有机磷对胆碱酯酶作用影响的生化分析

通过对有机磷抑制人乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶以及猪和牛丁酰胆碱酯酶活性的测定，发现人乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶对有机磷较为敏感，结果表明，该方法既灵敏又稳定。     

基于酶三维结构的乙酰胆碱酯酶抑制剂—石彬碱甲及类似物研究

石杉碱甲是我国首先从石杉属植物Ｈａｐｅｒｚｉａ ｓｅｒｒａｔａ（Ｔｈｕｎｂ．）Ｔｒｅｖ。中分离得到的一种新的生物碱,具有明显的抗胆碱酯酶作用,对老年痴呆病人可明显改善其记忆功能。从基于酶的三维结构出发对石杉碱甲及其类似物作用于乙酰胆碱酯酶的作用机理进行了理论计算研究。首先从同源的电鳐乙酰胆碱酯酶的三维晶体结构为模板,构建人乙酰胆碱酯酶的三维结构和活性中心的组成,再用分子模拟方法和分子力学方法得到石     

有机磷生物传感器的研制

有机磷生物传感器对于环境分析十分必要.利用乙酰胆碱酯酶与有机磷农药之间的特殊的亲和力,以乙酰胆碱酯酶为固定相,采用石英晶体用来做载体的材料,研制有机磷传感器.初步得到酶固定的最佳pH值及其浓度环境为pH=7,乙酰胆碱酯酶浓度为C=0.0133mol.l-1.并对敌百虫溶液进行测定,证明了pH值和浓度条件的合理性.     

中华稻蝗山西晋源种群乙酰胆碱酯酶生化特性研究

对中华稻蝗山西晋源种群五龄若虫和成虫进行了马拉硫磷敏感性的生物测定，同时对若虫和成虫的乙酰胆碱酯酶（ACHE）特性进行了比较研究，生物测定结果表明，晋源种群若虫的LD50值（4．94μg／g虫重）是成虫（2．44μg/g虫重）的2．02倍；有机磷抑制剂对该种群若虫和成虫的AChE的体外抑制研究表明，晋源成虫AChE对氧化毒死蜱、对氧磷、甲基内吸磷的敏感性比晋源若虫分别高1．39、1．34和1．24倍．乙酰胆碱酯酶动力学研究结果表明，若虫动力学参数Km值和Vmax值均较成虫为高；用乙酰硫代胆碱（ATC）做底物测定AChE活性，若虫AChE活性是成虫的1．22倍．中华稻蝗晋源种群若虫对有机磷抑制剂敏感性下降可能与其AChE活性的增高有关，而成虫与若虫之间AChE活性的差异可能与不同阶段虫体对马拉硫磷选择压力的差异有关。     

植物酯酶分离纯化及酶促反应条件优化的研究

目的:建立一种快速检测牛肉中有机磷农药残留的方法.方法:从新鲜小麦粉、黄豆粉和玉米粉中分离植物酯酶,真空冷冻浓缩,羧甲基纤维素层析,真空冷冻干燥提取植物酯酶,并通过试验测得其酶促反应最适温度36.8℃,最适pH 7.7,酶促反应时间3 min,敌敌畏对其抑制时间8 min,显色剂2,6-二氯靛酚的最大吸收波长606 nm.结论:在相同条件下,提纯后的植物酯酶检测模拟有机磷农药残留阳性牛肉样品抑制率为99.5%,市售丁酰胆碱酯酶测得的抑制率为99.8%%,两者检测结果高度一致.     

饲养温度对小菜蛾(Plutella xylostella)AchE和CarE活力的影响

在湿度定义为干、湿球温度差为3℃、光照强度10000—12000lx、光照周期14L：10D条件下，探索饲养温度（X：24—36℃）之变化对小菜蛾（Plutella xylostella）4龄幼虫乙酰胆碱酯酶（Ache）和羧酸酯酶（CarE）活力（Y）的影响效应。实验结果表明，活力指数随着饲养温度的升高而降低，两者之间存在显著的线性相关关系：温度与乙酰胆碱酯酶（AchE）活力两者间的相关关系函数式为Y=0．3327—0．0068X；与羧酸酯酶（CarE）活力的为Y=3．1278—0．0780X。     

蚯蚓乙酰胆碱酯酶的分离与固定化试验研究

从蚯蚓中提取乙酰胆碱脂酶,通过硫酸铵盐析,离子交换层析等方法获得了较纯的胆碱酯酶,并对其部分性质进行测定.分别采用鸡蛋膜固定化法,活化载体-共价结合法和戊二醛交联法进行酶的固定.结果表明:蚯蚓体内乙酰胆碱酯酶含量较低,且纯化过程中损失较大,结果欠佳;活化载体-共价结合法固定得到的乙酰胆碱酯酶酶膜活性高,酶不易损失,重现性好.为建立快速的痕量有机磷类的酶法分析方法奠定了基础.     

