CUMS+LPS致小鼠抑郁模型的建立及人参皂苷Rb1的抗抑郁机制研究

采用慢性轻度不可预知刺激(CUMS)+内毒素(LPS)制备小鼠抑郁模型,并研究人参皂苷Rb1的抗抑郁作用及其机制.将C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、模型组、米诺环素(20 mg/kg)组、Rb1低、中、高剂量(5、10、20 mg/kg)组.模型与给药组小鼠每天给予CUMS刺激,正常组小鼠不予刺激.同时各组小鼠腹腔注射给予相应药物和溶媒,每天1次,共11 d;末次给药1 h后腹腔给予LPS 200μg/kg,24 h后检测相应指标.结果表明:人参皂苷Rb1能显著缩短抑郁小鼠悬尾不动时间(TST)与强迫游泳不动时间(FST),降低血清ACTH和CORT水平及炎症因子TNF-α浓度;能逆转抑郁小鼠海马BDNF表达减少.结果提示:CUMS+LPS能成功诱导小鼠抑郁模型;人参皂苷Rb1能显著改善模型小鼠的抑郁状态,机制可能与调控下丘脑-垂体-肾上腺轴过度兴奋、抑制炎症反应有关.     

人参皂苷Rg1对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的保护作用及其机制

本研究旨在探讨人参皂苷Rg1对载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化的保护作用及其机制。雄性ApoE~(-/-)小鼠给予高脂饲料饲喂,建立动脉粥样硬化模型,造模结束后随机分组并给药。给药结束后,通过油红O染色观察小鼠主动脉动脉粥样硬化病变,并检测血清中TC、TG水平。免疫荧光检测主动脉斑块处促炎型巨噬细胞,Western blot检测主动脉IκBα、p-IκBα、NF-κB p65及p-NF-κB p65等蛋白变化。结果显示,人参皂苷Rg1 50、100 mg/kg组均可显著降低ApoE~(-/-)小鼠动脉粥硬化病变面积;免疫荧光检测发现,人参皂苷Rg1 50、100 mg/kg组均可显著减少促炎型巨噬细胞。Western blot结果显示,人参皂苷Rg1低、高剂量组均可显著抑制p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白的表达。综上所述,人参皂苷Rg1对ApoE~(-/-)小鼠主动脉动脉粥样硬化具有较好的抑制作用,其作用机制可能与通过抑制NF-κB信号通路异常活化进而抑制巨噬细胞向促炎型巨噬细胞转化有关。     

不同福利条件下ICR小鼠肝细胞NF-κB表达的比较

目的比较不同福利水平下ICR小鼠肝脏NF-κB的表达。方法选取6周龄雄性ICR小鼠,交叉使用制动和丰富环境干预形成不同的福利环境,观测小鼠的体质量增重、饲料能效及脾脏系数,ELISA法测定血清IL-2和CORT,实时定量PCR和免疫印迹法分别检测小鼠肝细胞内NF-κB p65的mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组相比,丰富环境组小鼠的体质量增重显著提高(P0.05),其他指标无差异(P0.05);丰富环境+制动组小鼠的体质量增重、脾脏系数显著低于对照组(P0.05),而CORT、NF-κB p65的基因和蛋白表达显著高于对照组(P0.05);制动组的体质量增重、饲料能效、脾脏系数及血清IL-2均显著低于对照组(P0.05),CORT、NF-κB p65的基因和蛋白表达均显著高于对照组(P0.05)。其中制动组的体质量增重显著低于丰富环境+制动组(P0.05),CORT、NF-κB p65的基因和蛋白表达显著高于丰富环境+制动组(P0.05)。结论不同组别小鼠存在福利水平差异,NF-κB表达差异与福利差异相类似,福利水平与NF-κB表达水平之间存在紧密关联。     

