全文获取类型
收费全文 | 4099篇 |
免费 | 152篇 |
国内免费 | 365篇 |
专业分类
系统科学 | 5篇 |
丛书文集 | 123篇 |
教育与普及 | 597篇 |
理论与方法论 | 44篇 |
现状及发展 | 25篇 |
综合类 | 3822篇 |
出版年
2024年 | 14篇 |
2023年 | 59篇 |
2022年 | 70篇 |
2021年 | 85篇 |
2020年 | 68篇 |
2019年 | 100篇 |
2018年 | 44篇 |
2017年 | 68篇 |
2016年 | 70篇 |
2015年 | 100篇 |
2014年 | 237篇 |
2013年 | 165篇 |
2012年 | 180篇 |
2011年 | 219篇 |
2010年 | 186篇 |
2009年 | 276篇 |
2008年 | 257篇 |
2007年 | 232篇 |
2006年 | 194篇 |
2005年 | 216篇 |
2004年 | 215篇 |
2003年 | 198篇 |
2002年 | 177篇 |
2001年 | 161篇 |
2000年 | 159篇 |
1999年 | 159篇 |
1998年 | 107篇 |
1997年 | 87篇 |
1996年 | 64篇 |
1995年 | 65篇 |
1994年 | 94篇 |
1993年 | 74篇 |
1992年 | 70篇 |
1991年 | 48篇 |
1990年 | 37篇 |
1989年 | 38篇 |
1988年 | 12篇 |
1987年 | 8篇 |
1986年 | 2篇 |
1944年 | 1篇 |
排序方式: 共有4616条查询结果,搜索用时 15 毫秒
131.
李娜 《科技导报(北京)》2011,(12)
近日,中国农业大学李宁院士的科研团队在PlosOne杂志发表研究成果,他的团队将编码人乳中的乳清蛋白、乳铁蛋白、溶菌酶及一些抗体基因转入牛的体细胞核,并用这些体细胞核成功克隆出17头转基因牛,可以生产出含有人乳活性成 相似文献
132.
对四川猪链球菌2型(S.suis 2)强毒株05ZYH33溶血素样蛋白(hemolysin-like protein,HLP)编码基因hlp进行序列信息分析、分子克隆表达及溶血活性检测,深入探讨HLP的致病机制.用Blast和Clustal X程序对HLP进行基因同源性分析,用Signal P 4.1和TMHMM Server 2.0分析HLP氨基酸序列.设计合成hlp引物进行PCR扩增,先后将hlp克隆入p MD-18T载体和p ET30a表达载体中,构建p ET30a::hly原核表达质粒.将重组质粒转化至E.coli BL21中诱导表达,并对重组HLP蛋白进行纯化和溶血活性检测.同源性分析表明HLP与多种具有溶血活性的蛋白相似性较高.氨基酸序列分析发现HLP具有信号肽和跨膜区,且由DUF21、CBS和Cor CHly C 3部分组成.序列测定显示hly片段全长1 335 bp,编码445个氨基酸.重组质粒经诱导表达和纯化后电泳显示,HLP分子量约为70 k Da,具有溶血活性.结果表明,HLP是一个膜结合蛋白,不同于能够分泌到细胞外的溶血素Suilysin.重组HLP具有一定的溶血效价,此可能与致病相关. 相似文献
133.
《信阳师范学院学报(自然科学版)》2016,(2):299-303
固醇转运蛋白(SCP-2)是广泛存在于脊椎动物和无脊椎动物中的非特异性脂转运蛋白.任何影响固醇转运蛋白基因表达的因素都会影响甾类激素的合成,进而影响生物体的发育.目前对该基因的转录调控研究较少,主要集中在哺乳动物.环境、激素、转录因子等对SCP-2基因的表达调控均有影响,对SCP-2基因作为害虫防治靶标的可能性进行了初步的探讨.C/EBP蛋白作为调控Sl SCPx基因表达的转录因子,可以调控Sl SCPx基因的表达.推测了C/EBP蛋白成为新的害虫防治的靶标的可能. 相似文献
134.
