酿酒酵母对外源叶绿体摄取研究

为了研究酿酒酵母对外源叶绿体的摄取情况，可以通过PEG诱导酿酒酵母细胞原生质体摄取菠菜细胞离体叶绿体，然后利用光学显微镜和荧光显微镜观察融合后叶绿体、酵母，部分细胞可能存在融合情况，同时融合后细胞存在一定形态改变。通过提取菠菜细胞中的叶绿体，诱导酿酒酵母原生质体细胞对叶绿体的摄取。在荧光显微镜的观察下，由于叶绿体在有蓝光激发时可以自发红色荧光，同时酵母细胞在丫啶橙的染色条件下，在蓝光激发时显绿色，可以通过颜色初步判断细胞是否融合。     

微生物让饮品更香醇

正利用微生物,在适宜的条件下,人们可以将特定的原料经过特定的代谢途径转化为我们所喜爱的各种饮品,诸如美酒、香茶、味噌等等细菌和真菌能利用来自水果和谷物中的糖分与蛋白质作为原材料,生产出一些完全不同的复杂化合物,进而给食物带去新的口味。这就是为什么喝下一杯啤酒给人的快感多于往嘴里塞一口大麦,为什么味噌汤和泡菜独具风味。接下来,我们将认识一些把平凡原料变成特色饮品的微生物。酒番扑鼻"我真的十分喜欢酵母,"食品科学作家哈罗德·麦基说,"在所有微生物中,酵母似乎最擅长产生新的香味。"其中,又以酿酒酵母的表现最为突出。烘烤面包和酿造啤酒都离不开酿酒酵母。麦基说:"在啤酒和面包中你都能感受到酿酒酵母带来的香味,虽然这些香味差距很大,但都很美味。"酿酒酵母这一种群中有着数不清的种类。几个世纪以来,酿酒师一直在寻找不同种酵母的差异,这关系到淡啤酒和浓啤酒、英国和比利时的浓啤酒的差别。举例来说,工作人员会在浓麦芽汁中分别加入加利福尼亚浓啤酒酵母,英式伯顿浓啤酒酵母,德国科隆酵母和淡啤酒酵母。其中,伯顿酵母代谢生产酯类的能力最强,发酵得到的啤酒果香味最浓,而淡啤酒酵母生产的酯类则     

特色白肋烟浸膏的发酵法制备及其在卷烟中的应用

利用生物技术开发一种有特色的白肋烟浸膏,开展了酿酒酵母HHL-1处理白肋烟叶制备白肋烟浸膏的工艺研究,优化了乙酸添加量、葡萄糖添加量、酿酒酵母的接种量、发酵温度和发酵时间.优化条件为:乙酸添加量(质量分数)为0.02%,葡萄糖添加量(质量分数)为1.0%,接种量(体积分数)为1.0%,发酵温度为26℃,发酵时间为7 d.香气成分分析结果表明,一共鉴定出26种香气成分,其中有5种是特色白肋烟浸膏影响卷烟品质的关键香气成分,分别是2-(1-甲基-2-吡啶基)-吡啶(尼古丁) 58.234 mg/kg,降茄二酮 0.129 mg/kg,新植二烯 0.152 mg/kg,肉豆蔻酸 0.239 mg/kg,硬脂酸 0.154 mg/kg.特色白肋烟浸膏在3元'红金龙'、 5元'红金龙'、 10元'红金龙'、 17元'黄鹤楼'均有增加烟草本香、增加烟气浓度、增加劲头和细腻柔和烟气的作用,可以作为4种卷烟的烟用添加剂,且其添加量(质量分数)在0.05%时效果较好.     

酵母菌原生质体形成与再生多因子综合效应分析

研究了酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂和预处理剂对酿酒酵母Ａ００１与克鲁维酵母Ｙ０３４原生质体形成时间与再生的综合效应．统计分析表明，在２％蜗牛酶，菌龄为对数生长期时，影响原生质体形成的主要因素是酶解时间、酶解温度，且两者存在交互作用．影响原生质体再生的主要因素是渗透压稳定剂．确立了实验菌株原生质体形成与再生的最佳匹配条件     

酿酒酵母金属硫蛋白的表达、纯化及活性检测

通过PCR从酿酒酵母基因组DNA上扩增得到酿酒酵母基因CUP1编码的金属硫蛋白序列.将其编码序列克隆到质粒pTWIN1构建重组表达质粒pTWIN1-MT,转化大肠杆菌感受态细胞ER2566.重组融合蛋白CBD-intein1-MT在IPTG的诱导下得到表达,经SDS-PAGE和蛋白质印迹鉴定.用重组菌分别进行铜离子耐受...     

