丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶突变体MEKK3~(KI)的构建及功能鉴定

有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶MEKK3(mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase kinase3)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,属于MAP3K(mitogen-activated protein kinase kinase kinase)家族,其在细胞增殖、凋亡、炎症反应、肿瘤的发生中发挥了重要的作用。利用分子克隆手段构建激酶功能失活(kinase inactive)型突变体MEKK3KI(391位赖氨酸突变为甲硫氨酸,K391→M391)的真核表达载体,并通过检测MEKK3KI蛋白对NudC的磷酸化作用及对细胞周期的影响以鉴定其生物活性。根据GenBank提供的人源MEKK3的cNA序列(NM_203351),扩增出野生型MEKK3(MEKK3~(WT))的目的基因,用重叠延伸PCR定点突变技术扩增激酶功能失活型MEKK3KI目的基因,并将其分别克隆至带有FLAG标签的真核表达载体p CMV-tag-2c和带有GFP标签的真核表达载体pEGFP-C1中。DNA序列分析结果显示,MEKK3KI基因序列成功将391位点的赖氨酸(K)突变为甲硫氨酸(M),表明突变体构建成功;免疫印迹分析显示,MEKK3~(WT)、MEKK3KI重组体均在He La细胞中高效表达;体外模拟磷酸化实验结果显示,野生型MEKK3~(WT)在体外可以磷酸化NudC,而激酶功能失活型突变体MEKK3KI无法将其磷酸化;激光共聚焦显微镜观察发现,野生型MEKK3在HeLa细胞中过表达,细胞核形态异常,与凋亡细胞核形态相似,而失活型MEKK3过表达不会导致细胞核明显变化。总之,本实验成功构建了野生型、失活型MEKK3的真核表达载体,同时发现其可以磷酸化NudC,促进细胞凋亡,为进一步揭示MEKK3生物学功能奠定了基础。     

Leader-Following Consensus of Nonlinear Strict-Feedback Multi-agent Systems

The distributed leader-following consensus for nonlinear multi-agent systems in strict-feedback forms is investigated under directed topology. Firstly, each follower node is modeled by an integrator incorporating with nonlinear dynamics. The leader node is modeled as an autonomous nonlinear system which sends its information to one or more followers. Then, a simple and novel distributed protocol is proposed based only on the state feedback, under which the states of the followers ultimately synchronize to the leader. By using Lyapunov stability theorem and matrix theory, it is proved that the distributed leader-following consensus of nonlinear multi-agent systems with strict-feedback form is guaranteed by Lipschitz continuous control laws. Finally, some numerical simulations are provided to show the effectiveness of the developed method.     

论红色经典改编文本的“互文性”

把现当代文学作品中的红色经典改编成电视剧,已成为一种艺术创作和大众文化现象,引起了社会的广泛关注。红色经典改编文本不是一个单一的概念,而是由改编者改编的文学剧本、导演拍摄制作的分镜头剧本和观众接受的电视剧这三种不同层级的文本构成的。这些不同层级的文本构成了西方后结构主义理论家所说的"互文性"("文本间性")关系,而不同接受者对这些不同层级文本的接受,同样也构成了一种"互文"关系。     

关于当前社区党建工作的思考

在新社会组织中开展党建工作,既是我们党构建社会主义和谐社会的必然要求,也是新社会组织自身健康成长的重要途径。因此,我们应想办法在这些组织中发挥党组织的作用,采取切实可行的措施开展党建工作。     

几种网页动态效果设计方法的比较

在网页设计过程中,网页动态效果设计技术可以使网页更加生动.常见的动态效果设计技术包括设计和使用GIF动态效果图片、使用CSS动态滤镜、使用Flash动画设计、以及使用JavaScript脚本语言和jQuery UI方式.上述几种技术都有其各自的特点,通过对它们进行比较分析,总结出这几种技术在不同设计要求下的优劣.     

C/C++语言中“&”运算符的用法

"&"运算符是C/C++语言中使用比较灵活的运算符之一,根据使用功能和在上下文中的含义详细阐述其用法.     

冠状动脉粥样硬化性心脏病冠脉循环建模与仿真

冠状动脉粥样硬化性心脏病发病率和死亡率都很高,对其进行建模与仿真有重要的医学意义.在左心循环系统的血流动力学仿真建模的基础上,结合冠状动脉粥样硬化的病理学特点及临床数据,建立描述心血管冠状循环与系统循环之间血液动力学关系的模拟电路模型,并运用Matlab/Simulink对模型进行仿真,模拟冠状动脉粥样硬化性心脏病病理状态下的冠脉循环血流情况.模型通过修改参数,能模拟不同个体生理情况特征,仿真不同程度的冠状动脉狭窄的血流情况.仿真波形与动物实验结果相吻合,通过对血流储备分数(FFRmyo)的计算,也进一步验证仿真结果的正确性.     

γ-射线血管内照射治疗计划系统的研制

介绍了研究开发的三维血管内照射治疗计划系统，该治疗计划系统建立在三维医学图像和临床上常用的γ－射线源基础之上，集成了放射源剂量学数据管理，三维图像处理，治疗计划设计、剂量分布计算与显示、治疗计划评估和打印输出等功能模块，为了验证治疗计划的有效性，文中给出了2组实验数据，一组是与GammaMed治疗计划系统的对比结果，另一组是对实际弯曲血管的计划结果。     

船舶在不同水域中K,T指数的模拟计算

基于一阶响应方程在现有的水导数的理论计算公式浅水修正系数的基础上，对船舶以不同速度在不同水域中的Ｋ，Ｔ指数值进行模拟计算，和实验结果进行对比，发现基于理论公式的计算结果与实验结果的吻俣程度良好的。     

应用模拟定位机对肺癌肿块运动的研究

肺肿瘤随呼吸运动是制约放疗剂量提升的主要因素之一，为确定每个肺癌患者的肿瘤运动范围，用模拟定位机对肺癌病人的呼吸运动，肿瘤运动及体表标记物三者的运动进行了检测，通过瞬时傅立叶变换技术对肿瘤一系列的动态变化进行研究，并对比了肿瘤和体表标记物的运动，结果发现：不同患者间肿瘤随呼吸运动的差异较大，且肺部肿瘤与体表标记物的运动存在明显的异相性，它对于确定肺癌个体化的外放边缘具有指导意义。