海洋假单胞菌SB12产表面活性剂的研究

从汕头湾海底沉积物中分离到24株表面活性剂产生菌,对其中一株产生物表面活性剂能力最强的菌株(SB12)进行鉴定、发酵条件优化及生物表面活性剂特性的初步研究.经鉴定,确定该菌株为假单胞菌(Pseudomonas sp.).对其产生物表面活性剂的发酵条件进行优化,确定了最佳单因子发酵条件:氮源为蛋白胨,盐浓度为0.1%,pH 9.5,温度为25℃,培养时间为6 d;优化后的最小表面张力为19.77 mN/m.分析发酵液中生物表面活性剂的特性发现:菌株SB12产生的生物表面活性剂具有良好的乳化性能,乳化力达91%;产生的生物表面活性剂具有较广的温度和pH适应范围.     

生物表面活性剂产生菌的筛选及培养条件优化

采集加油站、汽车修理厂等处长期被石油污染的土壤,经富集培养、蓝色凝胶平板筛选和发酵液排油圈测定等方法,筛选出8株具有较强产生物表面活性剂能力的菌株。其中菌株BS-4产生物表面活性剂的能力最强,该菌发醉液的排油圈直径达到6.5 cm。通过正交试验对该菌的培养基条件进行初步优化,结果以菜油含量为2%,硝酸钠含量为1.5%,接种量为3%,发酵时间为72 h为最佳。     

一株高效生物表面活性剂产生菌的分离、鉴定及培养条件的优化

以市政污水处理厂剩余活性污泥作为菌种来源,经过培养分离、筛选,得到一株高效生物表面活性剂产生菌X1A-2.经形态学与16SrDNA鉴定,X1A-2菌株属于戈登氏菌属.菌株X1A-2产生物表面活性剂的环境影响因素研究结果表明:菌株在发酵培养14h后达到稳定状态,发酵液表面张力降低至33.0mN/m;在较大的培养条件范围内,发酵液的表面张力均可显著降低;石油烃类碳源的存在对其产生物表面活性剂的影响甚微.在模拟石油污染的最优培养条件下,菌株能够长期保持活性,所产生物表面活性剂可使以石油为碳源的发酵液表面张力保持在35mN/m以下.研究结果表明,X1A-2是一株高效生物表面活性剂产生菌,在实际海洋石油污染的生物修复方面具有很好的应用前景.     

2-酮基-D-葡萄糖酸产生菌Ac9抗噬菌体菌株的选育

以2-酮基-D-葡萄糖酸产生菌Ac9为出发菌株,采用紫外线诱变与添加噬菌体进行筛选相结合的方法,获得了两株抗性菌株Au4-2和Af3.在种子培养基中含有噬菌体的条件下,31℃,摇瓶培养24 h,抗性菌株Au4-2与Af3的菌体生长光密度值OD650×20分别为0.74,0.55.镜检显示菌体量多,呈短杆状;而对照菌株Ac9的菌体光密度值则为0.14,镜检显示菌体量少,呈球状.在发酵培养基中添加噬菌体的条件下,31℃,摇瓶培养72 h,抗性菌株Au4-2与Af3 产酸分别可达15.45 g/100 mL,14.55 g/100 mL;而对照菌株则几乎没有产酸.     

云芝产漆酶发酵条件的研究

研究了培养基初始pH值、通气量、温度、表面活性剂、诱导剂、金属离子对云芝(Trametes versicolor)HS-03产漆酶发酵条件的影响.研究发现培养基的初始pH、培养温度、表面活性剂、诱导剂和金属离子等因子对该菌漆酶产量均有明显的影响.结果表明,云芝摇瓶产漆酶的最佳培养条件为培养基初始pH为3.5,转速150 r/min,培养温度28℃,另加1 mL/L吐温-80,1 mL/L愈创木酚,终浓度为0.5 mmol/L的Cu2 .在该条件下,该菌的漆酶酶活力达到291 U/L,比优化前提高了8倍,同时产酶高锋也提前了5 d.     

光合细菌中番茄红素的研究

番茄红素是一种具有多种生理功能的类胡萝卜素,通常从番茄的果实中提取,价格昂贵.一些光合细菌也可以产番茄红素,从而使得利用微生物发酵法生产低成本番茄红素成为可能.本文通过正交实验等方法研究了1株紫色非硫细菌7-1的生长及产番茄红素的最佳培养条件.在以0.4％的乳酸钠为碳源,0.05％的谷氨酰胺为氮源,Mg2+10ppm,并添加0.1％的酵母粉作为生长因子的改良RCVBN培养基中,7-1菌发酵液在72 h内菌浓度可达5.08×1010个/mL,紫外吸收光谱表明细胞内番茄红素的含量明显提高,高效液相色谱法测定出细胞内番茄红素的含量为398.7mg/100 g菌体干重.     

