湖北省2种人体钩虫分布与危害

目的：为制定全省性钩虫病防治规划提供依据．方法：采用生理盐水涂片法、Kato-Katz厚涂片法和试管滤纸培养法．结果：39个县（市、区）65275人，居民钩虫平均感染率为9．49％，丘陵山区居民感染率8．24％．平原湖沼地区10．20％；农村居民钩虫感染率为8．90％，城镇郊区居民为14．60％．Ⅰ度占75．46％；Ⅱ度占21．51％；Ⅲ度占1．76％；Ⅳ度占1．28％．讨论：湖北省是以十二脂肠钩口线虫为主的2种钩虫混合感染区，浠水县和神农架林区为单一美洲板口线虫感染区，松滋县和京山县为单一十二指肠钩口线虫感染区．     

The longest ultraconserved sequences and evolution of vertebrate mitochondrial genomes

ULTRACONSERVED SEQUENCES (ULTRACONSERVED, 100% IDENTITY WITH NO INSERTIONS OR DELETIONS) AND SMALL RNA IN GENOMES OFTEN PLAY A SPECIAL ROLE IN LIFE AND EVOLU- TION OF MANY SPECIES[1-4]. WE COMPARED 753 GENOMESOF BACTERIA, ARCHAEA, AND MITOCHONDRIA (MORE T…     

鱼腥藻铁调蛋白基因(alr0957)表达和Fe~(3+)对藻生长的影响

根据CyanoBase提供的鱼腥藻PCC7120 FurC基因(alr0957)序列信息设计特异性引物,用降落PCR法从染色体DNA中扩增得约450 bp目的片段.运用TA克隆将其连接到pMD18-T载体上,经筛选测序获得阳性重组质粒.再经过双酶切、纯化FurC基因,连接原核表达载体pET-28a(+),并转化表达菌株BL21和IPTG诱导表达.经测序鉴定的阳性菌株中的FurC,运用SDS-PAGE检测重组蛋白,并利用镍柱层析法纯化目的蛋白.由藻细胞密度、叶绿素a含量、可溶性糖含量等改变探讨不同Fe3+浓度对藻类生长的影响.结果表明:在37℃经1 mmol/L IPTG诱导18 h,成功表达了分子量约为19000的融合蛋白.小于0.5mg/L Fe3+促进藻生长,大于0.9 mg/L Fe3+抑制藻生长,最适藻生长Fe3+浓度为0.5⁰.9 mg/L.     

αB-晶状体蛋白CRYAB基因重组表达载体的构建及分子生物学鉴定

目的:构建人晶状体蛋白CRYAB基因与真核表达载体pIRES2-DsRed-Express的重组体,为研究人晶状体蛋白CRYAB基因的功能奠定基础.方法:根据人晶状体蛋白CRYAB基因的核苷酸序列,设计并合成分别带有酶切位点的引物,从pMD 18T-CRYAB基因克隆载体中扩增出CRYAB基因外显子片段,与载体pIRES2-DsRed-Express连接构建人晶状体蛋白CRYAB基因的表达载体,转化入大肠杆菌DH5α中.经抗生素筛选阳性克隆,通过酶切图谱分析、菌落PCR和测序鉴定所构建的表达载体.结果:构建的载体经PCR、酶切鉴定和测序证实插入方向正确,表达阅读框正确,载体构建成功.结论:重组人晶状体蛋白CRYAB基因表达载体的构建为研究CRYAB基因的功能及进一步研究先天性白内障的发病机制奠定了基础.     

全血基因组DNA3种提取方法的比较

目的:比较从全血中3种提取DNA方法所需要的时间、样本量、提取的DNA纯度、产量以及方法本身的优缺点.方法:采用蛋白酶K法、氯仿.异戊醇法、碘化钾法直接从全血中提取基因组DNA.结果表明:3种方法所提取的DNA质量均能达到分子生物学的实验要求,但碘化钾法提取的DNA纯度最高,且操作时间最短,该法简便、快速和DNA收获率高.     

