液体发酵树舌提取凝集素的生理学功能检测

本文对树舌菌丝体的深层发酵工艺进行了初步的研究。试验结果表明,树舌菌丝体在大豆培养基中培养5天,产出的总蛋白、总糖含量较高。从发酵液中分离和纯化出树舌凝集素具有明显的生物学活性。     

菜豆鲜荚中菜豆凝集素的提取与分离纯化工艺研究

以Bean Saint esprit a oeil rouge菜豆鲜荚为试验材料,优化了菜豆凝集素的提取和分离纯化工艺,研究了提取剂、料液比、p H值和提取时间对菜豆凝集素活性的影响,建立了硫酸铵分级沉淀、DEAE-52阴离子交换层析和Superdex-200凝胶过滤层析的组合方法用于分离纯化菜豆凝集素。研究结果表明:以磷酸盐缓冲溶液为提取剂,料液比1∶25,p H值6~8,浸提时间8 h,菜豆植物凝集素的提取效果适宜。菜豆凝集素浸提液经硫酸铵分级沉淀,DEAE-52阴离子交换层析,Superdex-200凝胶过滤层析,冷冻干燥后可获得纯度较高的菜豆凝集素。纯化的样品经非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳检测为单一条带,血凝法检测有血凝活性。     

麦胚凝集素的纯化及其对小麦锈病菌的抑制

本文进行了麦胚凝集素的提取和纯化,并试验了麦胚凝集素对小麦叶锈病菌及条锈病菌孢子萌发的影响,结果表明它能抑制该病菌的孢子萌发。     

海带凝集素的分离及性质研究

海带 (Laminariajaponica)经TBS缓冲液粗抽提 ,然后进行硫酸铵分级实验 ,测定盐析范围为 70 %硫酸铵饱和度 ,经 70 %硫酸铵饱和度分级后 ,海带凝集素 (LJL)纯化倍数为 9,总活力回收为 410 % ,LJL粗抽提液糖含量为12 .94% .该凝集素不被已测试的D 果糖、葡萄糖、γ 球蛋白所抑制 ,但被卵清蛋白抑制     

扁核木叶蛋白的提取及分离和纯化研究

本实验主要对扁核木叶蛋白的提取、分离和纯化进行了研究。从扁核木叶片中提取叶蛋白,用20%～80%硫酸铵沉淀分级盐析叶蛋白,采用葡聚糖G-150凝胶层析对扁核木叶蛋白进行脱盐和分离,以除去硫酸铵以及其他盐类,最终得到较纯的叶蛋白。结果表明,经盐析沉淀后的叶蛋白提取率达66%,层析纯化后的扁核木叶蛋白提取率较高,达74%,实验基本达到了纯化效果。     

富含高丰度蛋白的人参果实双向电泳图谱的建立

通过常规的TCA-丙酮沉淀法和丙酮沉淀法对人参果实蛋白的提取效果,确立了丙酮沉淀法更适合人参果实蛋白的提取.为进一步改善其2-DE分离效果,对丙酮沉淀法提取的总蛋白用Tris-饱和酚提纯,在其2-DE图谱效果有所改善的基础上,又在Tris-饱和酚中加入等体积的氯仿/异戊醇(24∶1)对丙酮沉淀法提取的总蛋白进行再次提纯,最终得到质量较高的2-DE图谱,其高、低丰度蛋白都得到了较好的分离.     

假酸浆多糖的酶法提取及纯化工艺的研究

采用正交设计法进行试验,以多糖的提取率作为评价指标,用木瓜蛋白酶法从假酸浆籽中提取假酸浆多糖.确定了木瓜蛋白酶的最佳提取工艺为:酶用量3%,p H=7.5温度55℃,提取时间50min.多糖提取率为6.02%.再将提取的粗多糖经脱蛋白、脱色等一系列工艺进行纯化,确定了假酸浆多糖的最佳纯化工艺,在此条件下测得多糖的含量为80.6%,脱蛋白率为77.33%,脱色率为70.2%.     

亚麻油渣提取物制备工艺研究

采用单因素试验、正交试验法进行研究,以HPLC法对提取液中的木酚素含量进行测定,大孔吸附树脂从提取物中分离纯化亚麻木酚素,对亚麻油渣提取物的制备工艺进行了研究.结果显示:亚麻油渣的提取方法为回流提取,其工艺参数为加入16倍量70%乙醇,回流提取3次,每次1 h;分离纯化工艺参数为2 BV/h流速上样,6 BV的30%乙醇,3 BV/h洗脱.该工艺稳定可行,可作为亚麻油渣提取物的制备工艺.     

