抗鼠跨膜型TNF-α多克隆抗体设计和制备

目的:设计和制备区分鼠跨膜型肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和分泌型TNF-α的多克隆抗体.方法:采用抗原肽预测软件对跨膜型TNF-α表位进行预测,合成跨膜型TNF-α24个氨基酸多肽,并与匙孔碱血蓝蛋白偶联,家兔皮背部多点注射,收集分离血清,采用酶联免疫吸附试验和流式细胞术鉴定其特异性.结果:制备出高效价的抗血清,该抗血清可特异性结合免疫原多肽,不与分泌型TNF-α发生交叉反应,流式细胞术显示该抗血清可与细胞系NIH 3T3表达的跨膜型TNF-α发生特异性结合.结论:成功制备了跨膜型TNF-α特异性多克隆抗体,为区分跨膜型TNF-α和分泌型TNF-α生物学作用提供了新工具.     

细胞因子受体介导的信号转导途径研究进展

细胞对外界刺激发生生物学效应是与细胞内信号传递分不开的。细胞在生长、增殖、分化等过程中，酪氨酸蛋白激酶(Tyrosine protein kinases，TPK)具有重要的调节作用。细胞内的TPK包括两类：第一类为位于细胞质膜上的TPK，称为受体型TPK，如胰岛素受体、表皮生长因子受体，这些受体具有催化活性；第二类为位于胞浆中的TPK，称为非受体型TPK，如一些底物酶和某些原癌基因(src、yes等)编码的TPK，它们与无催化活性的受体偶联而发挥生理作用。有的细胞因子受体本身无酪氨酸激酶活性、不能依靠受体的活性而活化其它信号分子，但其胞浆存在非跨膜型蛋白酪氨酸激酶(nontransmemberane protein tyrosine kinases，NM-PTKs)介导细胞因子与其受体结合后的信号转导。     

细胞凋亡与坏死机制的研究

<正>细胞在一定的生理病理条件下或遭遇恶劣环境时,为了应对外界刺激维持自身稳态,会采用不同的细胞死亡方式应对环境变化,其中极为重要的2种细胞死亡方式——细胞凋亡和细胞坏死,细胞坏死会导致炎症反应,而凋亡不会,肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor.TNF)是一类具有多种生物效应的细胞因子,能特异性地杀伤肿瘤细胞,诱导细胞凋亡.找到调控细胞凋亡和坏死之间转换的开关具有重大的理论和临床意义,我校韩家淮教授团队项目"TNF诱导的细胞坏死分子机制的研究"发现了细胞坏死与细     

人肝癌细胞移植瘤QGY—9204中细胞凋亡和坏死并存现象的初步分析

关于细胞凋亡和坏死的判别标准及其相互关系已逐渐成为研讨的热点。研究表明，ｐ５３基因的表达导致细胞凋亡，抑制肿瘤形成。在将Ａｄ／ｐ５３导入人肝癌细胞移植瘤ＱＧＹ－９２０４的研究中发现，实验组与对照组的移植瘤中均出现凋亡特征指标（ＤＮＡ梯型条带、凋亡小体等）。而离体增养的肝癌细胞ＱＧＹ－７７０３并未检出细胞凋亡现象。那么，实体瘤的ＤＮＡ梯型条带与凋亡和坏死有何关系？研究表明，瘤体内细胞凋亡和坏死并存，     

γ—干扰素和β—肿瘤坏死因子对人肿瘤细胞株协同抗增殖作…

本文以三个人肿瘤细胞株为模型，分析了顺序、剂量和时间等因素对γ－干扰素和β－肿瘤坏死因子联合抗肿瘤细胞增殖的影响。结果表明：（１）γ－干扰素和β－肿瘤坏死因子同时处理细胞具有很好的协同抗增殖作用；（２）一个因子继以另一因子的处理效果不及双因子同时处理，以先用β－肿瘤坏死因子处理，再用γ－干扰素处理的效果相对最差；（３）抗增殖效应与处理时间和作用剂量直接相关；（４）每次１ｈ，隔日一次，每周三次的间歇     

