Rab39A多克隆抗体的制备与鉴定

制备抗人Rab39A多克隆抗体并进行纯化检测,以用于Rab39A功能的研究.选取免疫原性强且特异性高的羧基端42个氨基酸(176～217aa)作为目的片段.PCR法扩增并构建重组表达质粒pGEX-4T-1-Rab39C42.异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化GST-Rab39C42融合蛋白,免疫新西兰兔,制备多克隆抗体.然后以亲和层析法纯化抗体,利用Western blot和免疫荧光检测抗体的特异性.结果表明,构建的原核表达载体经IPTG诱导后高效表达GST-Rab39C42蛋白,纯化后抗体质量浓度为1μg/μL;Western blot实验显示,抗体可以识别外源Rab39A蛋白和多个细胞系的内源Rab39A蛋白;抗体中和实验和RNA干扰实验证明了该抗体具有特异性.本研究成功构建了pGEX-4T-1-Rab39C42原核表达载体,并制备了特异性的抗人Rab39A兔多克隆抗体,为进一步研究Rab39A的功能提供了有力的支持.     

巴尔通体HBPC蛋白原核重组表达及抗原性研究

为了寻找可用于巴尔通体(Bartonella)检测的特异性抗原,利用PCR方法从巴尔通体厦门分离株(B.tribocorum_XM)的基因组DNA中扩增出血红素结合蛋白C(HBPC)蛋白基因,并将该基因的编码区克隆到pGEX-4T-1原核表达载体中,构建带GST标签的融合蛋白重组表达载体,并转化大肠杆菌(Escherichia coli DH5α),诱导表达GST-HBPC,通过亲和层析技术纯化GST-HBPC.最后运用蛋白质斑点印迹试验(Western blot)和间接ELISA法检验GST-HBPC是否具有抗原性.结果表明,所构建的表达载体可在大肠杆菌中大量表达GST-HBPC,Western blot和间接ELISA显示GST-HBPC能够特异性地与感染动物血液样本发生免疫反应.因此,体外重组的巴尔通体抗原蛋白HBPC可作为潜在的抗原用于巴尔通体血清学免疫检测.     

用乙烯利催熟的果实不能留种

笔者在参加技术下乡活动时发现,有些农民朋友将喷洒过乙烯利的农作物果实留种.其实,这种做法是不可取的.     

酱油情结

从塞班岛到日本,从日本到纽约,老飘飘深刻体会到原来酱油最容易引起乡愁。中国人的胃天生就是给惯坏了的。有人说过,从科学的观点来看。人的身体就像是一个化学实验室,几乎所有的人类感情,最后都可以分解成为某种化学反应的过程或是结果,我同意这个说法,我不知道酱油是怎样的构成成分,但是我知道,酱油最容易引起乡愁。     

西瓜阴瓤怎么办?

西瓜阴瓤即西瓜瓤肉质恶变,瓜农俗称为"水串瓤"、"水托"等,发生病害的西瓜失去食用价值.有不少地块会全田发病,甚至绝收,瓜农损失惨重.     

大话网络游戏职业渊源——弓箭手篇

说在前面的废话话说某年某月某日下午,老菜鸟我三生有幸,接到了小乖阁下的电话。清纯动听的声音,只差没把老菜鸟的鼻血给听出来(当然狼嚎几声还是有的)。“你写的那个什么网络游戏职业骑士篇,还有没有下续啊?”“有,有,有。”     

大话网络游戏职业渊源-骑士篇

不知是否太多网络游戏公司受UO(创世纪)以及AD&D(龙与地下城)影响颇深,诸多游戏创意风格如出一辙,游戏中到处可见骑士、魔法师、精灵……洋溢西洋风味的角色。这些“西方成人童话”中充满传奇色彩的职业角色,每个都可堪称一个文化。而其中以骑士文化最为广泛,最为众人津津乐道。时至今日,骑士精神仍深深影响西方人。     

鸡形觉剥夺性近视眼发病机制的研究

目的探索形觉剥夺性近视眼的发病机制。方法利用眼罩遮盖造成鸡近视模型，并利用高效液相色谱和电化学检测技术研究了鸡形觉剥夺性近视视网膜多巴胺及其代谢产物的变化。结果形觉剥夺性近视鸡实验眼与对照眼比较，在屈光度、前后径、赤道径方面有极显著差异。在多巴胺及其代谢产物含量方面亦有极显著差异。更为重要的是，实验发现5-羟色胺产物5-HIAA实验眼与对照眼比较亦有显著性差异。结论多巴胺参与正常视觉和眼球生长发育的调控。5-羟色胺可能作为一种神经递质参与了形觉剥夺性近视的形成。