临猗梨枣组培快繁的研究

临猗梨枣是特产于中国的稀有名贵鲜食品种,为了使其尽快大量繁殖用于生产,作者于1993－1997年进行了组培快繁研究,结果表明：临梨枣茎段最适在改良MS培养基上生长,易形成丛状芽和丛生苗,繁殖系数4,25－30天新生长高可达5－7（10）cm;分化苗最适生根培养基为1／2改良MS＋IBA0．4mg/1,5-7天生根,4周长成健壮的完整植株,高度达7cm左右,且根系发达,一间20个培养架的培养室一年可繁殖试管苗30万株以上,现已培育出完整植株6万余株。     

嗜热脱硫菌BSM培养基成分响应面法优化

采用单因素分析法、显著因子筛选实验设计法、爬坡实验设计法和响应面分析法,对534-16嗜热脱硫菌的培养基成分和培养条件进行了优化研究。结果表明,当培养基的主要成分为:葡萄糖21.00g/L,酵母粉5.25g/L,Na2HPO4·2H2O 6.60g/L时,脱硫菌生长速率最快。最适合菌种生长的条件为:培养基pH值为7.0,培养温度为53.39℃。     

RP-HPLC定量检测蛹虫草培养基中活性成分

建立一种反向高效液相色谱法定量检测蛹虫草培养基中活性成分腺苷含量和虫草素含量的方法.色谱柱为Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:0.02 mol/L KH2PO4∶甲醇(体积比85∶15)溶液;流速:1.0 mL/min;检测波长:260 nm.腺苷的线性测量范围为0.5~100μg/mL(R=0.999 9),平均回收率为105.3%,标准品RSD=0.76%(n=5),样品RSD=1.87%(n=5);虫草素的线性测量范围为0.5~100μg/mL(R=0.999 9),平均回收率为104.0%,标准品RSD=0.95%,样品RSD=1.23%.本测定方法线性范围宽、分离度好、具有良好精密度,可定量、准确分析不同蛹虫草培养基中活性成分腺苷和虫草素含量.     

短小芽孢杆菌BA06产表面活性素培养基组分的优化

本研究发现短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)BA06菌株具有发酵产生表面活性素的能力,并对发酵培养基的组分进行了优化.单因素试验发现,麦芽糖、酵母粉、蛋白胨、磷酸氢二钠对其产量影响较大;对上述4个因素进行正交优化组合得到该菌产生表面活性素的最适培养基:麦芽糖2.97%、NaNO_30.30%、酵母粉0.81%、蛋白胨1.10%、MgSO_40.01%、CaCl_20.01%、KH_2PO_40.24%、Na_2HPO_4 4.47%,pH 7.0;在此条件下进行了0.5L的发酵实验,表面活性素粗品产量从原来的1.43g/L增加至6.48g/L,提高了3.53倍.结果表明短小芽孢杆菌BA06菌株具有进一步开发、生产表面活性素的潜力.     

沙棘种子萌发的基本培养基的优化

以沙棘“实优一号”品种的种子作为外植体,经过前期的消毒处理后分别接种在MS、1/2 MS、1/4 MS培养基中,在11 ℃培养10 d后移入25 ℃中培养,接种培养30 d后观察统计种子在不同基本培养基中的萌发率、萌发时间以及胚根生长状况,从而确定沙棘种子萌发的最佳培养基类型。结果显示:在相同培养条件下,1/2 MS培养基中的沙棘种子在培养7 d后最先萌发,培养30 d后其萌发率最高(16.67 %),胚根分化出2～4个分支且生长状况最佳;1/4 MS培养基次之;MS培养基最差。因此,1/2 MS培养基为沙棘“实优一号”品种种子萌发的最佳基础培养基。     

解淀粉芽孢杆菌GSBa-1产凝乳酶培养基组成的优化

从甜酒曲中分离筛选得到1株解淀粉芽孢杆菌菌株GSBa-1,为了提高该菌株液态发酵产凝乳酶的能力,采用单因素实验和响应面法优化其产酶培养基组成。通过单因素实验分析了碳源、氮源、金属盐、磷源对菌株GSBa-1产凝乳酶的影响,并采用响应面法对产酶培养基中麦芽糖、蛋白胨和酵母浸粉含量3个主要因素的优化组合进行了定量研究,确定解淀粉芽孢杆菌GSBa-1产凝乳酶的优化培养基组成为:麦芽糖1.93g/L、蛋白胨10.89g/L、酵母浸粉2.15g/L。在此优化培养基培养条件下,该菌株产凝乳酶活力可达(562.57±7.67)Su/mL,接近理论预测值537.10Su/mL,且平均误差为4.53%。优化后解淀粉芽孢杆菌GSBa-1产凝乳酶活力比基础培养基提高了1.88倍。     

一种简易的细胞克隆方法

由单一个细胞经过繁衍后所形成的细胞群称克隆细胞群［１］。因此不论用什么方法克隆细胞,都必须保证所分离出来作为克隆化的细胞确为一个而不是两个或更多。关于细胞克隆的方法,一般用连续克隆化３次的方法［２］,但此法较麻烦,得出的克隆群也不多。我们在克隆脑胶质细胞瘤（５Ｗ０－３８）细胞株实验中摸索出一种既准确且简单易行,克隆率又高的方法,现介绍如下。１　材料与方法　　（１）材料：ＲＰＭＩ１６４０（ＧＩＢＣＯ公司产）,０．２５％胰酶（ＧＩＢＣＯ公司产）,２０％胎牛血清,９６孔板（ＣＯＲＮＩＮＧ产）。（２）方…     

改良焦性没食子酸法培养厌氧菌

目前厌氧菌分离培养法主要有焦性没食子酸法、厌氧气袋法、厌养缸法和厌养培养箱法［１］。厌养缸和厌养培养箱法需要一定设备或特制设备,因而其应用受到一定限制。焦性没食子酸法或厌氧气袋法进行厌养菌分离培养,由于其方法简单、操作容易,在大专院校微生物教学或基层医疗单位仍广泛使用,但分离效果不易控制。为此,本实验室在教学实践中,通过改良焦性没食子酸法分离培养厌养菌,分离出的菌落及溶血明显好于普通焦性没食子酸法或厌养气袋法。现总结如下。１　材料与方法（１）普通焦性没食子酸法：将厌氧菌接至血琼脂平皿上,在该平皿…     

虫草菌最适培养基的正交试验研究

以三因素三水平的正交试验设计培养条件,接种量５％（Ｖ／ｖ）,ｐＨ＝６．５,１２０ｒ／ｍｉｎ,１８℃,７２ｈ,对虫草菌进行液体培养．通过对生长的菌丝体干重的测定及分析,得到该菌种生长最适培养基配方为：葡萄糖,２０ｇ／１０００ｍｌ;ＮＨ４ＮＯ３,１ｇ／１０００ｍｌ;Ｋ２ＨＰＯ４,１ｇ／１０００ｍｌ．并证明碳源为其生长的最重要营养因素