灵芝三萜提取工艺的优化

以灵芝孢子粉为原料,使用体积分数为70%的乙醇为提取剂,采用酶解与超声辅助提取相结合的方法,将不同液固比、超声时间、酶解时间和酶用量设定为4个因素,进行单因素试验并设计响应面试验,以确定最优提取方式及其影响因素.利用大孔树脂层析法对灵芝三萜进行分离纯化,通过优化分离纯化工艺,确定最佳洗脱树脂、洗脱液体积分数、上样液流速以及上样液质量比.采用高效液相色谱法分析灵芝总三萜的组分差异.通过预实验分析,与单一提取法相比,酶+超声辅助提取更高效.采用乙醇为提取剂提取灵芝中三萜类化合物可提高三萜的纯度.最优条件下可实现对三萜含量的快速、精确测定,为灵芝三萜的分离纯化提供理论依据.     

应用离子交换纤维素提取外源凝集素的研究

应用ＤＥＡＥ－纤维素从花芸豆和白芸豆中提取外源凝集素，在平衡ＰＨ６．８的条件下，用酸度梯度洗脱的方法，得到了较好的柱色谱分离效果，用获得的外源凝集素组分进行淋巴细胞的激活培养试验，其效果十分显著。     

半夏研究进展

半夏是一种重要的中药材，其生存环境遭到日益严重破坏，造成半夏资源匮乏。为保护和开发这一重要药材资源，已对其进行了系列的研究。本文介绍了半夏的人工栽培、组织培养与快速繁殖等方面的研究成果，并对半夏研究的趋势进行了探讨。半夏蛋白是一种从半夏块茎鲜汁中提取出来的植物蛋白，它是一种植物凝集素，具有抗肿瘤、抗生育等重要的生理作用,本文对其也进行了阐述。     

半夏快速繁殖研究

实验以半夏的珠芽和叶片作外植体，研究了外源激素在半夏快速繁殖中的作用．在附加2．0mg／LBA和0．5mg／LGA。的MS培养基中，珠芽的生长与增殖最好；在附加不同外源激素的MS培养基中，叶片的形态发生表现出不同的状态；在附加0．5mg／LIAA的MS生根培养基中，根的分化率高，生长快，移栽成活率可达98％以上。     

南充道地药材半夏的遗传多样性分析

目的:对南充道地药材半夏的遗传多样性进行研究,为半夏的保护利用提供参考.方法:采用随机扩增多态DNA(RAPD)方法对60份半夏基因组进行扩增,所获数据通过NTSYS-pc v2.1、POPGENE v1.31及Arlequin3.0进行分析.结果:从43条引物中筛选出22条条带清晰且重复性好的引物用于实验和统计分析,共扩增出88个位点,多态性位点占79.5％,表现出较高的遗传多样性.分子方差分析表明各来源地内材料间差异构成了遗传变异的主要来源.聚类分析显示,所有供试半夏可明显聚为三类,其中栽培种分布较集中.组间遗传差异分析表明大部分来源地间差异不显著,组间基因流动较频繁.结论:南充地区的半夏资源具有较高的遗传多样性;材料间遗传距离的远近与其地理来源有一定相关性,野生种的遗传背景较栽培种更为丰富,说明人为的引种、筛选、栽培已对半夏资源的多样性造成了影响.因此,应尽快建立半夏种质资源库,通过形态学、细胞学及分子生物学技术进行系统分类,为保护利用半夏资源提供理论依据和物质基础.     

半夏乙醇提取物对桃蚜的控制作用研究

选用无水乙醇为有机溶剂,采用索氏提取法提取半夏干粉中的活性物质,研究提取物对桃蚜的控制作用,结果表明,半夏乙醇提取物对桃蚜有较好毒杀活性,提取物浓度越高,效果越明显,当浓度为100.0 mg·mL-1,处理后48 h,毒杀校正死亡率在90%以上,桃蚜在半夏无水乙醇提取物处理过的叶片上取食,其若蚜发育历期延长,成蚜寿命显著缩短,生殖力显著下降,桃蚜种群数量受到明显的抑制,在浓度为100.0 mg·mL-1时,7 d后桃蚜种群数量约为对照的47.6%.     