基于普鲁士蓝/碳纳米管纳米棒修饰电极用于有机磷农药检测的研究

通过在碳纳米管(MWCNTs)表面原位自发还原形成普鲁士蓝纳米颗粒(PB),制备PB包覆的MWCNTs(PB@MWCNTs)纳米棒,并以壳聚糖(CS)为交联剂,制备了有机磷农药电流型乙酰胆碱酯酶(AChE)生物传感器.实验表明,PB@MWCNTs纳米棒独特的纳米结构,增强了PB稳定性,加快了电子传递的速率,保持了乙酰胆碱酯酶(AChE)活性.制备的传感器对有机磷农药(OPs)呋喃丹的检测具有检测限低3 nmol/L、灵敏度高和使用寿命长等优点.     

薄层层析—酶抑制法检测有机磷和氨基甲酸类杀虫药剂

提出了用薄层－抑制乙酰胆碱酯酶法,检查蔬菜,水果,粮食中农药残留的方法,此法对乙酰胆碱酯酶的抑制是特异的,它适用于在不具备精密仪器设备的小型实验站内检测农药残留量,对大多数有机磷和氨基甲酸酯类农药来说,其检测限在0.5-1.0μg/mL范围。它为在现场测定农药残留提供一种廉价和快速的方法。     

荧光探针自组装膜对久效磷农药的检测

采用CdSe量子点作为荧光探针,将巯基丙酸稳定的CdSe、聚二烯丙基二甲基氯化铵(PDDA)和乙酰胆碱酯酶(ACHE)通过静电吸引法,层层组装到石英表面,构建一种荧光性自组装多层膜Quartz/PDDA/CdSe/PDDA/ACHE/PDDA.利用有机磷农药对乙酰胆碱酯酶的抑制机理,成功地将自组装膜用于痕量久效磷农药的检测.实验表明,在乙酰胆碱酯酶被抑制16 min,底物乙酰胆碱浓度为8.8 mmol.L-1的条件下,该膜对久效磷的检测限低至48.64 nmol.L-1.所构建的自组装膜稳定性较好、灵敏度较高,可以再生使用.     

2-胺基-1-芳基-1-烷醇类化合物的新合成法及其乙酰胆碱酯酶抑制活性

研究2-胺基-1-芳基-1-烷醇类化合物的合成及其乙酰胆碱脂酶抑制活性。在室温下,利用Pd/C(H2)还原硝基醇高收率地得到胺基醇化合物,并对其进行乙酰胆碱脂酶抑制活性测定。设计、合成了10个目标化合物并经1H NMR1、3C NMR进行结构确证。除化合物2-胺基-1-(3,4,5-三羟基苯基)-1-乙醇外,其它化合物对乙酰胆碱脂酶没有抑制活性。提供了一种合成2-胺基-1-芳基-1-烷醇类化合物的新方法。2-胺基-1-(3,4,5-三羟基苯基)-1-乙醇显示了一定的生物活性,其结构优化工作值得进一步研究。     

真菌来源的乙酰胆碱酯酶抑制剂F01-2076A的研究

利用自建的乙酰胆碱酯酶抑制剂的高通量筛选模型,从大量真菌中筛选到1株阳性菌株F01-2076.该菌株的发酵液经有机溶剂提取、硅胶柱层析及HPLC ODS反相柱层析分离,得到1个活性化合物F01-2076A,该化合物对乙酰胆碱酯酶的IC50为23.4μmol/L.通过对该化合物的紫外、质谱、核磁等理化分析,得知该化合物与已知化合物Altenusin结构相同.     

硝酸铈对大白鼠体内乙酰胆碱酯酶活性的影响

ＳＤ成年大鼠一次性腹腔注射１５０ｍｇ／ｋｇ的硝酸铈,分别于３,６,１２,２４,４８ｈ后处死,测定其脑、肌肉组织的乙酰胆碱酯酶的活性．结果表明：脑、肌肉受硝酸铈影响有相似的规律．在注射初期,酶活性显著降低,经过一段时间后,又逐渐恢复．     

抗性小菜蛾乙酰胆碱酯酶对有机磷及氨基甲酸酯不敏感性研究

福州地区田间小莱蛾Plutella xylostessa L.已对水胺硫磷、克百威、敌敌畏和三唑磷产生高抗,抗性倍数分别为23.52、28.41、16.06和23.43倍.抗性小菜蛾幼虫体内AchE的Km和Vmax值分别为敏感185和0.63倍.水胺硫磷、甲基异柳磷、克百威、敌敌畏对敏感小菜蛾AchE的Ki值分别为抗性的58.75、30.33、198. 87和36.32倍.作者认为AchE对有机磷及氨基甲酸敏感性的降低应是小菜蛾对该类杀虫剂产生抗性的重要机制.     