絮凝剂产生菌克雷伯氏杆菌的筛选、鉴定及培养条件优化

采用常规细菌分离方法从木薯淀粉黄浆废水中筛选得到一株微生物絮凝剂产生菌,编号为M2。经过形态学特征、生理生化反应试验和16S rDNA基因序列分析鉴定该菌株为克雷伯氏杆菌,命名为Klebsiella sp.M2。通过单因素实验对菌株M2培养条件进行优化,结果表明最佳培养基种类、培养基初始pH值、培养温度及摇床转速分别为查氏培养基、5、30℃及150r/min。与大部分微生物絮凝剂产生菌上清液表现出絮凝性不同,菌株M2的菌体本身表现出絮凝活性;经过使用超声波破碎仪证明菌体本身具有絮凝活性,最佳絮凝率达到93.20%,具有易于运输、便于使用的优点。菌株M2在以蔗糖作为碳源、KNO3作为氮源的情况下絮凝活性最好。     

磷矿分解菌DPB5液体培养条件研究

利用单因素筛选和正交试验对磷矿分解菌DPB5发酵生产活菌体的液体培养基和发酵条件进行了研究,通过单因素实验筛选出一些适合磷矿分解菌生长的碳源、氮源、温度、初始pH、转速;并在此基础上进行了正交试验,结果表明碳源为土豆粉、氮源为酵母膏、初始pH为6.5、转速为240r/min、温度为40℃的培养条件下培养16h,600nm吸光度达到2.079.用最佳培养条件绘制了磷矿分解菌DPB5的生长曲线,发现培养12h左右最适合用于生物有机肥配制.     

生物表面活性剂产生菌的发酵条件优化及其产物性能研究

对筛选出的一株能产生表面活性剂的芽胞杆菌DF-10的发酵液进行薄板层析,表明所产表面活性剂的主要成分为糖脂.确定了菌株产生表面活性剂的最适发酵培养基组成和发酵条件,并对DF-10所产表面活性剂的表面活性、乳化性能、起泡性能及其抗硬水性进行了研究.结果表明,DF-10所产表面活性剂表面活性和起泡性好,并有较强的乳化能力和抗硬水能力.     

一株耐高矿化菌株产生的表面活性剂性质的研究

为了得到耐高矿化的生物表面活性剂产生菌,采用富集培养,排油圈复筛,从高矿化油田的油水混合物中得到了一株产表面活性剂的菌株K1。通过对K1菌株形态、生理生化特征及16S rRNA基因序列分析,确定该菌为肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)。薄层色谱和红外光谱分析,初步确定该菌株产生的表面活性剂为糖脂类物质。对菌株K1所产表面活性剂在高矿化水中的乳化活性以及温度、酸碱度(pH)对表面活性剂稳定性的影响进行研究,结果显示:在高矿化条件下该生物表面活性剂可以保持较好的乳化活性,对柴油的乳化率为59.5%;具备良好的温度稳定性并可耐受90℃的高温;pH值在6.011.0之间时其活性较强。菌株K1产生的糖脂类生物表面活性剂在提高高矿化油田的原油采收率和原油污染生物修复方面具有应用的潜力。     

RL在液态培养条件及堆肥介质中的生物降解研究

为了研究生物表面活性剂的环境友好性,考察其应用于堆肥中是否会时堆肥产生二次污染,本实验自制了生物表面活性剂鼠李糖脂,考察其在液态培养条件及堆肥介质中的生物降解情况．实验结果表明：不同的微生物对鼠李糖脂有不同的降解效果,其源生菌铜绿假单胞菌没法降解鼠李糖脂,但鼠李糖脂对微生物都是无毒的．在堆肥基质中的降解表明其可以被降解,但不是优先降解物质,可见鼠李糖脂可在堆肥中起一定作用后被降解。     

杜鹃‘胭脂蜜’组织培养与快速繁殖体系

以杜鹃‘胭脂蜜’(Rhododendron obtusum ‘Yanzhimi’)的新生茎段为外植体,以WPM为基本培养基,研究不同生长调节物质对杜鹃组织培养过程中芽诱导、增殖壮苗及生根的影响.结果表明,启动培养中诱导腋芽的最佳培养基为WPM＋0.1 mg·L－1 IBA＋1 mg·L－1 ZT,腋芽平均诱导率为43.67%,增殖系数为1.18;采用NAA＋TDZ与NAA＋ZT的组合分别进行增殖壮苗培养,两种在生长及诱导情况上均呈现不同状态.在添加0.5 mg·L－1 NAA和0.1 mg·L－1 IBA的1/2WPM基本培养基上,杜鹃的生根效果最佳,生根率达82.5%.该研究为杜鹃优质种苗的繁殖与生产,杜鹃遗传转化体系的建立以及转基因育种奠定了一定基础.     

