动物细胞无血清培养基的发展和应用

随着生物医药产业和生命科学基础研究对动物细胞培养规模、效率和安全性能要求的不断扩大和提高,无血清培养基的研制和开发已经成为细胞工程领域的重要课题。无血清培养基的发展历经了无血清来源、无动物源、无蛋白和化学成分限定培养基等四个阶段,逐步使得无血清培养基的成分更为明确和简单,进一步提升了无血清培养基在细胞培养中可避免外源物污染等的优势,使其在生物制品和生命科学领域获得了广泛的应用和发展。本文主要系统总结了无血清培养基的发展历程、组分构成和优化方法,尤其对无血清培养基近年来在生物制品、干细胞培养及肿瘤研究等方面的最新开发应用进行了扼要分析述论,以期对无血清培养基在生物学前沿领域的应用和优化提供可借鉴的方向,尤其在肿瘤干细胞的方面可以进行更深入的探索。     

毕赤酵母发酵生产重组人血清白蛋白高密度培养条件的研究

研究了毕赤酵母基因工程菌高密度培养条件。在全合成培养基的基础上考察了诱导过程中添加(NH₄)₂SO₄、微量元素PTM₁、油酸、甲醇加量及pH等因素对重组人血清白蛋白表达的影响，发现PTM₁能显著提高白蛋白的表达，6mL/L时蛋白表达量最大。诱导期硫酸铵浓度维持在 3g/L左右蛋白表达量最大，高于3g/L抑制蛋白表达。酸性环境不利于蛋白表达，诱导过程维持pH6.0～6.5最佳。甲醇最佳诱导浓度为10mL/L。添加0.05%的油酸可有效提高蛋白表达。可以此作为发酵罐上发酵培养流加成分的参考。     

急性重症胰腺炎肠内营养的护理

目的探讨早期肠内营养治疗重症急性胰腺炎的临床应用及护理。方法对46例确诊为重症急性胰腺炎的患者,给予肠内营养治疗,并进行针对性护理,观察治疗前、后1、2、4周患者血清白蛋白、前清蛋白、转铁蛋白等变化及不良反应。结果4周后,46例患者病情均明显好转,20例患者完全治愈,其余26例患者血尿淀粉酶正常,体重明显增加,血清白蛋白、前清蛋白、转铁蛋白等指标较肠内营养前明显上升,除10例发生轻微的胃肠道反应外,未出现其它严重不良反应。结论早期肠内营养治疗重症急性胰腺炎安全、有效,合理的护理措施的实施,对于减少肠内营养治疗并发症的发生,促进疾病的恢复至关重要。     

维生素B6对团头舫血清生化成分的影响

在精制饲料中添加维素Ｂ６投饲团头鲂８周，检测试验鱼血清若干生化成分的变化，结果发现，维生素Ｂ６能显著降低血清甘油三酯，总胆固醇和葡萄糖含量，并相应增加血清高密度脂蛋白胆固醇和白蛋白水平及α－淀粉酶活性。分析表明，饲料中添加维生素Ｂ６能促进团头鲂的血清脂质代谢及其转运，从而避免了血脂积累及营养性脂肪肝的发生。     

表达vWF蛋白的重组BHK细胞的无血清培养

采用HADAMARD统计设计方法建立了适于重组BHK细胞培养和vWF蛋白表达的无血清培养基SFMA。用SFMA进行重组BHK细胞的批培养,细胞生长明显优于有血清培养(DMEM FBS(φPRS=0．05))和无血清培养基SFM-Ⅱ的培养,最大细胞密度可分别提高16．7％和40%。同时,在培养的96h,蛋白的表达水平比有血清培养提高了18．7%,SFMA维持培养48h的vWF蛋白的表达水平比SFM-Ⅱ提高了50％。     

氨基酸和蛋白质对牛瘤胃细菌生长的影响

用经洗涤的瘤胃细菌稀释液体庆体外作培养，确定不同的氨基酸刺激瘤胃细菌生长的效果。添加或不添加酷蛋白，由各种的氨基酸组成的混合氨基酸对细菌的生长具有刺激作用。不管是否添加酷蛋白或水解酷蛋白，不同组合的氨基酸均不能细菌的生长。当氨作为唯一的氨源时，它对细菌的生长无刺激性。瘤胃细菌的生长与培养基内的碳水化合物含量存在线性函数关系。结果显示，氨基酸和蛋白质对瘤胃细菌的刺激作用，决定于所提供的氨基酸和蛋白质     