小菜蛾Plutella xylostella羧酸酯酶、酰胺酶及乙酰胆碱酯酶的研究

研究结果表明,小菜蛾(Plutella xylostella)乙酰胆碱酶、酰胺酶的最适pH值分别为8.0和8.5。pH值对闳酸酯酶活力影响较小,酰胺酶和羧酸酯酶反应速度在反应开始60钟内,仍在线性范围,乙酰胆碱酯酶反应速度在反应开始的8分钟内呈线性关系。羧酸酯酶、酰胺酶和乙酰胆碱酯酶的Vmax分别为551.81(nmol/mg,mln)、5.25×10~(-4)(μmol/mg.min)和20.36(nmol/mg.min);km分别为5.52×10~(-5)(mol)、1.18×10~(-3)(mol)和8.33×10~(-3)(mol)。     

Biosensors based on acetylcholinesterase immobilized on mesoporous silica thin films

Using tetraethoxysilane and 3-aminopropyltriethoxysilane as the silica sources, amino-functionalized mesoporous silica thin films with 3-dimensional cubic structure have been deposited on conducting ITO substrate in the presence of surfactant F127 templates under acid conditions. The acetylcholinesterase （AchE） and cytochrome c （Cyt c） were incorporated into the pores of mesoporous thin films, and an amperometric biosensor was obtained. After adsorption of AchE and Cyt c, the ordered cubic structure of mesoporous silica and the bioactivities and electrochemical activities of the immobilized protein and enzyme molecules were retained. The sensor properties of the biosensor were investigated by using acetylthiocholine iodide as the substrate and Cyt c as the electron transfer mediator. The inhibition versus the logarithm of concentration was found to be linear to organophosphorus pesticide dichlorvos over the concentration ranges of 1.0×10-8 mol/L to 1.0×10-3 mol/L with the detection limit of 3.1×10^-9 mol/L.     

不同运动训练强度对大鼠胃肠道神经递质的影响

目的探讨不同强度运动对大鼠胃肠道神经递质的影响。方法选取成年雄性SD大鼠48只,随机分成3组,即安静对照组、低强度运动组、高强度运动组。各组给予8周不同强度的运动后,测定各组大鼠胃排空率、肠推进率、胃窦组织和十二指肠组织AChE、NOS阳性面积率。结果低强度运动组的胃排空率、肠推进率、胃窦组织和十二指肠组织AChE与安静对照组比较有显著性升高趋势(P<0.05),NOS与安静对照组比较无显著性差异;高强度运动组胃排空率、肠推进率、胃窦组织和十二指肠组织AChE和NOS与安静对照组比较显著性降低(P<0.05),与低强度运动组相比明显下降(P<0.05)。结论低强度运动使大鼠胃排空和肠推进增强,高强度运动对使大鼠胃排空和肠推进有抑制作用,ACh和NO神经递质在其中发挥着重要作用。     

棉叶螨对久效磷的抗药性研究

对棉叶螨久效磷抗性种群研究表明，棉叶螨对久效磷的抗性可能与ＡｃｈＥ敏感性下降，ＧＳＴ和ＭＦＯ活性上升有关，该种群对常见杀虫，杀螨剂的交互抗性研究结果：久效磷与氧化乐果（１１．２７倍）、水胺硫磷（６．７０倍）等有机磷化合物和三氟氯氰菊酯（１３１倍）及双甲脒（５．７５倍）都有交互抗性，而与其他测定药剂间均无交互抗性。     

Vernier acuity of neurones in cat visual cortex

The ability of human observers to detect Vernier breaks of as little as 5 s arc has been termed hyperacuity as this distance is substantially less than the angular separation of the bars of the highest spatial frequency of grating (approximately 1 arc min) that can be detected. Although the visual cortex is a likely candidate for the location of detectors involved in this performance, it is not known whether there are cells sensitive enough to detect deviations from co-linearity that are small compared with their spatial resolution (defined in terms of the highest spatial frequency that the cell can detect). We report here the results of physiological experiments on single units in area 17 of the cat visual cortex in which we studied the effect of introducing a Vernier break into a bar stimulus moved across the receptive field of the cell at a constant velocity. Our results show that the responses of most simple and complex cells are significantly reduced by the introduction of a Vernier break that is substantially smaller than the spatial resolution of the cell. The most sensitive cells in our sample could discriminate Vernier offsets of 3-6 arc min with a reliability of approximately 70%. This was much smaller than their spatial resolution, which was in the range 25-30 arc min. We interpret these results in terms of mechanisms that could underly the orientation selectivity of cortical neurones and suggest how our results relate to human Vernier acuity.     

放线菌生物活性物质的高通量筛选

 放线菌是产生生物活性物质最多的一类微生物.最近3年,我室从云南省采集土样,分离到3000多株放线菌、真菌,选择其中2600株,进行发酵,制备成提取物,利用自建的抗氧化、抑制乙酰胆碱酶、抑制一氧化氮合成酶、AGE等模型和高通量筛选系统进行了筛选,筛选到一些值得进一步研究的菌株.对高通量筛选的有关问题及初步筛选结果进行了讨论.