卵泡刺激素促进卵巢颗粒细胞增殖分化的信号通路的研究进展

卵泡刺激素（FSH）是一种垂体前叶合成和分泌的糖蛋白激素,是卵巢发育的重要激素,可与卵巢颗粒细胞膜上的特异性受体结合从而促进细胞的增殖分化,激活细胞内芳香化酶生成雌激素和孕激素。FSH在卵巢颗粒细胞中主要依靠cAMP—PKA信号通路促进细胞增殖,同时也发生多种信号通路,ERK1／2、ERK5、p38MAPK、P13K／Akt、VEGF均参与FSH促进卵巢颗粒细胞的增殖分化;它们之间相互作用促进卵巢颗粒细胞的增殖。     

脑疏宁对缺血性脑卒中神经再生作用的研究

中药脑疏宁是基于中风本虚标实、气血亏虚、痰瘀闭阻的病因确立的活血、利水、通腑、调气的临床经验方,已有研究表明其在大鼠MCAO模型和TBI模型中具有改善脑损伤的作用,但在体外细胞实验上鲜有研究。应用体外分离培养大鼠神经干细胞,探讨脑疏宁对神经干细胞增殖的影响及其相关作用机制。本文采用WST-1法测定经不同浓度(21.4 mg/mL、2.14 mg/mL、214μg/mL、21.4μg/mL、2.14μg/mL、0)脑疏宁分别处理神经干细胞24 h和48 h后,其对细胞增殖的影响;利用U0126建立MAPK/ERK信号通路阻断模型,WST-1法检测脑疏宁对该阻断模型的作用; Western blot法检测脑疏宁处理后细胞中p-ERK1/2蛋白的表达情况。结果表明,与对照组相比,一定浓度范围内的脑疏宁可以显著促进神经干细胞的增殖(P0.05),与浓度呈依赖关系,但高浓度脑疏宁抑制干细胞增殖并使细胞死亡。WST-1结果显示,脑疏宁可以使MAPK/ERK信号通路阻断模型组的干细胞增殖,但其增殖结果不显著。Western blot结果显示,脑疏宁能显著上调MAPK/ERK信号通路中p-ERK1/2的表达,促进ERK1/2磷酸化。适宜浓度的中药脑疏宁可以促进体外培养的神经干细胞增殖,其机制可能与促进MAPK/ERK信号通路中ERK1/2的磷酸化有关。     

五味子中残留农药对卵巢颗粒细胞的毒性研究

探讨五味子中残留农药对卵巢颗粒细胞的毒性作用.MTT法测定农药提取物作用于卵巢颗粒细胞24、48、72 h后的细胞增殖情况;Western blot法检测农药提取物对卵巢颗粒细胞MAPK信号通路的ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达水平的影响.MTT结果显示农药提取物能够显著促进卵巢颗粒细胞增殖,48 h增殖率最高(P0.01),Western blot结果显示提取物能够促进ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达,与阴性对照组相比差异极显著(P0.01).因此农药提取物作用于体外培养的卵巢颗粒细胞能够显著促进细胞增殖,通过促进MAPK信号通路的ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达,对颗粒细胞产生毒性作用.     

Ezrin蛋白对施旺细胞增殖和迁移的影响

施旺细胞参与髓鞘的形成与神经损伤后再生，涉及细胞的增殖和迁移能力。Ezrin蛋白对施旺细胞增殖和迁移的调控机制尚不明确。本文在RSC96细胞中对Ezrin基因干扰和过表达，结合qRT-PCR技术、MMT法、western印迹法和细胞划痕实验，检测Ezrin表达量的变化对RSC96细胞增殖和迁移能力的影响。结果显示Ezrin表达下调能够显著抑制RSC96细胞的增殖和迁移能力，过表达Ezrin则不影响RSC96细胞增殖能力但明显提高其迁移能力。此外，利用Y27632抑制剂降低Ezrin的Thr567磷酸化水平，同样不影响RSC96细胞增殖，但显著抑制其迁移能力。另外，Ezrin表达下调或降低Ezrin的Thr567磷酸化，能抑制PI3K、Akt及ERK的活性。以上结果提示，Ezrin活化激活PI3K/Akt与MAPK/ERK信号通路，对施旺细胞增殖和迁移能力具有促进作用。     