B值鞅的强收敛性

在ｐ－光滑的Ｂａｎａｃｈ空间中,我们讨论了Ｂ值鞅差序列非随机足标与随机足标和的完全收敛性．这些结果推广了白志东与苏淳［２］关于ｉｄ实值变量序列及林正炎［３］关于实值平稳鞅差序列的相应结果．作为推论,得到了Ｂ值鞅差序列的Ｍａｒｃｉｎｋｉｅｗｉｃｚ强大数定律．     

Analysis of type II toxin-antitoxin genes <Emphasis Type="Italic">all</Emphasis> 3211-<Emphasis Type="Italic">asl</Emphasis> 3212 in <Emphasis Type="Italic">Anabaena</Emphasis> PCC 7120

The type II toxin-antitoxin genes are responsible for the phenotypic switch to a quasi-dormant state that enables cell survival under stresses, a similar function to heterocyst of cyanobacteria. In this paper, we particularly study the role of gene pair all3211-asl3212 under Spectinomycin stress to reveal how the type II toxin-antitoxin involved in environmental stress responses. Bioinformatics prediction shows that toxin protein gene All3211 is homologous to MazF, a member of mazEF family that encoding nucleases. We clone gene all3211-asl3212 into expression vectors to identify its molecular characteristics. Deletion mutant strains of all3211-asl3212 are selected in a tri-parental mating screen. Phenotype comparisons of mutant and wild type reveals no difference of single-deletion-mutants in pigment integrity, the sensitivity to antibiotics, and heterocyst formation. The results show that deletion mutation of single TAS gene pair all3211-asl3212 results in limited effects on the cellular growth of PCC 7120. Thus, we suggest that dosage compensating might be provided from redundant genes or bypass pathways to offset obvious phenotypic differences.     

水泥复合土的渗透性能试验研究

为了提高水泥土的工程抗渗特性,本文设计了水泥复合土的配合比,采取正交试验方法,进行了水泥复合土的渗透试验,得到了水泥复合土的渗透系数,并通过极差分析和方差分析,研究了水泥土中的水泥掺量、膨润土掺量和粉煤灰掺量对水泥土抗渗性能的影响,建立了水泥复合土的渗透系数随水泥掺量、膨润土掺量以及粉煤灰掺量变化的回归方程.结果表明:随着水泥掺量、膨润土掺量以及粉煤灰掺量的增加,水泥复合土的渗透系数均逐渐降低;水泥土掺量对水泥复合土渗透系数的影响最大,其次为粉煤灰掺量的影响,膨润土掺量的影响偏小.     

血吸虫细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因的克隆与近缘种属关系分析

从生物化学的角度比较血吸虫不同虫株的遗传进化差异.以日本血吸虫湖北株成虫基因组总DNA为模板,设计特异性引物扩增获取血吸虫线粒体细胞色素C氧化酶基因片段,转化大肠杆菌DH5a,筛选阳性克隆,测序,对克隆得到的coI基因作进化分析.结果表明:无论是在核苷酸序列还是在氨基酸序列上,日本血吸虫湖北株与其近地域株(云南、江苏、湖南)均具有较高的同源性,col摹因的相似性分别为98%、98%和97%,但与不同种属血吸虫(曼氏、湄公、埃及、马来)的一致性则较低,分别为76%、84%、76%、85%,由此证实日本血吸虫湖北株与其它近地域株具有较近的亲缘关系.     

家蚕浓核病毒BmDNV-1(伊那株)结构蛋白基因VP4的克隆、表达及抗体制备

为研发新的日本血吸虫(Schistosoma japonicum)疫苗候选抗原基因,为血吸虫诊断和疫苗研制提供依据,提取和纯化S.japonicum成虫DNA,PCR扩增相关基因,然后将其克隆入pBST载体,对菌落PCR阳性克隆子测序和分析.菌落PCR获得一条与PCR产物一致的DNA片段,PCR产物与S.japonicum 22 600抗原分子DNA序列具有高度同源性,636 bp大小,oRF189 bp,ORF小是全长的蒯读框,只获得部分编码区,能编码63个氨基酸,表达产物含有一个包含9个氨基酸残基的潜在螺旋跨膜片段(25～33位)和一个酪氨酸激酶磷酸化位点(38～39位).本研究所获取的阳性克隆是与S.japonicum 22 600抗原编码基因有高度同源性的基因.通过Blastn和BLASTP分析,预测该基因为体膜相关蛋白基因,可编码血吸虫体壁相关蛋白,可能是信号传递分子.