复方柴归方抗抑郁作用剂量筛选及药效验证

采用小鼠悬尾实验(TST)和小鼠强迫游泳实验(FST),筛选复方柴归方提取物(FFCGF)抗抑郁作用有效剂量范围,结果表明FFCGF 7、14、28 g生药/(kg体重·d剂量)组可以显著降低小鼠不动时间;进一步采用大鼠慢性温和不可预知性应激(CUMS)抑郁模型结合FST和TST实验来验证药效,并确定其最佳剂量,结果表明FFCGF高、中、低剂量组均能显著降低小鼠不动时间,改善CUMS模型引起的大鼠体重增长缓慢、糖水偏爱率降低,旷场实验中穿越格数减少等指标。总的来说,FFCGF 7～28 g生药/(kg·d)为抗抑郁有效剂量,其中以14 g生药/(kg·d)为最佳。     

咖啡因对 CUMS 抑郁模型小鼠行为的影响

摘要: 目的 探讨咖啡因对慢性不可预见轻度应激( Chronic unpredictable mild stress,CUMS) 抑郁模型小鼠行为的影响。方法 选用 C57BL/6J 小鼠 48 只,分为正常 + 生理盐水组、正常 + 30 mg / kg 咖啡因组、模型 + 生理盐水组和模型 + 咖啡因组( 分别为 5、15 和30 mg / kg) 6 个处理组。利用制作的 CUMS 抑郁模型,分别给予生理盐水作对照或用不同剂量的咖啡因进行干预,持续造模 22 d,观察小鼠的体质量增长变化,用旷场实验及液体消耗实验测定小鼠行为改变。结果 造模 22 d 后,与正常 + 生理盐水组小鼠相比,模型 + 生理盐水组小鼠的体质量增长、水平垂直运动、液体消耗均未达到显著差异( P ＞ 0. 05) 。与模型 + 生理盐水组小鼠相比,模型 + 咖啡因组( 5 mg / kg 和 30 mg /kg) 小鼠的糖水消耗量和糖水偏爱百分比显著增高( P ＜ 0. 05) 。结论 实验表明 CUMS 抑郁模型用 C57BL/6J 小鼠较难成功建构; 咖啡因对小鼠 CUMS 抑郁模型的行为改变有部分改善作用,并呈剂量相关性; 同时证明咖啡因的行为改善作用不是通过兴奋大脑皮层所致。该实验结果提示咖啡因具有潜在的抗抑郁作用。     

芒果苷通过作用于NLRP3炎症小体发挥抗抑郁和神经保护作用

研究了芒果苷对慢性不可预测性轻度应激抑郁症大鼠的治疗作用以及作用机制.大鼠随机给予不可预测性刺激,连续6周,制备抑郁症模型.实验组在第4至第6周给予芒果苷(MGF,20、40、80 mg/kg)灌胃治疗,氟西汀(Flu, 10 mg/kg)灌胃作为阳性对照.实验结束时对大鼠大脑进行生化分析、组织病理学检查以及炎症小体相关蛋白表达,检测大鼠血清中相关炎症因子蛋白的表达.实验表明MGF对慢性不可预测的轻度应激(CUMS)诱导的大鼠抑郁症行为有明显的改善作用;MGF可以抑制CUMS大鼠NLRP3、Caspase-1和ASC蛋白以及mRNA的表达水平;抑制CUMS大鼠血清中相关炎症因子的蛋白表达水平;MGF同时可以降低NLRP3炎症小体的表达水平,缓解CUMS引起的大脑病理损害,对CUMS大鼠引起的脑损伤起到保护作用.     

红景天苷对LPS诱导大鼠心肌损伤的保护作用及机制研究

研究红景天苷(Salidroside)对脂多糖(LPS)致大鼠心肌损伤的保护作用及机制。雄性清洁级SD大鼠50只,随机分组,分为对照组(NS)10只、LPS模型组(10 mg/kg)10只、红景天苷小剂量(Sal 5 mg/kg)组10只,红景天苷中剂量(Sal 20 mg/kg)组10只,红景天苷大剂量(Sal 50 mg/kg)组10只。腹腔注药后6 h测定左心室收缩压(LVSP)、左心室内压上升及下降最大变化速率(±dp/dtmax)等心功能指标。采用ELISA法和Western blot法测定TNF-α、Toll样受体4和核因子κB蛋白表达。结果显示:与对照组比较,LPS可明显抑制大鼠左室功能,显著增加大鼠心肌TNF-α、TLR4和NF-κB的表达。而与模型组比较,红景天苷可剂量依赖性地下调心肌TLR4、NF-κB及TNF-α表达,改善大鼠左室功能。可见,红景天苷对LPS诱导的大鼠心肌损伤具有一定的保护作用,其机制与抑制TLR4-NFκB-TNFα炎症信号转导通路密切相关。     