无机离子,蛋白质以及精清对番鸭（Cairina moschata）精子活力的影响

本文研究了K~+、Mg~(2+)、Ca~(2+)、Cl~-等无机离子、卵清白蛋白、血清白蛋白等蛋白质以及番鸭精清对精子活力的影响,研究结果表明,稀释液中,缺少K~+时,精子很快失去活力;K~+浓度为10或20mmol/L时,精子活力最高,K~+浓度增至40mmol/L时,精子活力降低;稀释液中Ca~(2+)浓度为1或3.5 mmol/L时,精子活力明显提高;稀释液中Mg~(2+)浓度在0～4mmol/L之间变化时,对精子活力无明显影响,但浓度大于10mmol/L时,精子活力明显下降;高浓度Cl~-对精子保存不利,精清以及血清白蛋白能消除由于洗涤而造成的精子粘附现象,提高精子活力,稀释液中精清所占比例较低时,有利于精子保存。     

ERK信号转导通路在PDGF诱导的人动脉平滑肌细胞增殖中的作用

了解ERK信号转导通路在PDGF诱导的人动脉平滑肌细胞增殖中的作用.原代培养人脐动脉平滑肌细胞（hUASMC）,取生长正常的细胞分4组：对照组,PDGF（platelet derived growth factor）组,ERK阻断剂组和PDGF＋ERK阻断剂组.继续培养24h后,用免疫细胞化学技术测细胞核内核增殖抗原（PCNA）的表达;用MTT法测细胞的增殖活性.结果显示：1）与对照组相比,PDGF组细胞内PCNA 的表达明显增强,MTT法测得A值也升高（P〈0.01）.2）ERK阻断剂可完全抑制PDGF诱导的PCNA 的表达增多和A值的升高.结论：ERK信号转导通路参与了PDGF诱导的人动脉平滑肌细胞的增殖.     

RASA1通过调控Ras-MAPK通路抑制滋养细胞的增殖迁移功能

目的:探索RASA1对滋养细胞HTR-8/Svneo功能的调控作用及机制.方法:收集不明原因复发性流产(URSA)患者胚胎绒毛组织.Western blot检测绒毛组织及HTR-8/Svneo细胞中RASA1表达水平,以及Ras-MAPK通路中关键蛋白Ras活化和p38 MAPK磷酸化水平.CCK-8及划痕实验检测HTR-8/SVneo细胞的增殖及迁移能力.结果:RASA1在URSA患者绒毛组织中显著高表达;RASA1高表达可以下调HTR-8/SVneo细胞Ras活化及p38 MAPK磷酸化;RASA1高表达可以抑制HTR-8/SVneo细胞的增殖及迁移能力.P38/MAPK抑制剂SB203580对RASA1下调激活Ras-MAPK通路及HTR-8/SVneo细胞增殖迁移具有逆转作用.结论:RASA1在URSA患者绒毛组织中表达增高.HTR-8/SVneo细胞中,RASA1通过调控Ras-MAPK通路进而抑制细胞的增殖迁移能力.     

10-HDA对原代培养大鼠海马神经元增殖的研究

研究10-HDA对原代培养新生大鼠海马神经元的增殖效果.原代培养24 h的新生大鼠海马神经元,通过添加不同浓度的10-HDA(0.1 μmol/L、1.0 μmol/L、10 μmol/L)作用后,利用BrdU免疫荧光染色检测神经细胞增殖,尼氏染色观察神经元数量的变化.结果显示中剂量浓度(1.0 μmol/L)的10-HDA作用海马神经元24h后,细胞数量明显增多;而高浓度(10 μmol/L)10-HDA作用海马神经元24 h后,细胞数量明显低于正常对照组和低剂量组(0.1 μmol/L).BrdU免疫荧光染色表明,中剂量浓度的10-HDA可使细胞增殖,增殖率达到(19.37±2.192 1)%.尼氏染色结果表明,10-HDA使海马神经元数量增加了(20.31±4.086 5)%.研究结果表明,10-HDA对原代培养的海马神经元有增殖作用.     

葡萄糖对原代培养大鼠前体脂肪细胞增殖分化的影响

对分离自20日龄雄性SD大鼠附睾和肾周白色脂肪组织的前体脂肪细胞进行原代培养,采用MTT比色法、油红O染色提取法分别测定5～25mmol/L浓度葡萄糖对其增殖和分化的影响.结果显示,高浓度葡萄糖能有效促进大鼠前体脂肪细胞的增殖和分化(P0.05),并以15mmol/L浓度和20mmol/L浓度分别对增殖和分化的促进作用最强.     

