整体柱固定化胰蛋白酶反应器的设计及其在水解β-乳球蛋白中的应用

分别采用2.1、6.0μm的大孔有机整体柱为载体,制备固定化胰蛋白酶反应器(MITRs),比较不同方案对固定化得率及酶比活的影响. 相较于氰基硼酸,以2-甲基吡啶硼烷为还原剂的固定化方案虽提高了酶的比活,但导致固载量减少了32%~50%. 此外,孔径大小对酶的比活无显著影响. MITRs可有效水解β-乳球蛋白,且水解效率随着循环流速的增加而提高. 其中使用2.1μm MITR的水解产物主要为相对分子质量小于3ku的小肽. 在18次重复实用过程中,6.0μm MITR表现出更高的稳定性,具有较高的重复利用性.     

酪蛋白磷酸肽的制备及性质

用不同的蛋白水解酶水解牛乳酪蛋白,通过钙－乙醇沉淀法和离子交换法从水解产物中提取酪蛋白磷酸肽（ＣＰＰｓ）,并对ＣＰＰｓ进行体外化学分析及体内生物学功能鉴定,结果表明：用双酶法（胰蛋白酶和Ａｌｃａｌａｓｅ）制得的ＣＰＰｓ３（平均相对分子质量为４ ０６６,摩尔Ｎ／Ｐ为５．４８）在体外的持钙能力最强,连续喂食该样品的小鼠对钙的吸收明显提高（吸收率达５６％ ）。     

固定化胰蛋白酶的制备及其性质研究

以EDTA-Sephadex G-50作载体,戊二醛为交联剂,对胰蛋白酶进行固定化.IR光谱结果显示:该项生化技术使胰蛋白酶得到了有效的固定,并且实现了较好的纯化,同时研究了固定化胰蛋白酶的一些性质,最适温度60℃,最适pH8.0,热稳定性,pH贮存稳定性以及对盐酸胍的稳定性均明显高于天然胰蛋白酶.     

胰蛋白酶处理对大豆下胚轴质膜H+-ATPase的影响

以大豆下胚轴为材料,采用蔗糖密度梯度法制备高纯度质膜微囊,研究了胰蛋白酶处理对质膜Ｈ＾＋－ＡＴＰａｓｅ的影响。     

胰蛋白酶处理对大豆下胚轴质膜H~+-ATPase的影响

以大豆下胚轴为材料 ,采用蔗糖密度梯度法制备高纯度质膜微囊 ,研究了胰蛋白酶处理对质膜H+ ATPase的影响 .结果表明 ,温和胰蛋白酶处理可刺激ATPase的水解活性 ;并且发现酶切处理可以提高PNPP的水解活性 ,当PNPP浓度在 10 30mmol·L- 1范围内 ,PNPP水解活性提高2 1% 2 8% .动力学分析表明 ,酶切处理后PNPP水解的Km值也由 2 .6 6降低到 1.4 4mmol·L- 1;同时发现酶切处理降低了钒酸钠对ATPase的抑制效应 ,显示胰蛋白酶处理可能改变了磷酸酶结构域的结构而影响ATPase的催化效应 ,暗示C 末端调节着磷酸酶结构域的结构和功能 .