| Rab39A多克隆抗体的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 马琳琳,张明,杨婷,王卫杰,王团老.Rab39A多克隆抗体的制备与鉴定[J].厦门大学学报(自然科学版),2013(1):116-121. |
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| 作者姓名： | 马琳琳 张明 杨婷 王卫杰 王团老 |
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| 作者单位： | 厦门大学药学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30971442,31071176);福建省自然科学基金项目(2010J01234) |
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| 摘 要： | 制备抗人Rab39A多克隆抗体并进行纯化检测,以用于Rab39A功能的研究.选取免疫原性强且特异性高的羧基端42个氨基酸(176～217aa)作为目的片段.PCR法扩增并构建重组表达质粒pGEX-4T-1-Rab39C42.异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化GST-Rab39C42融合蛋白,免疫新西兰兔,制备多克隆抗体.然后以亲和层析法纯化抗体,利用Western blot和免疫荧光检测抗体的特异性.结果表明,构建的原核表达载体经IPTG诱导后高效表达GST-Rab39C42蛋白,纯化后抗体质量浓度为1μg/μL;Western blot实验显示,抗体可以识别外源Rab39A蛋白和多个细胞系的内源Rab39A蛋白;抗体中和实验和RNA干扰实验证明了该抗体具有特异性.本研究成功构建了pGEX-4T-1-Rab39C42原核表达载体,并制备了特异性的抗人Rab39A兔多克隆抗体,为进一步研究Rab39A的功能提供了有力的支持.
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| 关 键 词： | Rab39A 原核表达 多克隆抗体 |
Preparation and Identification of Rab39A Polyclonal Antibody |
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| MA Lin-lin,ZHANG Ming,YANG Ting,WANG Wei-jie,WANG Tuan-lao.Preparation and Identification of Rab39A Polyclonal Antibody[J].Journal of Xiamen University(Natural Science),2013(1):116-121. |
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| Authors: | MA Lin-lin ZHANG Ming YANG Ting WANG Wei-jie WANG Tuan-lao |
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| Institution: | * (School of Pharmaceutical Sciences,Xiamen University,Xiamen 361102,China) |
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