由HPLC测定不同时期西红花柱头中西红花甙-Ⅱ的含量

西红花的主要药用成分是西红花甙 (Ｃｒｏｃｉｎ) ,这是一类由西红花酸 (Ｃｒｏｃｅｔｉｎ)与不同糖基结合而成的糖甙 .西红花甙 1和西红花甙 2为其中含量最高的两种主要成分 ,其余还有西红花甙 3、西红花甙 4等 .定量分析西红花甙的方法主要有 :对比法、比色法、分光光度法、薄层扫描法及高效液相色谱法等 .我们建立了一种以西红花甙 Ⅱ为对照品 ,甲醇 1 %冰醋酸 (60∶40 )为流动相的快速、灵敏的反相高效液相色谱法 ,可作为一种西红花质量考察的方法 .1　材料与方法1 .1　材料和方法1 .1 .1　高效液相色谱仪　Ｗａｔｅｒｓ 5 1 5泵 ;Ｗａ…     

西红花愈伤组织的诱导与花柱愈伤组织的继代、悬浮培养

以西红花的球茎,叶片和花柱为外植体诱导愈伤组织,叶片诱导培养形成白色膨大组织,球茎培养得到松散型白色愈伤组织,诱导球茎愈伤的培养基为5mg/L 6-BA 8mg/L NAA,在球茎愈伤组织中的紫外部分没有检测到西红花甙,西红花醛和西红花苦甙,在花柱愈伤组织中检测到西红花醛,适合于继代和悬浮培养,经悬浮培养后,在培养液中可检测到西红花醛和西红花苦甙,悬浮培养有利于次和一代谢的积。     

具钙拮抗作用西红花甙—Ⅰ的质谱分析

西红花为鸢科植物番红花 (ｃｒｏｃｕｓｓａｔｉｖｕｓ)的干燥柱头 ,又名藏红花 原产于西班牙、法国、荷兰、印度、伊朗等国家 ,后来在欧洲国家进行商业栽培 ,近年来在我国开始大规模栽培 .早在古代 ,西红花就作为香料用于食品添香和着色剂 ,具有令人愉快的特殊香气和香味 ;西红花作为药用已有悠久的历史 柱头和花柱味甘平 ,具有活血化瘀 ,散郁开结 ,对忧思郁结 ,胸膈痞闷 ,吐血 ,伤寒发狂 ,惊怖忧惚 ,妇女闭经 ,产后瘀血腹痛 ,跌扑肿痛等有治疗作用[1] 为了对其进行深入研究 ,我们对西红花中具有钙拮抗作用的主要成分西红花甙 Ⅰ的结构…     

西红花甙对缺血性脑梗塞的药效研究

西红花甙经十二指肠给药，对电凝阻断大脑脑中动脉造成的局灶性脑缺血有明显保护作用，能明显缩小脑梗塞灶，使梗塞后动物的活动行为障碍减轻，同时脑指数、ＭＤＡ含量明显降低。     

反相高效液相色谱法同时测定西红花苷Ⅰ和西红花酸

建立了反相高效液相色谱同时测定西红花苷Ⅰ和西红花酸的方法。采用C8色谱柱,流动相为甲醇水冰醋酸溶液,甲醇、水和冰醋酸比例为75∶24.5∶0.5,流速为0.6mL·min-1,检测波长为440nm,在该色谱条件下,西红花苷Ⅰ和西红花酸得到较好的分离,西红花苷Ⅰ和西红花酸浓度在0.625～40μg·mL-1范围内峰面积与进样量呈良好的线性关系,方法平均回收率为101.33%。该方法具有重复性好、准确、快速等优点,适用于西红花苷Ⅰ和西红花酸的同时测定。     

二十五味珊瑚丸中西红花苷Ⅰ&Ⅱ的含量测定研究

目的:建立高效液相色谱法测定二十五味珊瑚丸中西红花苷含量的方法。方法:采用HPLC法,色谱柱:Dionex C18柱(250mm×4.60mm,5um);流动相为甲醇-水(52:48),流速为0.8ml/min,检测波长为440nm,柱温为25℃;进样量10μl;用标准曲线法定量,测定二十五味珊瑚丸中西红花苷含量。结果:西红花苷Ⅰ在33μg～330μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),西红花苷Ⅱ在62μg～310μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为103.73%,RSD为1.68%(n=6)。结论:本方法操作简单、重现性好,可用于测定二十五味珊瑚丸中西红花苷Ⅰ&Ⅱ含量。     