维生素B_6对团头鲂血清生化成分的影响

在精制饲料中添加维素B6投饲团头鲂8周，检测试验鱼血清若干生化成分的变化。结果发现，维生素B6能显著降低血清甘油三酯、总胆固醇和葡萄糖含量，并相应增加血清高密度脂蛋白胆固醇和白蛋白水平及α-淀粉酶活性。分析表明，饲料中添加维生素B6能促进团头纺的血清脂质代谢及其转运，从而避免了血脂积累及营养性脂肪肝的发生。     

健康麋鹿血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量的分析

为了解健康麋鹿在不同发育阶段血清中白蛋白和球蛋白含量的变化,采用全自动生化分析仪测定血清中总蛋白、白蛋白和球蛋白的含量.结果表明:雌性和雄性麋鹿血清总蛋白、白蛋白和球蛋白的含量在幼年期较低,随着年龄的增长,蛋白含量在青年期和成年期达到最高水平,成年期后随着年龄的增长逐渐降低.年龄与血清总蛋白、白蛋白和球蛋白的相关性较强,性别与总蛋白、球蛋白和白蛋白的含量相关性差.青年期和成年期的蛋白含量相近,均显著高于幼年期和老年期,差异具有统计学意义(p0.05).在麋鹿发育的各个阶段,雄性血清的蛋白含量均略高于雌性.     

高通量血液透析联合尿毒清颗粒用于糖尿病肾病患者的效果观察

探究高通量血液透析联合尿毒清颗粒用于糖尿病肾病患者的效果。回顾性选择90例在2018年5月-2020年5月甘肃省天水市武山县人民医院接受治疗的糖尿病肾病患者作为研究对象,将其分为单一组和联合组,每组45例。采用高通量血液透析治疗的患者列入单一组,采用高通量血液透析联合尿毒清颗粒治疗的患者列入联合组,对两组患者治疗前后的蛋白指标和体测指标进行比较。治疗前,联合组的血清前白蛋白、血清白蛋白以及转铁蛋白水平与单一组无明显差异(P0.05),联合组的上臂肌围和体重指数与单一组无明显差异(P0.05);治疗后,联合组的血清前白蛋白、血清白蛋白以及转铁蛋白水平均高于单一组(P0.05),联合组的体重指数高于单一组(P0.05),联合组的上臂肌围长于单一组(P0.05)。高通量血液透析联合尿毒清颗粒用于糖尿病肾病患者的效果显著,能改善患者上臂肌围指数和体重指数,值得推广。     

散射速率比浊测定高血压患者尿中微量蛋白

蛋白尿是肾脏受损的常见象征,以往因检验手段所限,不能测定出尿中的微量蛋白.而用速率散射比浊法可以测到ng级水平[1].我们经过对26例高血压病人尿液微量白蛋白、转铁蛋白、免疫球蛋白、α1微球蛋白(MA、TRU、IgU、α1M)的定量检测发现用常规方法检测无蛋白尿的高血压病人,尿中微量蛋白的排泄量已增加.为了观察高血压病对肾脏的早期损伤,用速率散射比浊法对高血压病人尿中四种项目进行定量检测结果如下.     

牛血清白蛋白修饰水溶性CdTe量子点及分析应用

以巯基乙酸为稳定剂,采用水热法合成了CdTe 量子点,用牛血清白蛋白改变量子点的表面修饰状态并通过荧光发射光谱研究了溶液pH、温度和离子强度对表面修饰产生的影响.结果表明,CdTe量子点在502 nm处有吸收,在538 nm处有荧光发射,经牛血清白蛋白对其表面修饰后,吸收峰位不变,但吸光强度升高;荧光发射峰位不变,荧光显著增强.在优化的反应条件下,牛血清白蛋白质量浓度在0.05~1.0 mg/L范围内与荧光增加值呈线性关系,检出限为0.011 7 mg/L。以缓冲溶液为基底牛血清白蛋白含量测定获得满意结果.     

荧光光度法研究杯[6]芳烃与蛋白质的相互作用

用荧光光度法研究了杯[6]芳烃磺酸钠与蛋白质的相互作用.求出了杯[6]芳烃磺酸钠与蛋白质作用的形成常数,络合比和结合位点数.结果表明,杯[6]芳烃磺酸钠在一定条件下能静态猝灭蛋白质的荧光,同时初步探讨了体系相互作用力.     

