大鼠脊髓楔型半切空洞模型的建立及评估

摘要: 目的建立一种新型大鼠脊髓半切模型,为临床脊髓空洞损伤研究提供适宜的动物模型。方法25 只SD 大鼠随机分为脊髓楔型块状半切组( A 组,n = 10) 、假手术组( B 组,n = 10) 和正常对照组( C 组,n = 5) 。术后采用 BBB 运动功能评分、斜板试验、HE 染色和核磁共振( MRI) 检测综合评价脊髓半切模型的稳定性。结果术后A 组 大鼠伤侧后肢BBB 运动功能评分及斜板维持最大角度值显著低于B 组和C 组( P ＜ 0. 05) ,而这些指标在B 组和C 组之间没有明显差异; 术后28 d HE 和MRI 检测显示脊髓损伤区( A 组) 灰质和白质发生明显的形态学改变。结论 通过该方法建立的脊髓半切模型稳定、可靠,适于脊髓空洞性损伤的研究。     

骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤大鼠功能和结构修复的实验研究

观察骨髓间克质干细胞（MSC）移植对脊髓中度损伤大鼠运动功能的修复作用。方法：20只成年Sprague—Dawley（SD）大鼠随机移植组（n=10）和对照组（n=10）两组,均采用改良的A11en’s打击法遣成脊髓中度损伤（致伤冲量10g×4cm）。伤后1周,移植组于伤处移植大鼠MSC,而对照组仅注射等量PBS。分别于移植后1天,1周,2周,3周、4周用BBB评分观测大鼠的运动功能,并于移植后4周进行损伤脊髓的大体观察和组织学检测。结果：移植后1周两组动物运动功能恢复无明显差异。移植后2周、3周、4周,与对照组比较,移植组显著提高运动功能。移植后4周,移植组损伤脊髓的结构修复明显优于对照组。结论;脊髓损伤大鼠经MSC移植后能明显改善其运动功能和神经形态,MSC移植对脊髓损伤大鼠有治疗作用。     

BMP7治疗大鼠脊髓损伤后NF200及GFAP表达的变化

目的探索BMP7促进大鼠急性脊髓损伤后运动功能恢复的作用,进一步研究BMP7对脊髓损伤处NF200及GFAP蛋白表达量的影响。方法实验用Wistar大鼠随机分为对照组和BMP7实验组,使用Allences's打击器建立大鼠T10节段脊髓损伤模型,BMP7实验组大鼠造模成功后连续7 d于脊髓损伤处注射50 ng BMP7,对照组造模成功后连续7 d于脊髓损伤处注射等体积的0.9%氯化钠注射液。2组大鼠分别于术后6 h、3 d、1 w、2 w、4 w、8 w进行BBB评分检测大鼠脊髓损伤后运动功能恢复情况,进行免疫组化实验检测损伤节段脊髓组织中NF200及GFAP蛋白表达量的变化。结果 BBB评分结果显示在1、2、4 w及8 w时BMP7实验组大鼠BBB评分均高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);免疫组化结果表明BMP7实验组大鼠脊髓损伤处NF200阳性表达细胞数在造模3 d后逐渐增多,至第4 w时达到高峰,且在1、2、4 w及8 w时均大于对照组,差异具有统计学意义;BMP7实验组及对照组GFAP阳性表达细胞数变化均不明显,两组间阳性细胞数差异不显著。结论 BMP7可以促进大鼠急性脊髓损伤后运动功能的恢复,BMP7可以上调脊髓损伤处NF200蛋白的表达量。     

硫酸镁对大鼠继发性脊髓损伤保护作用的实验研究

为探讨硫酸镁对大鼠继发性脊髓损伤的保护作用及机制.用30只体重280±20g wister成年大白鼠随机分为三组:A组(对照组),仅行T10阶段椎板减压;B组(损伤组),C组(治疗组),均行T10阶段椎板减压和Allen's重物打击致脊髓损伤,伤后30min时B组腹腔注射蒸馏水1600mg/kg,C组腹腔注射硫酸镁1600m//kg.48h后切去伤段脊髓组织分别测定H2O、Ca2+、Mg2+离子含量,观察局部组织病理学改变,超微结构及单位面积的凋亡细胞数.结果显示跟A组比较,B、C组损伤段脊髓组织H2O、ca2+含量增多,Mg2+含量减少,组织病理学及超微结构破坏严重,凋亡细胞数升高,而且C组较B组轻.由此可知,病程早期应用硫酸镁可以减轻脊髓损伤后的继发性损伤,从而对受损脊髓起到保护作用.     