叶酸对PCPA模型大鼠的抗抑郁作用

基于对氯苯丙氨酸(PCPA)抑郁模型,将60只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为对照组、模型组、氟西汀组和叶酸组(50mg/kg,75mg/kg),通过悬尾、强迫游泳实验和糖水消耗量实验评价大鼠抑郁行为,探究了叶酸的抗抑郁效果及其作用机制。采用高效液相色谱法(HPLC)测定大鼠体内血清皮质酮及脑组织中5-HT神经递质的含量。结果显示,PCPA模型大鼠情绪低落,不动时间明显增加(P0.05);血清中皮质酮含量显著上升(P0.05),联合皮质和海马脑区的5-HT含量均显著下降(P0.05)。叶酸可以显著缓解以上变化(P0.05或P0.01),叶酸对PCPA模型的抗抑郁作用可能与降低大鼠血清皮质酮含量,进而提高前额叶联合皮质与海马5-HT水平有关。     

当归多糖对麻黄素小鼠肝组织抗氧化酶活性和NF-κB、TNF-α表达的影响

探讨当归多糖对麻黄素小鼠肝组织抗氧化酶活性和核转录因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的影响及其可能作用机制.小鼠连续腹腔注射4.0g·L-1麻黄素溶液,同时用当归多糖溶液(12.5,25.0g·L-1)进行灌胃,分别在5,10,15d时用分光光度法检测各组小鼠肝组织T-AOC、GSH-PX活性的变化,免疫组化法检测小鼠肝组织中NF-κB和TNF-α表达的变化.结果显示实验对照组小鼠肝组织T-AOC、GSH-PX活性明显降低(P0.01),肝组织NF-κB和TNF-α表达量显著增强(P0.05或P0.01),而当归多糖组T-AOC、GSH-PX活性与实验对照组相比显著升高,NF-κB和TNF-α表达量明显降低(P0.05或P0.01).结果表明,麻黄素影响小鼠肝组织抗氧化酶活性和NF-κB、TNF-α的表达,当归多糖能够提高小鼠肝组织抗氧化酶活性,抑制NF-κB和TNF-α的表达,对麻黄素致小鼠肝损伤有一定的保护作用.     

南极磷虾油对小鼠肠黏膜屏障的保护作用及机制

为探究南极磷虾油对脂多糖所致肠黏膜屏障损伤的预防作用及其机制,选取32只雄性小鼠随机分为4组:正常对照组、模型组(脂多糖组)、南极磷虾油干预组和鱼油干预组。前两组灌胃橄榄油,后两组分别灌胃400mg/kg(以体重计)以橄榄油为溶剂稀释的南极磷虾油或鱼油,每日1次。连续干预4周后,正常组小鼠经腹腔注射生理盐水,其余3组注射10mg/kg(以体重计)脂多糖,6h后处死小鼠。苏木精-伊红染色后,观察小鼠小肠组织病理学变化；测定小鼠血清和小肠中二胺氧化酶活性,蛋白免疫印迹法分析紧密连接蛋白和诱导型一氧化氮合酶蛋白表达；检测髓过氧化物酶和一氧化氮含量,实时荧光定量PCR法检测促炎细胞因子mRNA表达；蛋白免疫印迹法分析TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白表达水平。实验结果显示,南极磷虾油预防性干预能显著抑制脂多糖所致小鼠小肠绒毛长度与隐窝深度比值的降低；下调血清二胺氧化酶水平,提高小肠二胺氧化酶活性,增加肠道紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin和ZO-1蛋白表达水平；抑制髓过氧化物酶活性、诱导性一氧化氮合酶蛋白表达和一氧化氮含量升高,降低TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达以及TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白表达水平。研究结果表明,南极磷虾油可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路预防脂多糖所致肠黏膜屏障损伤,且其效果优于传统鱼油。     