光谱法研究杯[8]芳烃与蛋白质的相互作用

用荧光光度法研究了杯[8]芳烃磺酸钠与蛋白质的相互作用.实验结果表明,牛血清蛋白可产生λex,max=280 nm,λem,max=349 nm的自身荧光.杯[8]芳烃磺酸钠在一定条件下能静态猝灭蛋白质的荧光.求出了杯[8]芳烃磺酸钠与蛋白质相互作用的形成常数,络合比和结合位点数,确定了反应的最佳条件为pH 7.5,0.1 mol.L-1NaCl用量1 mL,初步探讨了体系的主要作用力为范德华力.     

胶体金标记牛血清白蛋白及其在电场中的迁移行为

采用柠檬酸钠还原法制备了不同粒径的胶体金,对牛血清白蛋白(BSA)进行标记,考察了胶体金标记BSA的影响因素.以琼脂糖凝胶为载体介质,研究了三种粒径的胶体金及其BSA复合物在电场中的迁移行为.结果表明,pH值、离子浓度、蛋白量都会影响胶体金对BSA的标记.标记的最适条件是:无盐或极低盐浓度,pH值5.8,蛋白加入量不小于最小稳定蛋白量.胶体金及其BSA复合物在特定电场中的迁移行为类似于火箭免疫电泳,其迁移速度随着金纳米粒子粒径的增大而减小;金纳米粒子与BSA结合后迁移速度减慢,BSA的加入量对复合物的迁移速度无影响.     

水滑石对水溶液中牛血清白蛋白的吸附

采用水相沉淀热结晶法制备水滑石(LDHs),研究其对牛血清白蛋白(BSA)的吸附量及LDHs可能存在的结构变化,探讨pH值、初始质量浓度以及偶联剂质量分数对BSA吸附量的影响.结果表明,pH值对LDHs吸附BSA的影响最大,在pH值为6.2,BSA初始质量浓度为6.0 g/L时饱和吸附量可达到56.82 mg/g.偶联...     

1-O-烯丙基-4-羟基蒽醌与牛血清白蛋白相互作用的电化学研究

采用循环伏安法研究了1-O-烯丙基-4-羟基蒽醌（OAHAQ）的电化学行为．研究表明，OAHAQ与BSA能形成了1：1的配合物，同时研究了OAHAQ及其与BSA配合物的表观扩散系数，在BSA存在下，0AHAQ的标准速率常数Ks没有显著的变化，其还原峰电流随着BSA的加入而减小，据此可用来测定BSA的浓度．     

甲醛滴定法测定牛血清白蛋白的酶解度

建立了一种测定蛋白质酶解度的方法,介绍了甲醛滴定法测定酶解度的四个关键环节：酚酞指示剂配制、基准液配制、碱液标定、甲醛滴定与酶解度计算。依据蛋白质酶解度的定义与相关计算公式,利用甲醛滴定法测定并计算出胰蛋白酶对底物BSA在本实验中的特定酶解条件下的酶解度为6.31。     

芦丁与牛血清蛋白在不同条件下的相互作用研究

 依据芦丁对牛血清蛋白(BSA)的内源荧光的猝灭作用,采用荧光猝灭法研究了芦丁与血清白蛋白在不同条件下的相互作用.结果表明,芦丁与BSA之间主要因静电相互作用而发生结合反应,这一结合反应导致了蛋白质的荧光发生了猝灭,但并没有引起BSA的构象发生明显改变.芦丁与BSA的结合反应常数受介质pH、离子强度和金属离子种类影响明显.该结合常数在介质pH为8.0时具有最大值,但随离子强度的增加而减小,因Cu²⁺、Zn²⁺、Co²⁺、Fe²⁺、Mn²⁺的存在而增加.     

诺氟沙星与牛血清白蛋白相互作用的拉曼光谱研究

用拉曼光谱技术研究了固态和水溶液中诺氟沙星和牛血清白蛋白的相互作用.通过对诺氟沙星和牛血清白蛋白的拉曼光谱比较,发现其作用产物的拉曼特征峰发生了较明显的变化,解释了可能的作用机理.     

稀土金属离子与牛血清白蛋白结合反应的研究

分析了牛血清白蛋白(BSA)对稀土铽离子的荧光敏化增强效应．首次用敏化荧光法确定了铽离子与BSA的结合位点类型和结合位点数,表明铽离子与BSA至少有2类结合方式,第1类结合位点数为2;以铽离子为探针,测定了其他稀土离子对Tb2BSA体系敏化荧光的猝灭,发现稀土离子与BSA的结合呈现“四分组效应”,钇离子的位置向轻稀土方向移动．