吐温80对温热抑瘤作用的增强效应—小鼠黑色素瘤实验研究

研究吐温８０合并４１℃温热的抗肿瘤效应；方法：接种Ｂ１６黑色素瘤细胞至ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠不同部位建立荷瘤鼠模型，观察荷瘤鼠死亡率、肿瘤生长曲线、血清肿瘤坏死因子和唾液酸的变化以及经血行转移的肺部瘤灶数的变化；结果：吐温８０合并４１℃温热能明显地抑制小鼠黑色素瘤的生长，延长荷瘤小鼠平均存活时间，使肺部的转移瘤灶数大大降低。但吐温８０和温热单独作用时均无此效果。荷瘤小鼠血清肿瘤坏死因子（ｓＴＮＦ）活性和唾液酸水平均明显高于正常ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，吐温８０合并４１℃、１００ｍｉｎ温热可显著降低ｓＴＮＦ活性，并引起血清唾液酸水平的进一步升高。处理后第１０周，随着肿瘤的缩小，唾液酸水平有明显的下降。结论：吐温８０能使温热在低于临界温度时即可发挥有效的抗肿瘤效应，明显提高温热治疗的疗效和安全性，是一较理想的温热合并药物治疗方法。血清ＴＮＦ和唾液酸的变化提示协同效应可能与肿瘤抗原的暴露和机体免疫抗肿瘤作用的活化亦有关     

人淋巴瘤OCI-Ly3细胞的免疫学特性研究和小鼠模型建立

以人弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)活化B细胞(activated B-cell,ABC)型细胞株OCI-Ly3为研究对象,探索ABC型的生物学特性及肿瘤相关分子的表达,以及小鼠成瘤条件.对不同条件下培养的OCI-Ly3细胞进行对比分析,观察细胞生长形态及生物学特性;分析肿瘤相关抗原在OCI-Ly3细胞的表达情况;采用皮下和腹腔接种,在SCID小鼠中建立移植瘤动物模型.流式分析显示,体外培养的OCI-Ly3细胞对c-Met、Ki-67和survivin等细胞增殖和凋亡相关标记物具有较高的表达;SCID小鼠皮下接种107 OCILy3细胞,成瘤率87.5%;腹腔接种2×107细胞,成瘤率75%;肿瘤组织符合人DLBCL的组织学特征,且分布弥散,具有较高的侵袭性.成功构建了人ABC型DLBCL的小鼠模型,并对OCI-Ly3细胞的体外培养特性和与肿瘤发生相关的免疫标记物进行了较为系统的检测,为DLBCL的进一步研究提供了参考和工具.     

γ-干扰素和β-肿瘤坏死因子对人肿瘤细胞株协同抗增殖作用的研究

本文以三个人肿瘤细胞株为模型，分析了顺序、剂量和时间等因素对γ-干扰素和β-肿瘤坏死因子联合抗肿瘤细胞增殖的影响．结果表明：（1）γ-干扰素和β-肿瘤坏死因子同时处理细胞具有很好的协同抗增殖作用；（2）一个因子继以另一因子的处理效果不及双因子同时处理，以先用β-肿瘤坏死因子处理，再用γ-干扰素处理的效果相对最差；（3）坑增殖效应与处理时间和作用剂量直接相关；（4）每次lh，隔日一次，每周三次的间歇性处理与24h连续处理同样有效本文结果为临床设计肿瘤的治疗方案提供了一定的实验依据．     

膀胱肿瘤患者血清肿瘤坏死因子,白细胞介素2水平的测定及其意义

膀胱肿瘤患者血清肿瘤坏死因子、白细胞介素２水平的测定及其意义钟甘平秦大山陈雪红（兰州医学院第二附属医院７３００３０）肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）是单核细胞和巨噬细胞产生的一种多功能细胞因子，可以直接杀伤或抑制肿瘤细胞。白细胞介素２（ＩＬ—２）是Ｔ细胞生长...     