中等强度有氧运动通过抑制NF-κB通路过度激活影响4T1乳腺癌小鼠肿瘤生长研究

观察中等强度有氧运动对原位移植4T1乳腺癌小鼠模型肿瘤生长的影响,并探讨其相关机制. 40只雌性6周龄Balb/C小鼠被随机分为正常对照组(NC,n=10)和运动对照组(NCE,n=10),肿瘤模型组(TC,n=10)及模型运动组(TCE,n=10). TC,TCE组小鼠接种4T1细胞.其中NCE, TCE组以10 m/min, 60 min/次,5次/周的强度进行有氧运动干预,共计28 d.最后一次运动结束后48 h,分离小鼠血清和肿瘤,记录瘤体积和瘤质量.通过ELISA法检测血清白介素1β(IL-1β)和雌二醇(estradiol, E2)质量浓度,Western blot检测小鼠瘤组织中NF-κBP65和IκBα蛋白的表达.结果表明:4周有氧运动干预后,TCE组小鼠瘤体积和瘤质量均显著小于TC组(p0.05);与TC组相比,TCE组小鼠体内IL-1β(p0.05),E2质量浓度(p0.01)显著降低;与TC组相比,有氧运动干预显著下调了TCE组肿瘤组织NF-κBP65和IκBα蛋白的表达(p0.01).得出中等强度有氧运动干预能够起到抑制4T1乳腺癌肿瘤生长的作用,其机制可能与有氧运动能够降低炎症因子IL-1β,减少IκBα蛋白的激活以降低NF-κBP65入核,抑制转录过程的发生,从而抑制NF-κB信号通路过度激活有关.     

βCaMKII蛋白修饰转基因小鼠工作记忆的研究

利用前额叶脑区过量表达β钙离子/钙调素依赖的蛋白激酶II(βCaMKII)的蛋白修饰转基因小鼠,研究βCaMKII对小鼠工作记忆的影响.Western Blot结果显示,转基因小鼠前额叶脑区的βCaMKII过量表达.在修饰的水迷宫实验中,与对照组相比,转基因小鼠的逃避潜伏期没有发生明显变化.此外,在T迷宫实验中,转基因小鼠的正确率与对照组的正确率也基本相同.由此推测,βCaMKII的过量表达对于前额叶皮层依赖的工作记忆没有明显的影响.     

羟乙基淀粉对内毒素感染大鼠中性粒细胞功能的影响及分子机制

检测羟乙基淀粉(HES 200／0．5)对内毒素腹腔感染大鼠中性粒细胞(PMN)功能的影响及其分子机理．雄性Wistar大鼠注射内毒素(LPS，6mg／kg，ip)以造成感染模型．LPS注射后1min，4种不同剂量的HES：3．75，7．5，15，和30mL／kg，分别由右侧颈静脉持续输注．LPS注射后2h及4h分别检测：循环血PMN核转录因子kappaB(NF-κB)水平，PMN表面CD11b表达，和多种组织中PMN浸润情况．HES(3．75和7．5mL／kg)，能降低LPS引起的NF-κB激活和肺、肝、心诸脏器PMN浸润增高．4种不同浓度的HES剂量依赖性地减少CD11b表达．HES对感染时PMN的激活和浸润有抑制作用，这种作用的产生与它对NF-κB的抑制有关．     

