagittatumvar guizhouense和剑河淫羊藿E myrianthumvar jianheense;确认毡毛淫羊藿E coactum为一独立种。     

Inhibitory effect of the adenovirus type 5 E1A protein expressed in the yeast system of the human tumor cell growth

Adenovirus 5 type E1A as a tumor suppressor gene can inhibit tumor growth and enhance the censitivity of chemotherapy and radiotherapy.E1A have the ability to integrate into the host genome,resulting in long-time expres-sion that induces Rb gene inactivation and animal cells im-mortalization.This prompted us to select the E1A protein for treatment of cancer in order to overcome the limitations of E1A gene therapy.Thus,we firstly comstructed E1A eu-caryotic expression vector (pPIC9/E1A),transformated the pichia pastoris yeast cells(GS115) and screened the high-expressing recombinant strains.The positive yeast strains were cultured in the shake flask,and induced for 3d.The crude E1A protein was purified using two steps of col-umu chromatography on HiTrap Q and HiTrap SP.The pu-rified E1A protein was identified by SDS-PAGE and Western blot.E1A protein was mostly located at cellular unclear when Cheriot delivered E1A protein into cells.The analysis in vitro indicated that the E1A protein arrested LN686 cell cycle at G2/M phase,and significantly inhibited the growth of LN686 tumor cells.The current studies firstly provided an experimental basis to further develop E1A protein for tumor treatment.     

重组人截短型IL-6在大肠杆菌DH5α中的高效表达与纯化

为研究重组人截短型白细胞介素6(rhIL-6)工程菌高效表达的影响因素及纯化方法的优化.观察不同培养温度对重组人截短型IL-6工程菌生长密度和IL-6表达的影响;复性蛋白终浓度对复性效率的影响;细菌诱导培养后,经破菌-洗包-溶包初步纯化后,再经柱层析纯化IL-6.其结果为30℃培养后42℃诱导培养5h的IL-6表达效率最高,达32.8%;复性蛋白终浓度在0.5 g/L以下时,蛋白复性效率最佳,比活性为4.42×108 μmol/min*mg-1;进一步柱层析后,IL-6的纯度达96.5%,得率可达46.5%.最后得出培养和纯化工艺简便易行,可获得高纯度、高比活性的截短型rhIL-6的结论.     

CAN总线接口模块的设计与实现

控制器局域网总线(CAN)是目前较流行的现场总线之一，是一种有效支持分布式控制或实时控制的串行通信网络。由于其高速、高可靠性及独立的设计，被广泛应用与工业现场控制系统中。本以单片机AT89C51和SJA1000控制器为核心组成CAN总线接口模块。介绍硬件原理图和SJA1000的初始化、发送和接收模块程序的设计方法。