人肝癌细胞移植瘤QGY-9204中细胞调亡和坏死并存现象的初步分析

关于细胞调亡和坏死的判别标准及其相互关系已逐渐成为研讨的热点．研究表明,p53基因的表达导致细胞周亡,抑制肿瘤形成．在将Ad／p53导人人肝癌细胞移植瘤QGY－9204的研究中发现,实验组与对照组的移植瘤中均出现凋亡特征指标（DNA梯型条带、凋亡小体等）．而离体培养的肝癌细胞QGY－7703并未检出细胞凋亡现象．那么,实体瘤的DNA梯型条带与调亡和坏死有何关系？研究表明,瘤体内细胞阔亡和坏死并存,与对照组相比,实验组的瘤体积较小,坏死面积小,凋亡比例较高．对移植瘤QGY－9204中细胞调亡和坏死的特征及其并存现象的可能原因进行了初步分析,推断：在该移植瘤内,凋亡和坏死并非是细胞死亡的两种相互排斥的选择,它们可能相继发生和互为影响．     

干扰素的研究进展

干扰素是一类多功能细胞因子,是由哺乳动物体细胞合成与分泌的潜在的生物活性蛋白质,具有抵抗病毒感染、抑制肿瘤细胞生长与调节机体免疫功能的作用.概述了干扰素的性质、分类、生物学活性、基因结构、基因工程研究及安全性等问题.     

吐温80合并温热对小鼠黑色素瘤及主要脏器的形态学影响

研究质膜作用药物吐温８０合并温热对荷瘤鼠的抑瘤效果及主要腹部脏器的影响。方法：小鼠腹腔接种Ｂ１６黑色素瘤细胞，建立实体瘤瘤模型，经尾静脉给予吐温８０和进行腹部４１℃６０ｍｉｎ加温处理，观测荷瘤动物存活时间、实体瘤及重要脏器的光镜、超微结构和组织化学的变化。结果：吐温８０与４１℃温热合并可明显提高小鼠存活时间，可致肿瘤组织血管阻塞，肿瘤细胞广泛坏死；形态学表现与细胞凋亡的形态学描述相似。对肝、肾、脾等正常组织的结构和ＳＤＨ、５－核苷酸酶活性影响较轻，且可恢复。４１℃温热或吐温８０单独无显著作用。结论：吐温８０合并温热具有明显协同杀伤肿瘤效应，并对肿瘤显示选择性作用     

精巢间质细胞雄激素合成及其调节的研究进展

本文综述了近年来精巢间质细胞雄激素的合成及其分泌调节的研究进展。间质细胞内的雄激素合成的限速步骤是胆固醇转化为孕烯醇酮时的胆固醇跨线粒体膜转运。在此转运过程中，PBR可能是作为依赖于配体的通道蛋白，对胆固醇分子进行跨膜转移；StAR则通过解离线粒体膜与胆固醇分子的吸附作用，加速了胆固醇分子的转运。雄激素的合成还受垂体、支持细胞、巨噬细胞和其自身分泌激素和细胞因子的调控。同时对今后研究的方向做了总结和展望。     

肿瘤坏死因子与临床检测

肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)最早是从巨噬细胞中发现的仅杀伤癌细胞而不损伤正常细胞的因子,它能激活中性粒细胞并刺激其产生超氧化物,释放溶酶体酶,从而提高杀灭微生物的活性.TNF水平测定对于某些疾病的诊断、判断预后及指导用药均具有重要意义.本文就这几方面国内外研究近况综述如下:一、TNF来源、特点、生理作用TNF-α最早由Carswell等于1975年首先报道的,1984年Penica等分离表达了人的TNF-α的cDNA.目前,人们根据TNT的来源暂分为三种:一是由活化的单核或巨噬细胞分泌产生的称为TNF-α;二是由活化的T-淋巴细胞分泌产生的称为TNF-β;三是由NK细胞分泌产生的称为TNF-γ.人TNF-α是由3个分子量为17KD的单体通过1个二硫键非共价组成的,含有157个氨基酸的非糖蛋白;人TNF-β则是由171个氨基酸组成的、分子量为25KD的糖蛋白,分子内无半胱氨酸.TNF的生物学效应是:适量的TNF可调节机体的免疫及代谢功能,增强机体对入侵病原体的抵抗力,对维持机体内部的稳定状态及抵制各种致病因子的侵袭具有重要意义.但是,TNF的过量表达则与机体的炎症、感染、机体损伤等病理状态有关.TNF-α诱导的各种细胞反应是通过与细胞表面两类特异性受体相互作用而产生的,即55KD的TNF受体(TNF receptor,TNF R_1)和75KD     