电针联合逍遥散对围绝经期轻中度抑郁症患者疗效及血清ACTH、CORT的影响

为了观察电针联合逍遥散对围绝经期轻中度抑郁症患者的临床疗效及血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、肾上腺皮质酮(CORT)水平的影响,将60例围绝经期轻中度抑郁症患者随机分为电针组、逍遥散组、电针联合逍遥散组,电针组选取"百会"、"神门"等穴给予电针治疗,逍遥散组给予逍遥散口服治疗,电针联合逍遥散组在逍遥散组基础上加用电针治疗,三组均持续治疗1个月,比较三组患者临床疗效,检测围绝经期轻中度抑郁症患者血清ACTH、CORT水平及不良反应的情况。结果表明,电针联合逍遥散组总有效率为95. 00%,高于电针组65. 00%与逍遥散组70. 00%(P0. 05);治疗后三组患者HAMD评分显著低于治疗前(P0. 05),且电针联合逍遥散组HAMD评分显著低于电针组与逍遥散组(P0. 05);治疗后血清ACTH、CORT水平均显著低于治疗前(P0. 05),且电针联合逍遥散组患者血清ACTH、CORT水平均显著低于电针组与逍遥散组(P0. 05);电针组、逍遥散组、电针联合逍遥散组治疗后不良反应发生率相比,差异无统计学差异(P0. 05)。电针联合逍遥散治疗可显著改善围绝经期轻中度抑郁症患者抑郁程度,下调ACTH、CORT表达水平,值得进一步推广使用。     

黑番茄冻干粉对小鼠辐射防护作用的研究

对黑番茄冻干粉的辐射防护作用进行探讨,同时对于其调控机制进行研究。60Coγ射线对ICR小鼠进行一次性全身照射5 Gy,黑番茄冻干粉1.5,3.0,4.5 g/(kg·d)-1干预14 d。对于胸腺指数、脾脏指数、WBC、骨髓有核细胞计数、脾淋巴细胞、细胞因子水平和I-κB和NF-κB表达情况进行测定。4.5 g/kg组胸腺指数有明显升高(P<0.05)。3.0 g/kg组的骨髓有核细胞数与辐射对照组相比具显著性升高(P<0.05),1.5 g/kg组的脾淋巴细胞转化与辐射对照组相比,有显著差异(P<0.01)。4.5 g/kg组能够减缓辐射诱导的血清IL-1α和IL-10的增高趋势(P<0.05)。肝脏MDA水平在辐照后表现出明显的升高(P<0.05),4.5 g/kg组,肝脏和血清GSH-Px水平均有显著的增高(P<0.05)。3.0 g/kg组与辐射对照组相比表现出明显的增高。而其他两组并没有表现出显著的变化(P>0.05)。黑番茄冻干粉有一定的辐射防护功效,其机制可能通过对于NF-κB与I-κB两个基因表达情况的调节,进而对于炎性因子的分泌和免疫器官产生调节作用。     

甲泼尼龙对单侧输尿管梗阻诱导的肾纤维化的影响

为探讨甲泼尼龙在小鼠肾纤维化中的作用,本文通过单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction, UUO)实验建立肾纤维化模型。实验将25只雄性Balb/c小鼠随机分为假手术组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。手术后第2天给药,14 d后,使用HE染色和Masson染色检测各组小鼠肾脏病理变化情况。Western blotting和IHC染色检测各组梗阻侧肾脏中Col-1、Col3A1、FN、α-SMA的表达情况以及TGF-β/Smad和NF-κB信号通路中蛋白的表达情况。结果显示UUO会导致小鼠肾间质纤维化,甲泼尼龙能显著减弱UUO小鼠肾间质细胞外基质Col-1、Col3A1、FN、α-SMA的生成,下调TGF-β/Smad和NF-κB信号通路中蛋白的表达。由此可知,甲泼尼龙对小鼠肾纤维化有明显的改善作用,它通过抑制TGF-β/Smad和NF-κB信号通路来减轻UUO诱导的肾纤维化。     

