细胞运动的研究

以细胞运动为主线，讨论细胞内部的生命活动，着重讨论细胞内部物质输运、能量转换、细胞通讯等重要生物学过程。对细胞运动的一些问题提出作者自己的见解。     

运用磁珠分选法建立免疫细胞共培养体系

目的以相互作用的几种免疫细胞上共同表达的抗原物质为标志,运用磁珠分选技术,从慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞中同时获得并建立体外多细胞共培养体系,体外观察细胞之间的相互作用.方法采用梯度离心法分离30例慢性乙肝病毒感染者外周血单个核细胞(PBMC),采用免疫磁珠分选法分离获得 CXCR5+细胞,通过流式细胞仪检测 CXCR5+细胞纯度和组成,并将 CXCR5+细胞进行体外培养.在分离得到的 CXCR5+细胞的基础上,将 CXCR5+细胞分为3组,分别为对照组:不加任何刺激;实验组一:加入 IL 21刺激培养,实验组二:与人肝癌细胞系(HepG2)2215细胞混合培养.体外培养一周后,流式细胞仪检测实验组与对照组细胞 B细胞数量变化,ELISA测定培养体系中上清液 HBe抗体的含量.结果1)用流式细胞仪鉴定 CXCR5+细胞的纯度和构成:CXCR5+细胞纯度为85.5±5.8%,其中 Tfh细胞占23.8±7.4%,B细胞占35.6±7.6%;2)培养7天后,IL 21刺激组 B细胞百分率为47.2±1.8%,与(HepG2)2215混合培养组 B细胞百分率为40.2±3.5%,空白对照组 B细胞百分率为36.6±7.5%,IL 21刺激组与对照组,(HepG2)2215混合培养组与对照组 B细胞百分率均有显著差异(p<0.05);3)ELISA检测培养液上清 HBeAb定量,IL 21刺激组为0.668±0.094pg/ml,空白对照组为0.378±0.088pg/ml,两组有显著差异(p<0.05).结论使用间接免疫磁珠分离法可成功建立 CXCR5+B淋巴细胞和 Tfh细胞的共培养体系,为进一步体外研究细胞之间相互关系奠定基础     

美科学家发现导致细胞癌变的基因

美国科学家进行的一项新研究表明，如果消除实验鼠体内一个特殊基因的活性，以减少一种蛋白质的产生，就可以使实验鼠的癌细胞转变为无害的正常细胞。     

基因治疗研究的现状

在巨大的经济效益诱惑下，美国生物医学界在近五年内掀起了一般基因治疗热。这股热浪多少也辐射到了国内。本文评估了美国生物医学科学界的基因治疗现状。认为基因治疗仍处在实验室研究阶段，并未达到临床治疗水平。基因治疗仍需重视其基础研究，现阶段应避免过分强调其临床应用价值。     

美科学家用胚胎干细胞培育成功视网膜细胞

美国马萨诸塞州高级细胞技术公司的研究人员前些时候宣布，他们首次用人类胚胎干细胞成功培育出了视网膜细胞，该技术有望用于治疗视网膜退化造成的失明。     

齐墩果酸抑制肝癌细胞QGY增殖和诱导凋亡的作用研究

目的研究齐墩果酸对人肝癌细胞QGY增殖的作用及与细胞内钙离子浓度（[Ca2＋]i）关系。方法将浓度分别为40、80、100μg／ml齐墩果酸作用肝癌H细胞QGY24h后，DAPI染色，以荧光显微镜观察细胞形态变化；以11组不同浓度齐墩果酸（5—400μg／ml）作用QGY细胞24h后，用四甲基偶氮唑蓝（Myr）法检测QGY增殖情况；分别以不同浓度齐墩果酸（80、100、120μg／ml）作用QGY细胞24h后，流式细胞仪检测细胞周期改变、细胞凋亡率和[Ca2＋]i。结果细胞增殖被抑制并发生凋亡：不同浓度齐墩果酸能够抑制QGY细胞株增殖，且在5—120μg／mL范围内呈剂量依赖性，药物作用细胞24h、48的Ic50分别为76．27μg／mL和66．56μg／mL；处理组细胞周期在s期产生阻滞、细胞内[Ca2＋]i较对照组显著增加，细胞凋亡率和[Ca2＋]i与药物浓度存依赖关系。结论齐墩果酸能够抑制肝癌细胞QGY增殖和诱导其凋亡；诱导凋亡可能与细胞内[Ca2＋]i增加有关。     