二十五味珊瑚丸中西红花苷I＆Ⅱ的含量测定研究

目的：建立高效液相色谱法测定二十五味珊瑚丸中西红花苷含量的方法。方法：采用HPLC法,色谱柱：DionexC18柱（250ram×4．60mm,5um）;流动相为甲醇-水（52：48）,流速为0．8ml／min,检测波长为440nm,柱温为250C;进样量10μl;用标准曲线法定量,测定二十五味珊瑚丸中西红花苷含量。结果：西红花苷I在33μg-330μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9999）,西红花苷Ⅱ在62μg-310μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9998）,平均回收率为103．73％,RSD为1．68％（n=6）。结论：本方法操作简单、重现性好,可用于测定二十五味珊瑚丸中西红花苷I＆Ⅱ含量。     

西红花苷类成分药理作用研究概况

西红花苷类主要是指存在于西红花中的非四萜类色素,包括西红花苷-1、西红花苷-2、西红花苷-3、西红花苷-4和西红花酸.西红花苷类具有中枢降压、防治动脉粥样硬化及抗血栓,以及抗炎和治疗软组织损伤,利胆保肝、抗肿瘤等药理作用.     

坐珠达西组分的定性鉴别研究

目的:提高坐珠达西品种的质量标准.方法:采用薄层色谱法,以对照品、对照药材为对照,对藏药坐珠达西中诃子、余甘子、石榴子、安息香、木香、丁香、藏木香、藏红花、牛黄、熊胆、甘青青兰及荜茇共12味药材进行了定性鉴别,并采用HPLC法对坐珠达西味药中的西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ、绿原酸以及山奈酚,以Kromasil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)流动相甲醇-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱,流速1m L·min-1,西红花苷Ⅰ和西红花苷Ⅱ检测波长为455nm,绿原酸检测波长为352nm,山奈酚检测波长为225nm,进行定性鉴别.结果:在与对照品或对照药材相应的位置上,供试品显现相同斑点,且在HPLC中西红花苷Ⅱ对坐珠达西的质量贡献尤为明显.结论:该鉴别方法分离度良好,准确可靠,可用于藏药坐珠达西的质量标准研究.     

两种熊果甙同系物的合成及其对酪氨酸酶的影响

熊果甙作为化妆品添加剂具有增白效果,主要是由于它对皮肤酪氨酸酶有抑制作用.以葡萄糖为原料合成了两种熊果甙同系物:1 对异丙基苯基葡萄糖甙和1 对甲氧基苯基葡萄糖甙.并对其结构进行红外光谱分析.以熊果甙及上述其两种同系物为效应物,研究对酪氨酸酶酶活力的影响,以探讨抑制剂分子结构与其对酪氨酸酶抑制效果的关系.结果表明,这3种效应物对酪氨酸酶活性的抑制效果为:熊果甙>1 对异丙基苯基葡萄糖甙>1 对甲氧基苯基葡萄糖甙.     

西红花球茎组织培养的研究

以球茎切块为外植体，MS为基本培养基，0．5mg·L^-1 6-BA和2mg·L^-1 2，4-D为激素，在（20±2）℃，黑暗环境下培养，可以获得98％的愈伤组织诱导率．愈伤转入MS＋5．0mg·L^-1 6-BA＋5．0mg·L^-1 NAA培养基中，可诱导丛生芽的产生，将丛生芽切成单个不定芽后转移到MS＋4．0mg·L^-1 6-BA＋0．5mg·L^-1 NAA的培养基中，光照条件下可诱导新生小球茎的产生．     

用扣除杂交法分离藏红花苷合成相关基因的克隆

对藏红花苷合成的相关基因进行了初步分离与克隆实验研究,旨在分离与藏红花苷合成相关的特异性表达的cDNA克隆,为进一步从分子水平上研究藏红花素的合成机理奠定基础。实验采用经添加诱导子和合成前体、处于藏红花苷合成状态下的藏红花细胞和未添加诱导子和合成前体、处于生长状态的对照藏红花细胞为材料,采用扣除杂交法成功地分离到6条与藏红花苷合成相关的特异性表达的cDNA克隆。结果表明:其中一条与胡杨中由高盐环境引起的差异表达的一条mRNA的序列有较高的同源性。     

4种微肥对番红花生长、品质及产量的影响

为探明大田条件下铁、锌、锰、铜4种微量元素对番红花生长、品质及产量的影响,采用叶面喷施的方法,比较不同种类和浓度的微肥处理对番红花叶片光合特性、仔球中碳水化合物的积累及种球产量的影响。结果表明:叶面喷施适量微肥可显著提高叶片净光合速率,尤以Zn肥影响最显著,增强了叶片的“代谢源”能力; 适量喷施4种微肥均可极显著增加仔球的可溶性糖、可溶性蛋白和淀粉含量,也增强“代谢库”的功能,进而显著增加仔球产量和总数。施肥量以喷施0.20%铁、0.10%锌、0.12%锰和0.10%铜的处理效果为最佳; 但过量施用会产生负效应,抑制番红花的生长,并降低其品质和产量。     