人参皂苷Rb1通过抑制NF-κB信号通路减轻了大鼠佐剂性关节炎

本研究旨在探讨人参皂苷Rb1对佐剂性关节炎(AIA)大鼠的保护作用及机制.AIA大鼠腹腔注射给药Rb1,连续给药14 d,观察大鼠足肿胀、关节病理及血清炎症细胞因子水平.并通过体外实验检测Rb1对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌NO、TNF-α及IL-6水平的影响,进一步评估Rb1的抗炎作用.Western blot检测关节滑膜及RAW264.7细胞中NF-κB信号通路相关蛋白表达,阐明Rb1抗RA作用机制.结果显示,Rb1显著减轻AIA大鼠足肿胀和关节破坏,降低血清TNF-α、IL-1β及IL-6水平并抑制LPS诱导的RAW264.7细胞分泌NO、TNF-α及IL-6水平.Western blot显示Rb1下调关节滑膜p-IκBα及p-p65的表达,上调RAW264.7细胞IκBα的表达.以上结果提示,Rb1对AIA大鼠具有保护作用,与抑制关节滑膜中NF-κB信号通路的激活有关.     

高内涵筛选NF-κB信号通路的技术体系建立

NF-κB是参与免疫调节、炎症反应、肿瘤发生等过程重要的转录因子,在TNFα、IL-1β、LPS等因子诱导下NF-κB发生核转位并激活其转录活性。尝试利用高内涵筛选(High Content Screening,HCS)和RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术建立NF-κB核转位高通量筛选体系,该体系的应用将有助于发现新的NF-κB信号通路调节因子,为免疫与肿瘤的机制研究提供线索。     

Physagulin H通过阻断NF-κB和JNK/MAPKs信号通路抑制LPS诱导RAW 264.7细胞产生的炎症反应

采用脂多糖诱导的RAW 264. 7巨噬细胞体外炎症模型评价physagulin H的抗炎活性.以MTT法评价细胞毒性,Griess法检测NO的含量,ELISA法检测PGE2和TNF-α水平,Western Blot法检测炎症蛋白表达(iNOS和COX-2)以及对NF-κB炎性信号通路(IκB-α蛋白降解)和对MAPKs通路(JNK,p38和ERK蛋白磷酸化)的调控作用,研究physagulin H的抗炎活性及作用机制.结果表明,physagulin H可显著降低巨噬细胞RAW264. 7中NO、PGE_2和TNF-α的释放,还可显著降低iNOS和COX-2蛋白的高表达且呈浓度依赖性.Physagulin H对LPS诱导NF-κB/IκB-α降解具有显著抑制作用.进一步的抗炎机制研究表明,physagulin H能抑制JNK磷酸化,但对ERK 1/2和p38磷酸化无明显抑制作用.综上,physagulin H是通过调控NF-κB和JNK/MAPKs信号转导通路下调LPS诱导的炎性蛋白的高表达,进而抑制小鼠巨噬细胞产生和释放过量炎症介质以及炎症因子,从而发挥抗炎作用.     

五指毛桃对小鼠酒精性肝损伤的保护作用

探讨五指毛桃对小鼠酒精性肝损伤的保护作用.将小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、葛花组、五指毛桃低、中、高剂量组,葛花组按0.53 g/(kg·d)剂量灌胃葛花提取物;五指毛桃低、中、高剂量组按0.2 g/(kg·d)、0.4 g/(kg·d)、0.6 g/(kg·d)剂量灌胃五指毛桃提取液;空白对照组和模型对照组灌胃等量0.9％生理盐水.30 min后,除空白对照组外剂量组和模型对照组分别按剂量10 mL/kg灌胃牛栏山二锅头(56％乙醇),连续灌胃10天,考察体重、自主活动次数、肝脏指数、GSH含量、SOD活性、TNF-α、NF-κB、IL-1β和IL-6的水平.各组小鼠体重无显著性差异.与空白对照组相比,模型对照组自主活动次数、肝脏指数、IL-6、IL-1β 、TNF-α和NF-κB水平均有所升高,GSH含量、SOD活性均有所下降;与模型对照组相比,低、中、高剂量的五指毛桃组均在不同程度上降低肝脏指数、IL-6、IL-1β、TNF-α、NF-κB水平,升高GSH含量和SOD活性.五指毛桃对小鼠酒精性肝损伤具有一定的保护作用.