骨髓间充质干细胞的培养及其体外标记跟踪的实验研究

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的体外分离培养;观察Brdu、DAPI以及Hoechst33342体外染色的合适时间和最佳剂量,比较三种方法的优缺点。方法 BMSCs取自SD雄性大鼠的股骨和胫骨,然后采用贴壁分离培养法对BMSCs进行分离培养,当BMSCs培养至第三代时,采用流式细胞仪对其表面抗原CD34、CD44、CD45进行测定;同时分别用Brdu、DAPI以及Hoechst33342对BMSCs进行染色标记,Brdu标记效果用免疫细胞化学方法检测,DAPI和Hoechst33342的标记率用荧光显微镜观测,最后用MTT检测BMSCs的细胞增值率,观察三种不同方法体外染色的合适时间和最佳剂量,同时比较其优缺点。结果流式细胞仪检测发现BMSCs表达CD44阳性,CD34和CD45阴性;BMSCs染色前后其表面标志表达无明显统计学差异(P0.05);Brdu染色标记BMSCs的最佳浓度和时间是10μmol/L、48小时;DAPI染色标记BMSCs的最佳浓度和时间是20μg/ml、30分钟;Hoechst33342染色标记BMSCs的最佳浓度和时间是5μg/ml、1小时。结论采用粘附贴壁分离培养法能够有效获取高纯度的BMSCs;运用Brdu、DAPI以及Hoechst33342三种方法标记BMSCs效果良好,方法可靠、合理,为研究BMSCs体内追踪打下了基础。     

日本首次培育出人体胚胎干细胞

日本京都大学再生医学科学研究所中辶十宪夫所长日前宣布 ,该所研究人员成功培育出人体胚胎干细胞 ,这在日本历史上还是首次。据《读卖新闻》头版报道 ,日本文部科学省 2 0 0 1年授权一些研究机构进行人体胚胎干细胞研究。到目前为止 ,除京都大学之外 ,东京大学、信州大学等 7个研究机构都可对人体胚胎干细胞进行研究 ,但只有京都大学一家获准培育人体胚胎干细胞。这次培育人体胚胎干细胞所使用的是治疗不孕症的冷冻受精卵。在征得受精卵提供者的同意后 ,研究人员从今年1月底开始培育工作。在对 10个受精卵培育一段时间后 ,其中一个发育到胚…     

动物外周血单个核细胞分离方法探讨

目的 探索用人淋巴细胞分离液分离多种属动物外用血单个核细胞（PBMCs）的可行性及评价其分离效果,建立一种适于野外大规模多种属动物PBMCs的分离方法.方法 采用人淋巴细胞分离液分离来源于新疆的伊犁马、新疆驴、不同品种犬、新疆双峰驼、天山马鹿和来源于重庆的荣昌猪、中国荷斯坦奶牛、简阳大耳黑山羊外周血PBMCs.随机抽样检测分离的动物PBMCs细胞总数、细胞纯度和细胞活率.结果 用人淋巴细胞分离液成功分离上述8种动物PBMCs,每毫升动物外周血分离的PBMCs细胞总数为0.52×106～2.03×106个,纯度为67%～93%,细胞活率为92.5%-98.0%.结论 用人淋巴细胞分离液分离多种动物PB-MCs的方法宜在动物的病毒分子流行学调查中进一步推广.     

细胞图形化技术及其应用

细胞图形化技术是近十几年出现的一项新技术，其发展和应用不仅为细胞生物学的基础研究提供了新的工具，将来更有可能为疾病诊断、药物筛选和组织工程等应用领域开辟新的道路。本文主要介绍细胞图形化技术及其生物学应用，内容包括：细胞图形化技术产生的背景和意义，概念和方法，发展现状和应用以及前景展望。     

信号传导的研究对生命现象认识的推动作用

细胞内与细胞间的信号传导是生命现象的一种基本事件，它与生物的生长，发育，分化，遗传，学习，记等过程密切相关。疾病，衰老和死亡，作为生命现象的特殊形式或过程，其发生也是与信号传导始终密切相关联的。信号传导的相应的英文词为：ＳＩＧＮＡＬＩＮＧ或ＳＩＧＮＡＬ ＴＲＡＮＳＤＵＣＴＩＯＮ。     