植物激素对半夏种子的发芽影响研究

为了探索植物激素对半夏种子的发芽影响,为半夏的品种选育和遗传改良提供技术参考,采用不同浓度的赤霉素(GA)、奈乙酸(NAA)、吲哚乙酸(IAA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2-4-D)处半夏种子的方法研究了GA、NAA、IAA、2-4-D对半夏种子的发芽率、发芽势、活力指数。研究结果表明:一定浓度的GA、NAA、IAA、2-4-D对半夏种子的发芽率、发芽势、活力指数均具有一定的促进作用,当NAA处理浓度为50ppm时,半夏种子的发芽率可提高20%;当NAA处理浓度为75%时,半夏种子的发芽势可提高20%;当IAA处理浓度为50ppm时,半夏种子活力指数可提高1.05。     

侵染半夏的黄瓜花叶病毒RNA3全序列分析及侵染性克隆构建

对从我国甘肃省天南星科植物半夏上获得的黄瓜花叶病毒分离物（CMV-PGs）的RNA3进行全长克隆和序列分析及侵染性克隆构建．结果表明：CMV—PGsRNA3序列全长2179nt,与CMV—Fny株系RNA3的同源性为83．1％．选取已报道CMV株系的38个RNA3全长序列,根据CP核苷酸序列进行同源性比较,系统进化树分析表明：CMV-PGs属于亚组ⅠB,但是相对独立．进一步构建CMV—PGsRNA3的侵染性克隆,通过体外转录获得具有侵染活性的RNA转录本,将CMV—PGsRNA3的侵染性转录本与CMV—FnyRNA1和RNA2的侵染性转录本混合接种烟草,成功获得假重组体F1F2P3．     

半夏与苦参合用的镇静催眠作用研究

目的研究半夏与苦参合用后对小鼠的镇静催眠作用。方法采用电位滴定法测定半夏药材中总游离有机酸的含量,酸碱滴定法测定苦参中总生物碱的含量,以控制药材质量;采用阈下和阈上剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠法,对受试药物的镇静催眠作用进行比较研究;结果小鼠睡眠持续时间长短顺序为生理盐水组（20．87±14．07min）〈苦参、半夏小剂量组（38．85±16．69min）〈苦参、半夏大剂量组（41．14±15．99min）〈苦参大剂量组（44．73±16．26min）〈苦参小剂量组（47．29±19．92min）,且给药组时间与空白组时间均有显著性差异。结论结果表明,苦参大、小剂量组,以及苦参＋半夏大、小剂量组均能明显延长戊巴比妥钠小鼠睡眠时间,强度可与安定（1mg／kg）相当。     

半夏与苦参合用的镇静催眠作用研究

目的 研究半夏与苦参合用后对小鼠的镇静催眠作用.方法 采用电位滴定法测定半夏药材中总游离有机酸的含量,酸碱滴定法测定苦参中总生物碱的含量,以控制药材质量;采用阈下和阈上剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠法,对受试药物的镇静催眠作用进行比较研究;结果小鼠睡眠持续时间长短顺序为生理盐水组(20.87±14.07min)<苦参、半夏小剂量组(38.85±16.69min)<苦参、半夏大剂量组(41.14±15.99min)<苦参大剂量组(44.73±16.26min)<苦参小剂量组(47.29±19.92min),且给药组时间与空白组时间均有显著性差异.结论 结果表明,苦参大、小剂量组,以及苦参+半夏大、小剂量组均能明显延长戊巴比妥钠小鼠睡眠时间,强度可与安定(1mg/kg)相当.     

不同激素及浓度对半夏植株再生的影响

以半夏[Pinellia ternate(Thunb) Briet]叶片、叶柄为外植体,接种于含有不同激素浓度的培养基中,进行诱导培养.结果表明:较低浓度的2,4-D、IAA和NAA有利于半夏外植体小块茎的诱导,随着生长索浓度的升高,愈伤组织的诱导率有所增加,2.0 mg/L 2,4-D、IAA诱导产生大量被绒毛的粗根,NAA诱导产生致密的长根,从而抑制了小块茎的分化.较低浓度的6-BA有利于小块茎的诱导,随着浓度的升高,愈伤组织的诱导率有所增加.不同浓度的KT、zT对小块茎的诱导率影响不大.