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31.
突变体库是研究基因功能的重要工具。拟南芥种质资源库(ABRC)储藏了几乎涵盖所有基因的突变体材料,其中T-DNA插入突变体占绝大多数。然而,当在T-DNA插入突变体中进行遗传转化或与其他转基因报告系统进行杂交时容易引起转基因沉默,阻碍了相关研究的开展,甚至产生错误结论。甲基磺酸乙酯(Ethyl Methane Sulfonate, EMS)诱变和快中子诱变技术可获得非转基因突变体,但这两种方法均为随机诱变技术,需要通过基因定位来确认突变位点,无法实现基因靶向敲除。CRISPR/Cas9可以对目的基因进行靶向编辑,获得不携带转基因的突变体。拟南芥中尚无利用CRISPR/Cas9进行高通量突变体库构建的报道。本研究共设计900条sgRNAs靶向300个RNA通路相关基因,通过合成sgRNA混池文库、引入DsRed2荧光筛选标记、将DNA条形码和二代测序技术相结合,实现了对转基因阳性苗的高通量鉴定和分型,并对T2代具有发育缺陷的无荧光植株进行负向筛选,成功鉴定到了不含转基因的smd3-b和rlua4突变体。 相似文献
32.
为了实现气溶胶分布的成像探测,根据平面激光诱导荧光技术的基本原理,对气溶胶浓度分布平面探测系统单个像元的探测能力进行了理论分析.以荧光素作为目标粒子,对波长为450 nm的连续激光在探测平面内的分布和衰减变化进行了计算,并根据波长范围为500~600 nm的荧光信号和sCMOS相机单个像元输出信号的信噪比公式,分析了不同系统参数变化对单个像元可探测最低粒子数的影响,以及在探测平面内的分布差异,从而了解不同系统参数对气溶胶平面成像探测准确度的影响规律,为研究气溶胶分布的平面探测提供有效方法和理论参考. 相似文献
33.
为了突破传统测温技术应用的局限性,利用NaY (WO4)2:Eu3+玻璃陶瓷(glass ceramics,GC)实现了具有非接触、实时响应、自校准等优势的双模荧光强度比(luminescence intensity ratio,LIR)测温。采用高温熔融淬灭法制备出含NaY (WO4)2:Eu3+纳米晶的透明GC样品,并进行系列光谱测量和热敏性能分析。结果表明,样品中Eu3+的激发态能级5D1和5D0和基态能级7F2和7F0为两对独立的热耦合能级,可分别基于这两对热耦合能级实现性能优异的双模LIR温度传感。该双模LIR测温技术数据可靠、测温范围广、灵敏度高,再结合GC材料优势,是可用于光纤温度传感器的核心技术材料。 相似文献
34.
细胞内游离钙的荧光测定 总被引:2,自引:0,他引:2
徐基贵 《合肥工业大学学报(自然科学版)》1998,(5)
由于细胞内游离钙浓度是重要的生理指标之一,所以重点在测定细胞内游离钙的技术要求、影响测定的重要因素、钙的荧光试剂以及新进展四个方面叙述。实验证明Wazo-1试剂对细胞无毒性,与钙反应迅速、灵敏及选择性高,细胞内游离钙的荧光测定快速准确。但是,荧光试剂的合成路线较长,还需要改进。 相似文献
35.
近年来兴起的双-嵌入剂是一类安全、方便、高灵敏度、低背景的理想核酸探针,当使用激光激发的共焦荧光扫描仪检测时,对核酸的分析可达pg级,赶上甚至超过了放射性同位素标记物.本文对双-嵌入剂荧光核酸探针的结构、性质、应用及发展展望几方面进行了综述. 相似文献
36.
3—取代—7—二烷氨基—1,4—氧氮杂萘—2—酮的合成 总被引:1,自引:0,他引:1
以间氨基苯酚为原料,用硫酸酯进行N-烷基化,亚硝酸钠亚硝化水合肼在氮气流下还原得到2-氨基-5-二烷氨基酚,在乙醇介质中将该中间体进一步与α-酮酸乙酯进行成环反应,合成出4种3-取代-7-二烷氨基-1,4-氧氮杂萘-2-酮,该类化合物是用途广泛的新型荧光染料中间体,以此为原料制得的新型氧氮杂萘酮染料的吸收和发射谱带位置可以利用用取代基和溶剂效应在很宽的范围内移动,讨论了这些化合物具有荧光性的原因。 相似文献
37.
于清水 《中山大学学报(自然科学版)》1998,37(1):55-8
测量了掺杂型PMMA-DR1聚合物中偶氮基团分子在不同掺杂浓度,及其在极化与非极化状态下的荧光特性,对此荧光特性进了理论分析和解释,研究了生色团分子在聚合物中相互作用的内在规律性。 相似文献
38.
胰腺腺泡细胞胞浆游离钙浓度的测定及药物作用的研究 总被引:3,自引:1,他引:2
本文建立了用荧光指示利Fura-2测定胰腺腺泡细胞胞浆游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的实验技术,包括:胰腺腺泡的分离制备;Fura—2/AM的负载;腺泡悬液的荧光光谱测量等.测定了胰腺腺泡细胞[Ca2+]i。的静息值和卡巴可促腺泡细胞[Ca2+]i升高的剂量—效应关系及动力学过程,并研究了柴胡总皂甙对胰腺腺泡细胞[Ca2+i]的影响.发现0.01mg/ml浓度的柴胡总皂甙使胰腺腺泡细胞[Ca2+]。明显升高,0.1mg/ml浓度时可使[Ca2+]。升高到静息值的3倍,提示柴胡总皂甙的促酶分泌作用是通过胞内[Ca2+]i升高介导的. 相似文献
39.
与其它稀土离子的自身荧光相比,稀土Ce3+水合离子的荧光要强得多,并且在很宽的浓度范围内与其浓度成很好的正比关系,因此可以用来确定Ce3+离子的浓度.tRNA非常强烈地猝灭Ce3+水合离子的荧光.采用荧光滴定的方法研究了Ce3+-tRNA体系,并用Scatchard方法测量了Ce3+离子和tRNA的结合数和结合常数,结果发现:tRNA中有2组Ce3+结合位置,其结合常数分别为约108mol/L和105mol/L.向体系中加入精胺可使结合数和结合常数稍微降低. 相似文献
40.
稀土—二苯甲酰甲烷配合物微晶的合成及荧光光谱 总被引:3,自引:0,他引:3
李建平 《湖北大学学报(自然科学版)》1998,20(1):59-62
合成了稀土(RE)二苯甲酰甲烷(DBM)配合物RE(DBM)3·H2O(RE=Sm、Eu、Tb、Dy、Pr、Nd、Gd、Y),用红外光谱、紫外光谱及差热热重谱对其进行了表征,用透射电镜观察了该配合物微晶尺寸,并研究了配合物在固态时的荧光光谱.结果表明该系列配合物微晶的尺寸在50~250nm之间,在RE(DBM)3·H2O(RE=Sm、Eu)中可观察到较强的稀土离子的特征发射,而在RE(DBM)3·H2O(RE=Tb、Dy)中只能观察到配体自身发射 相似文献