韩科学家利用冷冻胚胎成功培育出干细胞

据韩国《朝鲜日报》报道,韩国科学家最近利用冷冻胚胎成功培育出干细胞。韩国玛利亚生命科学研究所博士朴世弼领导的研究小组将流产后冷冻5年、原准备丢弃的11个人体胚胎解冻,用这些胚胎培育出了7个胚胎干细胞,其成功率为6 3.6 % ,明显高于此前世界上公布的10 %至36 %的成功率。据朴世弼介绍,利用冷冻胚胎培育干细胞,可以避开克隆人类胚胎带来的伦理问题。同时,用冷冻胚胎培育出的胚胎干细胞用于脏器移植,能在一定程度上减少因移植他人脏器而出现的免疫排斥反应。朴世弼领导的研究小组已将用冷冻胚胎培育干细胞的技术向美国、澳大利亚等10 8…     

5个态变量1个端口的细胞神经网络局部活动性理论

局部活动性原理自Chua于1997年提出后,为研究耦舍细胞出现复杂现象的起因提供了有力的工具,也为预测和判定某一类局部耦合非线性系统(反应扩散细胞神经网络系统)能否展示震荡或混沌等复杂的动力学行为提供了新的必要性的判据.在实际运用中,局部活动原理只提供了一个形式的判别框架,需要针对扩散反应CNN方程"态变量"和"端口"的个数建立相应的解析判别法.本文建立了5个态变量1个端口的反应扩散细胞神经网络方程的局部活动性理论的解析判别法,并给出了相应的判别法的4个定理的证明.通过这4个定理,可以对某类具有5个变量的非线性系统的复杂性进行分析和判断.     

新世纪的挑战--生物复杂性研究

复杂性是生物学的固有属性。生物学系统，从细胞到生态系统，总是包含大量的以复杂方式相互作用的部分。尽管目前我们已经获得了大量关于这些组分的数据，但是实际上对所有复杂的生物学系统，我们都缺少一个真正的定量的和综合的整体的认识。研究生物复杂性是二十一世纪科学面临的一大挑战。本文介绍了美国国家科学基金会的生物复杂性研究计划，并通过一些例子对生物复杂性研究涉及的相关方面作了探讨。     

Survivin过表达对MS1细胞Survivin基因及蛋白表达与凋亡的作用

目的 探讨Survivin过量表达对MS1细胞Survivin基因及蛋白表达与凋亡的影响.方法 构建Survivin真核表达载体,以脂质体转染MS1细胞,采用流式细胞仪的方法检测细胞凋亡;Real-time PCR和Western blot检测Survivin的mRNA及蛋白水平.结果 转染Survivin实验组与空载体对照组比较,Survivin mRNA和蛋白表达明显增高,实验组细胞凋亡率较对照组下降.结论 Survivin过表达可使MS1细胞的Survivin蛋白及mRNA高表达并能使细胞凋亡凋亡率下降,为后续的动物实验打下了理论依据.     

脂多糖致感染性脑水肿大鼠星形胶质细胞的活化和凋亡

目的通过观察脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）致大鼠感染性脑水肿后星形胶质细胞的凋亡、活化及iNOS表达情况，探讨在LPS致脑水肿中星形胶质细胞的作用。方法84只雄性SD大鼠，随机分为3组：空白对照纽（C组，n=12）；生理盐水对照纽（S组，n=12）；感染性水肿组（L组，n=60）。感染性脑水肿组又按颈内动脉注射脂多糖后6h、12h、24h、48h、72h分为5个亚组（n=12）。向颈内动脉注射脂多糖LPS150μg（0．15ml）建立大鼠感染性脑水肿模型。采用HE染色、流式细胞检测和免疫纽化染色分别观察脑组织病理改变、星形胶质细胞凋亡、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和iNOS表达情况。结果与C组和S组比较，L组大鼠星形胶质细胞胞体变大、突起增多；细胞内GFAP和iNOS表达增强，12h达高峰，除72h组，其余亚组均有统计学差异（P〈0．05）；各亚组星形胶质细胞凋亡增多（P〈0．05），24h凋亡最显著。C组和S纽比较无统计学意义（P〉0．05）。结论感染性脑水肿后星形胶质细胞凋亡增加，异常活化，分泌iNOS，参与感染性脑水肿的形成，在脑水肿的发生发展中发挥重要作用。