培养基类型、环境因子和激素对发菜细胞增殖的影响

为探讨发菜（Nostoc flagelliforme）生长增殖所需的适宜条件,研究了培养基类型、pH值、温度、光周期、光照强度和激素等对发菜细胞生长增殖的影响.结果表明,发菜细胞在BG11培养基中的增殖情况好于在BG110,MS,土壤浸提液（SEL）和自制培养基（ZZ）中的增殖情况.在BG11培养基中,当pH值为7.5,温度为25℃,光周期为12 h光照12 h黑暗,光照强度为2 000 lx时,发菜细胞增殖明显.此外,分别附加2.0 mg/L NAA,1.0 mg/L 6-BA和2.0 mg/L 2,4-D对发菜细胞增殖有一定的促进作用.     

维甲酸对胎儿动脉导管和动脉平滑肌细胞的增殖及信号传导通路的影响

目的研究维甲酸在体外对胎儿动脉导管、主动脉及肺动脉平滑肌细胞的增殖活性和其相应的细胞信号传导通路—ERK1/2细胞信号传导通路的影响。方法6例经水囊引产后的胎儿动脉导管、主动脉及肺动脉平滑肌细胞经原代培养及传代培养(5代以内),通过免疫组织化学方法和ELISA方法检测维甲酸对细胞增殖核抗原的表达和ERK1/2细胞信号传导通路的OD值,并与对照组进行比较。结果①胎儿动脉导管平滑肌细胞:维甲酸组PCNA表达升高,同时伴有ERK1/2的OD值升高。②主动脉平滑肌细胞:维甲酸组PCNA表达降低,同时伴有ERK1/2的OD值降低。③肺动脉平滑肌细胞:维甲酸组PCNA和ERK1/2的OD值与对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。结论不同来源的平滑肌细胞有着不同的生物学特性,对维甲酸的反应截然不同。     

新型tacrine双联体对培养大鼠海马神经元NMDA受体作用位点的研究

目的：研究新型tacrine双联体bis（7）-tacrine对NMDA受体的作用位点.方法：大鼠海马神经元原代培养,全细胞膜片钳记录培养大鼠海马神经元上NMDA激活电流变化.结果：细胞外液pH值从8.1改变到6.7,在细胞外液中加入二硫苏糖醇（2 mmol/L）、精胺（10 mol/L）、镁离子（50～500 mol...     

氰戊菊酯对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响

通过加入PD98059(细胞外信号调节激酶阻断剂)后探讨氰戊菊酯诱导乳腺癌细胞增殖的作用机制.观察加入PD98059前后氰戊菊酯诱导的细胞增殖情况,采用MTT法,流式细胞仪测定周期法,流式细胞仪法观察ERα蛋白、ERK蛋白和p-ERK1/2蛋白表达情况.氰戊菊酯能够明显升高MCF-7细胞的S期细胞数,作用程度与雌二醇相似,并且通过降低ERα蛋白表达量,升高p-ERK蛋白表达量促进MCF-7细胞的增殖;加入PD98059后,S期细胞比例降低,ERα蛋白表达量升高,p-ERK蛋白表达量降低,MCF-7细胞的增殖降低.氰戊菊酯通过ERK细胞信号转导通路发挥促细胞增殖作用.     

MAPK信号转导通路与HCMV感染

MAPK信号转导通路参与了HCMV的感染过程.MAPK通路中的ERK和p38通路在HCMV复制周期中起重要作用,它通过磷酸化转录因子引起病毒及宿主相关基因的转录,从而调控HCMV的复制.HCMV的包膜糖蛋白及其他多种基因表达产物可通过不同的机制以一定时序激活MAPK通路,调节自身及宿主细胞相应基因表达,以利于病毒完成其生活周期,并参与病毒的致病过程.深入研究MAPK信号转导通路与HCMV感染的关系可为治疗HCMV感染引起的疾病提供新的治疗靶点.     