酿酒酵母乙醇发酵性能与胁迫耐性的相关性

针对酿酒酵母在乙醇发酵过程中所面临的高温、高渗透压和高浓度乙醇等环境胁迫问题,研究了乙醇发酵性能与胁迫耐性的相关性.通过对13株工业菌株和l株实验室标准菌株的发酵性能(包括菌株的生长速率、底物的消耗速率和乙醇终产量)的分析,发现这14株酵母菌可以根据其发酵性能的差异归类划分为3类.通过线性判别分析法(LDA)建立了酵母...     

Elp3基因缺失对酿酒酵母咖啡因耐受性的影响

过量咖啡因(Caffeine, CAF)对真核细胞有毒害作用.Elp3是组蛋白乙酰转移酶Elongator复合物的催化亚基,其缺失会影响Elongator的功能,进而使酵母产生对CAF敏感表型.为研究酿酒酵母CAF耐受性,以不同浓度CAF处理野生型、elp3⊿及转入完整和部分缺失Elp3的elp3⊿菌株,检测其敏感性,并通过RT-qPCR和ChIP实验研究了热激胁迫下SSA3的表达.结果发现常温下各菌株生长均随CAF浓度的增加而减缓,且elp3⊿细胞CAF耐受性下降更显著;高温处理使elp3⊿菌株对CAF更加敏感;在elp3⊿菌株中转入两保守功能域缺失的Elp3,其咖啡因耐受性并无明显变化;无论热激与否,elp3⊿菌株SSA3表达均显著低于野生型对照,Elp3直接参与热激胁迫下SSA3的转录延伸.研究表明Elp3基因缺失和高温处理均可使酿酒酵母的CAF耐受性降低;Elp3两保守功能域为其参与CAF胁迫反应所必需;高温协同处理下elp3⊿菌株CAF耐受性的显著降低可能与此条件下SSA3等应激基因表达受阻有关.     

混合菌发酵泔水的条件优化与效果研究

文章对黑曲霉(Aspergilus niger)d2和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)s1混合发酵泔水生产复合菌体蛋白的条件进行研究,并测定所得菌体的粗蛋白质量分数和发酵前后泔水中总糖、蛋白质、脂肪质量分数和COD(chemical oxygen demand)的变化。单因素实验结果表明,黑曲霉和酿酒酵母混合菌发酵的适宜碳源、氮源和无机盐分别为玉米淀粉、酵母膏和KH2PO4,最适pH值为5,温度为30℃。混合菌(黑曲霉、酿酒酵母)发酵菌丝干质量比黑曲霉发酵高20%。通过响应曲面法对混合菌发酵条件进一步优化,得到玉米淀粉和酵母膏的最适添加量分别为2.1%和3.2%,最适pH值为5.1。在上述条件下,发酵60h后测得菌体干质量约为18.53g/L,菌体的粗蛋白质量分数为47.6%。泔水中总糖、总氮和脂肪的利用率分别为85.6%、78.2%和67.9%,COD的去除率为90.4%。     

酿酒酵母CMK2在氧化胁迫应答中的作用

CMK2是酵母中和哺乳动物钙调蛋白激酶CaM kinasesⅡ同源的一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,具有重要调控作用.本文利用PCR方法扩增含内源启动子的CMK2基因序列,克隆到pRS316上并在C末端连接6个组氨酸标签,构建真核表达载体,转化不同酵母进行表达,并通过免疫印迹鉴定.发现氧化胁迫后细胞中CMK2发生磷酸化.生长实验结果显示cmk2缺失的细胞对氧化胁迫非常敏感,而Δcmk2中转入pRS316- cmk2-HIS6可以部分恢复Δcmk2细胞对双氧水的敏感性.表明CMK2参与细胞氧化胁迫应答途径,并发挥正调控作用.     

一种高效的酿酒酵母和毕赤酵母电击转化法

 电击转化由于其高效率而被广泛地应用于酿酒酵母的转化过程中。但是由于菌种退化或是暴露于污染的环境,很多菌种的转化效率会显著地下降2~4个数量级。探索了一种改进的电击转化方法,它借助于单链载体DNA和转化后在YPD培养基中的复苏过程,可以使转化效率比之前曾报道过的已经最优化的用醋酸锂和二硫苏糖醇进行预处理的转化方法效率提高13倍。在毕赤酵母中使用这一改进的方法,可以使转化效率提高高达114倍,在一些已经退化的酿酒酵母菌株中,此方法也可以提高转化效率将近100倍。这一方法将为几乎所有酿酒酵母和毕赤酵母的分子操作提供极大的便利。