人胚绒毛膜低分子组分的抗癌作用

人胚绒毛膜低分子组分的抗癌作用洪满贤，庞俊涛（生物学系）发育生物学与肿瘤分子生物学研究表明，在胚胎发生过程中存在着一类天然的内源性生理调节因子，对胚胎细胞的稳定增殖、正常分化，防止或抵抗胚胎细胞癌变起调控作用￣［１］．人胚绒毛膜是胎膜的重要部分，可分...     

溶瘤单纯疱疹病毒抗肿瘤作用及其机理研究

目前,已有溶瘤病毒在临床治疗上应用,是一种有效的癌症免疫治疗方法。近年来研究人员对单纯疱疹病毒的研究越来越广泛,尤其是Ⅰ型单纯疱疹病毒。为了探索溶瘤单纯疱疹病毒抗肿瘤作用及其机理,从单纯疱疹病毒的生物学特点,溶瘤单纯疱疹病毒的抗肿瘤机制,溶瘤单纯疱疹病毒的临床应用及其局限性等方面进行归纳整理。研究表明,溶瘤病毒通过多步法包括直接裂解肿瘤细胞,诱导细胞毒性或凋亡致敏细胞因子以及促进抗肿瘤T细胞应答来达到抗肿瘤的作用。增强溶瘤治疗期间的免疫反应可增强其抗肿瘤效果。溶瘤病毒在肿瘤治疗方面已经成为一种新兴制剂。     

TNF基因治疗肿瘤的研究进展

肿瘤坏死因子 (TNF)是一种既能直接杀死肿瘤细胞 ,又能通过激活免疫系统发挥抗肿瘤作用的细胞因子 .其基因工程药品临床应用后 ,具有严重的毒副作用 ,因此 ,人们开始了TNF基因冶疗的研究 .TNF基因治疗为TNF在肿瘤治疗中的应用开拓了新的途径     

Th17细胞与银屑病的关系的研究进展

Th17细胞是近年来发现的一种不同于Th1、Th2细胞的CD4+效应性T细胞亚群,以分泌IL-17、IL-22等细胞因子为特点,与自身免疫疾病、肿瘤及感染性疾病的发生机制紧密相关。本文就Th17细胞及其相关细胞因子在银屑病的发病机制及治疗中起的作用作一综述,期望可以增加对银屑病发生机制的认识,并为其提供新的治疗策略。     

葫芦素E对人外周血单个核细胞体外活化及细胞因子表达的影响

目的:分析葫芦素E(Cuc E)对二丁酸佛波醇酯(PDB)和离子霉素(Ion)刺激的人外周血单个核细胞(PBMC)活化及促炎因子表达的影响,探讨其潜在的抗炎效应及作用机制.方法:利用流式细胞术分析人外周血PBMC活化抗原CD69和CD25表达,用流式微球陈列检测白介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(IFN-γ)表达的变化.结果:Cuc E能明显抑制PDB和Ion刺激引起的CD3+T细胞早期活化标志分子CD69和中期活化分子CD25的表达;同时,Cuc E以剂量依赖方式抑制PDB和Ion诱导的IL-2、TNF-α和IFN-γ的表达.结论:Cuc E对人外周血CD3+T细胞的活化具有明显抑制作用,同时减少炎症相关细胞因子的表达,提示其通过对适应性免疫的调控发挥抗炎效应.     

白细胞介素24在抗肿瘤方面的应用

人类黑色素瘤分化相关基因-7/白介素-24(MDA-7/IL-24)是近年发现的具有细胞因子特性的抗肿瘤作用的基因,它能够通过膜受体或非受体介导的凋亡途径对多种肿瘤细胞产生杀伤作用,而对正常细胞没有影响.此外,IL-24还具有抑制肿瘤新生血管形成、增强放疗敏感性和免疫调节作用.作为一种具有多种抗肿瘤功能的细胞因子IL-...