High-quality reference genes for quantifying the transcriptional responses of Oryza sativa L. (ssp. indica and japonica) to abiotic stress conditions

Rice (Oryza sativa L.) is important to food security and is also an excellent model plant for numerous cereal crops. A functional genomics study in rice includes characterization of the expression dynamics of genes by quantitative real-time PCR (qPCR) analysis; this is a significant key for developing rice varieties that perform well in the face of adverse climate change. The qPCR analysis requires the use of appropriate reference genes in order to make any quantitative interpretations meaningful. Here, the new potential reference genes were selected from a huge public database of rice microarray experiments. The expression stability of 14 candidates and 4 conventional reference genes was validated by geNorm PLUS and NormFinder software. Seven candidates are superior to the conventionally used reference genes in qPCR and three genes can be used reliably for quantitating the expression of genes involved in abiotic stress responses. These high-quality references EP (LOC_Os05g08980), HNR (LOC_Os01g71770), and TBC (LOC_Os09g34040) worked very well in three indica genotypes and one japonica genotype. One of indica genotypes including the Jasmine rice, KDML105 developed in Thailand for which no reference genes have been reported until now.     

猪瘟病毒RT—PCR产物的T载体克隆,测序及同源比较

利用ＴａｑＤＮＡ聚合酶的无模板延伸活性制备了可直接克隆ＰＣＲ产物Ｔ载体，苗对猪瘟病毒ＨＣＬＶ株的ＲＴ－ＰＣＲ产物进行了克隆。     

一种家猪基因组PCR—RAPD反应体系的建立

以家猪血样为ＤＮＡ提取材料 ，建立了用改进方法提取ＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ－ＲＡＰ 分析的最佳条件，获得稳定而理想的ＰＣＲ－ＲＡＰＤ扩增结果。     

一种快速检测植物病毒RNA蓄积量的竞争PCR方法

用Oligo6.6软件在pUC18上设计1对比目的基因多100～200 bp的内参引物,摸索了目的基因和内参共同扩增的竞争PCR反应条件,测定了嘧肽霉素处理对烟草组织中烟草花叶病毒RNA相对含量的影响,同时用间接ELISA方法验证了该方法.试验结果表明:竞争PCR的方法能够快速、相对准确的测定植物组织中病毒RNA蓄积量的变化情况.     

人IFN—γ免疫——PCR检测方法的建立及其灵敏性的比较

γ－干扰素（得称ＩＦＮ－γ）首次被描述和提纯是基于它能干扰成纤维细胞中病毒的复制，干扰素阻止病毒复制的能力是很多种生物学检测ＩＦＮ－γ方法的依据，在外周血清里的天然ＩＦＮ－γ含量可能低于目前免疫学检测方法的极限，因此，我们建立了一种改良的免疫ＰＣＲ检测方法。即将抗原体反应的专一性同ＰＣＲ技术的高敏感性的结合，构建一种集ＡＢＣ及ＰＣＲ于一体的双得放大系统，用兔抗ＩＦＮ－γ多抗包被酶联板，加ＩＦＮ－γ     

研究管道生物膜中细菌生长的几种方法比较

近十余年来,人们越来越关注饮用水在管道中的二次污染问题,并提出了饮用水质的生物稳定性概念。本文用传统的生物分菌鉴定,扫描电镜拍摄．PCR三种方法分析给水管网生物膜中细菌的生长情况并比较几种方法的优缺点。传统的生物学分菌方法在对多种类的细菌分菌存在一定的局限性,鉴定周期长且根据普通的生理生化试验一些菌株只能鉴定到属。电镜应用已较为广泛,可以很好地用于细菌生长研究。PCR等分子生物学方法简单、快速,可以推广应用。     

两个东亚钳蝎神经毒素cDNA的克隆和序列分析

构建了东亚钳蝎毒腺组织ｃＤＮＡ库，用ＰＣＲ筛选到两个新的神经毒素全长ｃＤＮＡ，其开放阅读框（ＯＲＦ）包括：信号肽、成熟毒素和／或额外氨基酸序列，它们编码的成熟毒分别命名为ＢｍａＴＸ９和ＢｍＩＴ（ｃｐ）２。序列分析表明，ＢｍａＴＸ９为抗哺乳动物神经毒素；ＢｍＩＴ（ｃｐ）２为痉挛型昆虫毒素。章还对东亚钳蝎神经毒素的命名，分类以及进化等问题进行了初步的探讨。     

甘蓝型油菜异胡豆苷合成酶(Strictosidine synthase)cDNA的克隆与分析

以无花瓣与正常甘蓝型油菜幼嫩花蕾(长度小于0.2 mm)建立的差异表达文库中发现的异胡豆苷合成酶基因（STR）的一个cDNA片段为基础,利用RACE方法获得了甘蓝型油菜的STR基因cDNA全序列BnSTR.序列分析表明BnSTR全长1408 bp,开放阅读框从第20个碱基到第1291个碱基,推导的蛋白序列与Arabidopsis thaliana, Lycopersicon esculentum, Oryza sativa, Rauvolfia manni, Catharanthus roseus和Oph     

PCR和原要交技术检测鼻咽癌石蜡组织中HHV—6DNA

目的：为了解人疱疹病毒６型（ＨＨＶ－６）与鼻咽癌（ＮＰＣ）的可能关系，检测了ＮＰＣ发生不同阶段的石蜡组织中ＨＨＶ－６ＤＮＡ的存在情况。方法：采用ＰＣＲ、斑点杂交和原位杂交技术，共检测了４２例鼻咽癌石蜡组织、２１例鼻咽癌前病变石蜡组织和２７例正常鼻咽石蜡组织ＨＨＶ－６ＤＮＡ的存在情况。结果：通过ＰＣＲ扩增，在４２全ＮＰＣ组织中检出１３例存在ＨＨＶ－６ＤＮＡ，占３１％；２１例鼻咽癌前病变组织中１例阳性