Isolation and Characterization of Phytoene Desaturase cDNA from Stigma of Crocus sativus

Phytoene desatumse (PDS) has recently been identified as an important enzyme in carotenoid biosynthesis pathway. A cDNA clone encoding phytoene desaturase gene is isolated from stigma of saffron (Crocus sativus L. ) using RT-PCR technique. Sequence analysis shows 85% similarity to Narcissus pseudonarcissus, 79% to Zea mays, 78% to Arabidopsis thaliana, 77% to Lycopersicon esculentum. A new full-length cDNA is obtained by 5 ‘-RACE and 3‘ -RACE techniques. The cDNA is 2149bp long with an open reading frame of 1697bp, which encodes a polypeptide of 565 amino acids. Southern analy-sis shows that the PDS gene is a single copy in saffron. Northern blot analysis shows higher expression level of PDS gene in stigma and anther than in leaves and stem.     

藏红花球茎组织培养条件的研究

以藏红花球茎侧芽为外植体,通过植物组织培养的方式建立藏红花快速繁殖体系。研究表明:以MS为基本培养基,附加0.5 mg·L^-16-BA+4.0 mg·L^-12,4-D,在黑暗条件下最适于藏红花愈伤组织的诱导,并且20 d诱导率可以达到96.7 %;附加2.0 mg·L^-16-BA+0.5 mg·L^-1NAA,在黑暗条件下最适合藏红花丛生芽的诱导与增值,丛生芽诱导率可达96 %;附加5.0 mg·L^-16-BA +1.5 mg·L^-1NAA+0.3 g·L^-1AC,在1 500～2 000 lx的光照条件下,30 d左右新生小球茎诱导率高达90 %。     

Cloning,expression of<Emphasis Type="Italic">Crocus sativus</Emphasis> phytoene desaturase gene and preparation of antiserum against it

A 2 149 bp full length phytoene desaturase (PDS) cDNA was first cloned from saffron (Crocus sativus L.) stigma using RT-PCR technique and a rapid amplification of cDNA end (RACE) strategy. The cDNA has an open reading frame of 1 697 bp, which encodes a polypeptide of 565 amino acids. The coding region of the cDNA was inserted into a prokaryotic expression vector pET-21a(+) and over-expressed inE. coli BL21 (DE3). The fusion proteins were found largely in an insoluble inclusion bodies. The purified fusion protein was used to immunize rabbits to obtain polyclonal antiserum with titer of 1×10⁵. Western blot analysis by using this particular antiserum showed that the higher expression level of PDS in mature stigma than in leaves and stamen, and the higher expression level of PDS in mature stigma than in young stigma. Foundation item: Supported by the Doctoral Foundation of the Ministry of Education, P. R. China and the Young Science Foundation of Sichuan University (Grant 0020405505012) Biography: Bai Jie (1968-), female, Ph. D candidate, research direction: plant developmental biology and reproductive engineering.     

番红花不育现象的观察

通过对北京地区栽培的番红花生殖器官的观察,发现它的雌配子体发育正常,花粉能在柱头上萌发,只因花粉管不能伸入到花柱和子房而不能受精。     

高温固相法制备Sm2O3掺杂La2Ce2O7热障涂层材料

以La2 O3、CeO2和Sm2 O3为原料,采用高温固相反应法制备了Sm2 O3部分掺杂La2 Ce2 O7热障涂层陶瓷材料,其化学式为(SmxLa1-x)2Ce2O7.采用X射线衍射法研究了试样的物相结构,并通过对比各实验条件下制备的试样的X射线衍射图谱,对试样的掺杂比例、烧制温度及烧制时间进行了探究.结果表明,所制备试样为萤石结构,当掺杂摩尔比Sm：La为1：2或1：3时试样均能保持良好的相结构,以掺杂摩尔比Sm：La=1：2制备的( Sm0.33 La0.67)2 Ce2 O7材料在1600℃下具有良好的相稳定性,且其最佳制备条件为1550℃下烧制10 h,该材料是一种很有潜力的新型热障涂层陶瓷材料.     

西红花酸合成酶（7，8-二加氧酶）片段的克隆及在大肠杆菌中的表达与检测

根据已发表西红花酸合成酶（7,8-二加氧酶）基因序列设计PCR特异性引物,从西红花柱头总RNA中扩增并克隆到一段长为1.2 kb的片段.测序结果表明该片段含有两个序列.一个与已知西红花酸合成酶基因序列高度同源(同源性99％),命名为CsZCD;另一个的同源性为96%,命名为CsZCD-NEW.将CsZCD-NEW片段克隆到表达载体pQE31上,得到重组质粒CsZCD-NEW-pQE31.经IPTG诱导,重组质粒在E.coli M15中表达.