芽孢杆菌HBS-4产生的表面活性剂及其与原油相互作用研究

菌株HBS-4是从油藏分离的1株芽孢杆菌,该菌株在其代谢过程中产生脂肽和糖脂类生物表面活性物质.可将发酵液的表面张力降低到25.6 mN/m.在细菌与原油相互作用的过程中,生物表面活性剂不仅具有分散、乳化原油的作用,而且有协助细菌代谢原油的作用.实验结果表明,生物表面活性剂在pH值5～12之间保持稳定,当pH值小于5时,会逐渐失活,所以控制发酵液的pH值,有利于细菌对原油的降解.原油与细菌作用12 d后,原油的沥青质和芳烃组分被转化和降解, 相对含量分别降低了2.89%和17.39%,原油的饱和烃∑C21/∑C22 比值由开始的0.39升为1.36, 长链的饱和烃被降解为短链的饱和烃.     

除虫菊组织培养研究

本文成功地进行了除虫菊的试管繁殖。探索出除虫菊的快速繁殖方法，实验结果表明：在ＭＳ附加２ｍｇ／１ＢＡ及０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ中，下胚轴能够很好地诱导芽的产物，幼芽地此培养基中能够极快地增殖。     

一株高温产表面活性剂菌的筛选及性能评价

从油田产出水中筛选出一株能在75℃条件下产生表面活性剂的高温菌,经形态、生理生化特征及Biolog微生物自动鉴定仪鉴定,该菌为枯草芽孢杆菌.生物表面活性剂的临界胶束质量浓度CMC为130mg/L.对其激活条件进行优化,优化结果为:该菌最佳碳源、氮源和最佳盐度分别为花生油、酵母膏和质量分数0.5%的NaCl.用该菌株在模拟75℃高温油藏条件下进行物模驱油实验,结果表明:在培养10d后可提高采收率4.5%.菌株B-1在微生物采油中具有很好的应用前景.     

滇越金线莲快速繁殖技术研究

通过滇越金线莲种子无菌诱导和茎诱导芽以及丛生芽增殖、生根等试验，得出结论：滇越金线莲种子在不含激素的Hyponex 1培养基上有较好萌发率，并且在添加10％椰乳后原球茎能分化出健壮的苗。外植茎在Hyponex 1＋6-BA 1mg／L＋NAA 0．01／L培养基上诱导产生芽的几率最高；最佳增殖培养基是Hyponex 1＋BA 0．5mg／L＋NAA 0．1mg／L；生根培养基是Hyponex 1＋6-BA0．05mg／L＋NAA0．1mg／L。     

烟草的组织培养技术研究

以烟草（Nicotiana tabacum L.）幼嫩叶片、茎段和带有叶片的茎段为外植体,对其进行组织培养研究.结果表明：烟草组织在MS＋0.1mg·L^-16-BA＋0.5mg·L^-1NAA的培养基中能诱导形成不定芽和根;在MS＋0.5mg·L^-16-BA＋0.1mg·L^-1NAA的培养基和MS＋0.5 mg·L^-16-BA＋0.5 mg·L^-1NAA的培养基中能脱分化形成愈伤组织,但只能诱导形成不定芽;带有叶片的茎段最容易诱导形成愈伤组织.     

丹参茎尖培养与快速繁殖

比较了不同种类、不同浓度和不同配比的外源激素对丹参茎尖培养的作用，建立了丹参快速繁殖的方法．结果表明：在MS培养基中，1.0mg／L BA和0.1mg／L NAA配合使用时茎尖的生长状况最好，茎尖的成活率高达91.4％；GA对茎尖分化有抑制作用；附加1.0mg／L BA时芽的增殖效果最好；附加0.5mg／L IAA有很好的诱导生根的作用，而且可以缩短生根周期．     

红头兰(Tuberolabium quisumbingii)胚培养和快速繁殖

以红头兰的胚为材料,研究了红头兰的胚培养和快速繁殖技术.结果表明:培养基中无机盐的浓度和激素影响胚的萌发,在1/4MS培养基加入0.5mg/L的KT效果最佳;培养基中加入椰子水、土豆提取物、蛋白胨和活性炭均有利于胚的萌发;在继代培养中,适宜的培养基为1/3MS+6-BA2mg/L+NAA0.01mg/L+椰子水10%+蛋白胨2g/L+活性炭2g/L+蔗糖20g/L+琼脂7g/L;分化和壮苗培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA0.5mg/L+蔗糖20.0g/L+AC2.0g/L+蛋白胨2.0g/L+琼脂7g/L。     

野百合的组织培养研究

对采自大量子河森林公园的野百合进行鳞片诱导和快速繁殖组织培养研究.结果表明:鳞片下部可直接诱导生芽、生根,是初代培养的最佳外植体;6-BA浓度为0.5mg/L,NAA浓度分别为0.05mg/L,L和0.1mg/L有较高的芽诱导率;在NAA:6-BA=1:20的培养基中愈伤组织诱导结果较好;诱导鳞片生根的6-BA浓度不宜过高,0.5mg/L较适宜生根;鳞片凹面接触培养基仅有愈伤组织形成,凸面接触培养基可产生鳞芽;用低浓度(0.1mg/L～0.5mg/L)IAA诱导生根效果比NAA好;以1/2锯末+1/2洁净河沙为栽培基质的移栽苗长势最好.