假单胞菌DM11的二氯甲烷脱卤素酶研究──Ⅱ．动力学性质和抑制剂

对来自假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．）ＤＭ１１菌株的二氯甲烷脱卤素酶（简称ＤＭ１１脱卤素酶）的动力学性质和抑制剂进行了研究。用１／Ｖ对１／［ｓ］作图法，测出ＤＭ１１脱卤素酶以ＣＨ２Ｃｌ２、ＣＨ２Ｂｒ２、ＣＨ２Ｉ２、ＣｌＣＨ２Ｂｒ和ＣｌＣＨ２Ｉ等５种化合物为底物时的Ｋｍ值分别是６７、２０、５５、７和９μｍｏｌ／Ｌ，比活力分别是７７．８、１２３．３、７８．８、５６．１和６０．３ｍｋａｔ／ｋｇ蛋白。测定了１４种抑制剂对ＤＭ１１脱卤素酶的５０％抑制浓度（Ｉ５０）。甲基谷胱甘肽（ＧＳＣＨ３）是ＤＭ１１脱卤素酶的竞争性抑制剂，四硝基甲烷（ＴＮＭ）是非竞争性抑制剂，当甲基谷胱甘肽和四硝基甲烷与ＤＭ１１脱卤素酶一起保温时，甲基谷胱甘肽对酶有保护作用。     

尿素酶解的抑制反应动力学研究

研究了无机盐作为酶抑制剂，对尿素酶解反应速率的影响规律。用氨气敏电极跟踪反应进行分析。实验表明，无机盐能有效地抑制尿素的酶解反应。同时还研究了脲酶抑制机理。     

竹红菌乙素对肌质网Ca~(2+)-ATP酶蛋白色氨酸荧光猝灭研究

肌质网Ca~(2+)-ATP酶是一种重要的膜蛋白酶,它在肌细胞的收缩舒张功能中起重要作用,因而其动力学行为被广泛地研究,但是有关结构与功能之间关系的直接实验数据仍然不足.为了从分子水平上阐明Ca~(2+)-ATP酶催化原理,1993年Ferrira用荧光猝灭方法首先观察了肌质网Ca~(2+)-ATP酶在加入Ca~(2+)前后分子构象的变化.由于作者使用的猝灭剂是分子氧,除了在测定工作中使用不方便之外,灵敏度也不够高.为此本文用竹红菌乙素作为肌质网Ca~(2+)-ATP酶荧光猝灭剂,分别测定了该酶在有钙或无钙的条件下荧光猝灭的情况,结果证明竹红菌乙素可以在稳态和瞬态的条件下观察到体系中有钙或无钙时的荧光猝灭常数变化的情况(即不同的K_q值);进而说明了竹红菌乙素作为肌质网蛋白荧光猝灭剂可以得到比氧更多的信息和许多其他优点.     

丝兰酶及其提取工艺的研究

直接干燥丝兰叶表栅状组织获得粗酶。用硫酸铵分级盐析取得酶制剂，它的最适ｐＨ值为１２。用有机汞作配基的琼脂糖凝胶４Ｂ柱分离出酶，聚丙烯酸胺凝胶电泳证明柱分离物为两个蛋白酶组分（ＹｕｃｃａｉｎⅠ、Ｙｕｃ－ｃａｉｎⅡ），簿层等电聚焦电泳证实这两个组分等电点分别为ｐＨ值９．７７和ｐＨ值９．６１，ＳＤＳ电泳两个酶仅看到１条染色带，测得分子量为３万。它们的活性均依赖于巯基。     

Overinhibition of Mitogen-Activated Protein Kinase Inducing Tau Hyperphosphorylation

To reveal the relationship between mitogen-activated protein kinase (MAPK) and tau phosphorylation, we used different concentration of PD98059, an inhibitor of MEK (MAPK kinase), to treat mice neuroblastma (N2a) cell line for 6 h. It showed that the activity of MAPK decreased in a dose-dependent manner. But Western blot and immunofluorescence revealed that just when the cells were treated with 16μmol/L PD98059, tau was hyperphosphorylated at Ser396/404 and Ser199/202 sites. We obtained the conclusion that overinhibited MAPK induced tau hyperphosphorylation at Ser396/404 and Ser199/202 sites.     