目的:为了加强蓝莓籽的综合利用开发,研究蓝莓籽不同组分的抗氧化能力。方法:对蓝莓籽的醇提取物、蓝莓籽多酚、蓝莓籽蛋白、蓝莓籽多糖进行提取分离,采用AAPH法、DPPH法对各组分进行抗氧化能力测定。结果:AAPH法测定的抗氧化能力由高到低的顺序为:蓝莓籽多糖﹥蓝莓籽蛋白≈α-VC﹥醇提取物﹥蓝莓籽多酚;DPPH法测定的清除自由基能力由高到低顺序为:蓝莓籽多酚﹥醇提取物≈α-VC﹥蓝莓籽蛋白﹥蓝莓籽多糖。结论:蓝莓籽不同组分均显示出一定的抗氧化能力,其中以蓝莓籽多糖、蓝莓籽蛋白的抗氧化能力最强,蓝莓籽多酚的清除自由基能力最强。 相似文献
135.
为研究磷酸肌醇磷酸酶肌管相关蛋白14(MTMR14)在骨骼肌发生中的作用,通过组织切片和细胞培养技术研究了MTMR14敲除对骨骼肌的组织结构、成肌细胞分化和增殖的影响.结果表明:MTMR14敲除小鼠的腓肠肌和比目鱼肌的结构较同窝野生型小鼠产生了明显变化,MTMR14敲除小鼠的成肌细胞的分化和增殖成肌小管过程较野生型显著加快.MTMR14基因敲除后小鼠肌管细胞中平均细胞核数显著增加.故MTMR14基因缺失/敲除导致骨骼肌组织结构异常,干扰了骨骼肌肌肉发生过程中的成肌细胞的增殖和分化. 相似文献
136.
水孔蛋白(Aquaporins,AQP)是新近发现的一组与水通透有关的细胞膜转运蛋白,广泛存在于动物、植物及微生物细胞膜上.目前已有很多文献介绍水孔蛋白的发现过程和研究进展,但有关知识还没有融入高校的专业教材或及教学中去.本文首先对水孔蛋白作简单介绍,随后提出了将该进展融入生理学,更新其理论的设想. 相似文献
137.
138.
克隆、表达和纯化禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为筛选与NS1相互作用的宿主蛋白以及深入研究NS1蛋白的功能打下基础.根据GenBank中收录的H5N1亚型禽流感病毒NS1基因序列,设计并合成一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增AIV NS1基因,将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a载体上,经酶切分析及序列测定正确后,鉴定出NS1基因的阳性重组子.阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用1 mmol/L IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE检测,获得预期蛋白的表达,通过Ni-NTA树脂蛋白纯化系统对NS1蛋白进行纯化.结果成功克隆H5N1亚型AIV的NSl基因,其核苷酸序列长度为678 bp,重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量与预计大小一致,表达产物在上清及包涵体中均有表达.经纯化,目的蛋白纯度高达90%,成功表达纯化出28KD的NS1融合蛋白并鉴定其免疫学活性.成功克隆和表达了禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为进一步研究NS1蛋白的生物学功能奠定了坚实基础. 相似文献
139.
《科技导报(北京)》2011,(8)
荧光蛋白是目前细胞分子生物学广泛应用的分子探针,在细胞生物学、组织工程、基础医学领域也有广泛应用。荧光蛋白以其可以在活细胞正常生理水平下即时反应细胞、生物大分子和蛋 相似文献
140.
为建立氧化还原因子-1(Ref-1)的原核表达系统,将经过酶切后的人源Ref-1编码片段定向克隆到pGEX-4T-3载体上,构建了pGEX-4T-3/Ref-1原核表达载体,重组质粒转化至BL21(DE3)工程菌,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导重组工程菌表达可溶性融合蛋白,谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B(Glutathione Sepha-rose 4B)亲和纯化重组蛋白,透析后用聚乙二醇8000(PEG8000)浓缩,获得纯度达92%的融合蛋白,产率为3.7 mg/L,融合蛋白占菌体总蛋白的6.8%.蛋白质印迹(Western blot)显示该蛋白可以被抗体特异性识别,证实其为GST-Ref-1融合蛋白.GST-Ref-1蛋白体外增强了激活蛋白-1(AP-1)的DNA结合能力,并能拮抗H2O2造成的AP-1氧化损伤. 相似文献