雌二醇强化壬基酚雄性毒性机理研究

为了揭示壬基酚进入生物体内后对雄性的毒性作用机制,以典型天然激素雌二醇(E2)为代表,以大鼠睾丸支持细胞为对象,研究了壬基酚与E2共存时对雄性生殖细胞的毒性并考察了其作用机理.研究结果表明,壬基酚与E2均能促进睾丸支持细胞增殖,表现出较强的雄性毒性,混合后呈现明显的强化效应,比二者单独作用高.对细胞中特征蛋白-波形蛋白的检测发现,E2不影响波形蛋白的表达,壬基酚可提高其表达,而混合物可明显提高其表达.机理分析表明,在丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的3条通路中,ERK通路是E2强化壬基酚毒性的关键通路.壬基酚降低ERK蛋白的表达,E2轻微降低ERK蛋白的表达,混合后反而诱导ERK蛋白的表达.壬基酚能够显著诱导p-JNK蛋白、p38蛋白的表达,但与E2混合后,诱导作用减弱.转录因子分析表明,由于ERK通路被激活,壬基酚和E2混合物可极大地强化转录因子c-Myc蛋白和cyclinD1蛋白的表达.     

Apelin-13通过ERK_(1/2)信号通路促进MCF-7细胞的增殖及侵袭

采用MTT、Brdu流式细胞术,Transwell侵袭实验,ElISA、Western blot检测实验研究了apelin-13对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭的影响.结果表明:apelin-13能够激活ERK1/2信号传导通路,上调Cyclin D1和MMP-1的表达,进而促进MCF-7细胞的增殖及侵袭,可为临床乳腺癌的诊断、防治及愈后评估提供新的思路和方法.     

ATX在LPC诱导胃癌细胞增殖与迁移中的作用

利用免疫组化技术研究ATX在胃癌及正常人胃粘膜组织之间表达的差异,Western Blot法检测ATX表达及ERK磷酸化,MTT法测定细胞增殖,Boyden chamber法测定细胞迁移.结果显示:ATX在正常胃粘膜组织、癌旁组织及胃癌组织均有表达,胃癌细胞BGC-803中有表达;ATX具有溶血磷脂酶D活性,能将LPC水解为LPA,并以LPA受体介导信号通路促进胃癌细胞的增殖和迁移作用.由此得出LPC是通过LPC-Autotaxin-LPA-LPA1/3-Gi-ERK信号通路诱导胃癌细胞增殖与迁移.ATX/LPA通路在胃癌治疗中也是一个潜在的靶位点.     

ERK通路对TGF-β1介导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用

为研究不同浓度TGF-β1、不同作用时间对体外培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响,并在此基础上探讨ERK信号转导通路在TGF-β1介导的大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用.取大鼠胸主动脉,用贴块法进行原代培养,取3～5代细胞.分别施加不同浓度TGF-β1(0、0.01、0.1、1、10ng/mL)作用24h和10ng/mL TGF-β1作用不同的时间(0、8、12、16、20、24h),用MTT法测定各组细胞吸光值,确定TGF-β1作用浓度和时间.再取生长正常的细胞,分四组:对照组,TGF-β1组,ERK阻断剂组和 TGF-β1 ERK阻断剂组.继续培养24h后,用MTT法测细胞的增殖活性.TGF-β1浓度≥1 ng/mL作用24h时吸光值明显低于对照组(P＜0.05),10ng/mL TGF-β1作用时间≥12h时吸光值明显低于对照组(P＜0.05),10ng/mL TCF-β1作用时间≥12h时吸光值明显低于对照组(P＜0.05);与对照组相比,其他三组吸光值均明显降低(P＜0.05),ERK阻断剂组吸光值低于TGF-β1组(P＜0.0 5).TGF-β1呈浓度依赖和时间依赖方式抑制体外培养的血管平滑肌细胞的增殖,ERK信号转导通路可能不参与TGF-β1介导的大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用.     

盐胁迫条件下钙对小麦根细胞膜电位和钾离子吸收的影响

小麦根细胞质膜电位变化可调控质膜钾离子通道的开闭；用100mol/L的NaCl处理可以引起小麦根毛细胞膜电位降低（去极化），并伴随有根细胞的钾离子含量降低，质膜的MDA含量和细胞渗漏增加；10mmol/L的CaCl2可以稳定根细胞膜电位，抑制aCl引起的细胞膜电位的降低，促进根对钾离子的累，减少细胞质膜渗漏和降低MDA的含量，从而缓解NaCl胁迫伤害，增强植物的抗盐能力。     

“绞股兰”对提高机体运动能力的研究

本文研究结果表明,绞股兰与人参有三种相同的皂苷;绞股兰皂苷对牛血红细胞膜(Na~+—K~+)ATP酶有激活作用;绞股兰具有抗疲劳作用。