血管生成抑制剂与肺癌治疗的研究进展

目的:探讨血管生成抑制剂治疗肺癌的研究进展.方法:收集该类药物的国内外近期资料加以综合归纳.结果:血管生成抑制剂治疗肺癌方法可行,前景诱人.结论:随着血管生成抑制剂的不断开发和研究,对于肺癌这一血管增生明显的肿瘤,深入研究抗血管治疗具有重要意义.     

松茸菇涂膜保鲜技术的研究

以新鲜松茸菇为实验原料,研究不同组成的保鲜液对松茸菇保鲜效果的影响。结果表明,对松茸菇保鲜贮藏效果较好的膜液组成和浸泡时间为:植物复配液10%,明胶2.5%,壳聚糖2.5%,甘油1%,蔗糖1.5%,可溶性淀粉10%,乙醇及其它72.5%,浸泡时间20 min。     

基质金属蛋白酶-28在人细胞滋养层细胞与绒毛膜癌细胞系JEG-3细胞中的表达

细胞滋养层细胞和肿瘤细胞的侵入行为具有惊人的相似性，其中基质金属蛋白酶（MMPs）是滋养层细胞和肿瘤细胞侵入的非常重要的介导因素。近来，MMPs家族的一个新成员－MMP－28被克隆并确定下来，采用反转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）、酶谱分析和Northern blot等方法，检测了妊娠早期细胞滋养层细胞和绒毛膜癌细胞系JEG－3细胞中MMP－28的基因表达和蛋白分泌情况。RT－PCR显示，细胞滋养层细胞JEG－3细胞均有MMP－28mRNA的表达；Northern blot研究显示，JEG－3细胞中MMP-28mRNA的表达强于细胞滋养层细胞中MMP－28mRNA的表达，具有时间依赖关系；酶谱分析显示，JEG－3细胞中MMP－228蛋白分泌 活性高于细胞滋养层细胞中MMP－28蛋白分泌活性，呈时间依赖关系，这与MMP－28的基因表达结果相一致。进一步证明了MMP－28可能在正常妊娠和肿瘤发展等一些与组织重建有关的过程中发挥一定的作用。     

胰岛素口服给药

注射是胰岛素目前临床应用的惟一给药途径，但由于半衰期短，需长期频繁注射，造成患者身体、心理和经济上的极大负担，口服胰岛素的最大优势在于减少与副作用相关的注射次数，增加病人的治疗依从性，从长远上降低糖尿病相关的发病率和死亡率，由于口服方便、安全且最符合内生胰岛素分泌模式，研发胰岛素口服剂型是目前国际胰岛素药物的发展前沿，研究集中在分子修饰、使用酶抑制剂和吸收促进剂，微粒等方面，其中，用生物降解高分子材料制备包封率、载药率和制剂稳定性较高的胰岛素毫微粒正成为主流方向，是最有希望的胰岛素口服制剂制备途径，口服剂型的研制成功、将是胰岛素非注射剂型研究的革命性突破，并会产生巨大的理论和商业价值。     

基质金属蛋白酶-26(MMP-26)在小鼠胚胎植入过程中的作用

基质金属蛋白酶-26（MMP-26，又称Endometase或基质水解素-2）是MMPs家族的一个新成员，它可在胎盘，子宫以及不同肿瘤细胞系中表达，采用子宫角注射，免疫组化，原位杂交，胚泡与子宫上皮单层培养，免疫印迹，RT-PCR和RNA印迹等多种体内外实验方法研究并报道了MMP-26在小鼠胚胎中的表达以及MMP-26抗体在胚胎植入中的作用，研究表明，MMP-26的mRNA与蛋白在小鼠胚泡中均有强烈的表达，此外，体内研究显示，MMP-26抗体能显著抑制小鼠胚胎的着床；在体外培养体系中，MMP-26抗体可显著抑制小鼠胚泡在子宫上皮单层上的黏附与扩展；同时，MMP-26抗体以剂量依赖关系抑制整合素αV亚基mRNA和蛋白的表达，研究提示，MMP-26可能直接或间接参与滋养层细胞侵入子宫内膜的过程，促使小鼠胚泡成功植入。