大鼠急性脊髓损伤后肝癌衍生生长因子的表达

目的:观察大鼠受损伤脊髓组织中肝癌衍生生长因子(Hepatoma-derived growthfactor,HDGF)表达的变化.方法:将40只成年大白鼠随机分成对照组(A组)和脊髓损伤组(B组),每组20只.脊髓损伤组采用改良的Allen’s打靶法制备,并于术后24 h处死大鼠,取损伤脊髓节段进行免疫组织化学染色.观察HDGF在正常对照组以及脊髓损伤后表达情况.以表达指数作为统计学指标,采用X2检验分析各组间的变化.结果:HDGF主要表达在神经细胞核中.15例损伤脊髓标本表现为HDGF表达指数为Ⅱ组,对照组中表达指数为Ⅱ组仅4只(P<0.05).结论:HDGF高表达于损伤脊髓组织中,提示HDGF可能参与脊髓损伤的修复.     

急性失血性贫血对老年大鼠认知功能的影响

目的:观察急性失血性贫血对老年大鼠认知功能的影响.方法:将22只老年wistar大鼠随机分为假失血组(A组,n=11只)和失血40%组(B组,n=11只).B组大鼠放全身血容量的40%的血并给予三倍的晶体液输注.两组大鼠术前和术后2 d后进行水迷宫实验,记录两组参考记忆和工作记忆数据.结果:A组和B组的参考记忆数据差异无统计学意义(P0.05).B组的大鼠与A组大鼠比较,工作记忆的四次潜伏期均有显著延长,差异有统计学意义(P0.05),第四次的潜伏期两组差异尤为显著(P0.01).结论:急性失血,失血达40%时对老年大鼠的学习认知功能及回忆探究能力是有抑制的.     

MicroRNA-124a对SCI继发性损伤的影响及相关机制研究

探究microRNA-124a(miR-124a)对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)继发性损伤的影响及相关机制.取90只健康成年Wistar大鼠建立SCI模型,随机分为3组,第1组术后仅注射生理盐水,为未治疗组;第2组术后注射骨髓基质细胞源神经干细胞(BMSCs-D-NSCs)治疗,为正常移植组;第3组术后注射携带miR-124a的骨髓基质细胞源神经干细胞(miR-124a-BMSCs-D-NSCs),为转染移植组.另选取60只健康成年Wistar大鼠作为对照组,仅给予假手术处理.采用HE染色观察大鼠的组织形态学变化,采用实时荧光定量PCR技术检测大鼠的miR-124a表达情况,并对损伤灶进行显微测量计算,比较脊髓功能恢复的BBB评分情况及脊髓组织损伤大小的情况.结果显示,SCI后,脊髓组织中miR-124a基因表达显著降低,脊髓神经功能也明显降低,miR-124a-BMSCs-D-NSCs能够有效地改善SCI,减少脊髓损伤组织范围及体积,还能改善中枢神经的功能.     

嗅神经鞘细胞移植恢复大鼠损伤脊髓的功能

为探讨嗅神经鞘细胞移植恢复大鼠损伤脊髓的功能 ,将成年大鼠分为脊髓半切洞损伤组 (A组 )和脊髓半切洞损伤 嗅神经鞘细胞移植组 (B)组 ,手术后应用联合行为评分 (CBS)感觉诱发电位 (SEP)和运动诱发电位 (MEP)检查 ,测定脊髓功能恢复情况 .结果 2组CBS得分 ,A组 >B组 ,SEP和MEP潜峰时均A组 >B组 ,统计学分析均有显著性差异 (P <0 0 5 ) .表明移植嗅神经鞘细胞能恢复损伤脊髓的功能     

骨髓间充质干细胞对损伤卵巢的修复作用

目的:探讨骨髓间充质干细胞移植对损伤卵巢的修复作用。方法:通过贴壁筛选法培养、纯化GFP转基因小鼠MSCs。将健康的雌性ICR小鼠(6 w)随机分为4组:正常对照组(A组,n=6)、MSCs移植组(B组,n=6)、MSCs治疗组(C组,n=6)、损伤组(D组,n=6)。B组腹腔移植MSCs,C、D组小鼠卵巢在无菌条件下,用体积分数为10%H2O2损伤卵巢建立损伤模型,24 h后C组腹腔移植MSCs,D组注射等体积的PBS。各组每周取卵巢,采用外观拍照、PCR检测GFP基因和病理切片观察MSCs是否对损伤卵巢有修复作用。结果:PCR结果表明MSCs经腹腔移植可到达正常卵巢,也可到达受损伤卵巢;C组移植MSCs后小鼠卵巢恢复的比D组快。结论:MSCs通过腹腔移植可到达卵巢,并可促进损伤卵巢的修复。     

达英-35、炔诺酮和黄体酮治疗 围绝经期异常子宫出血疗效及安全性分析

目的探讨达英-35、炔诺酮和黄体酮治疗围绝经期异常子宫出血(AUB)患者的疗效及安全性.方法将137例AUB患者随机分为达英-35组(A组,n=45)、炔诺酮组(B组,n=46)、黄体酮组(C组,n=46).3组患者均给予诊断性刮宫治疗,在此基础上,3组分别给予口服达英-35、炔诺酮、黄体酮进行治疗,连续治疗3个疗程.比较分析3组患者的临床疗效、子宫内膜和性激素水平变化、不良反应.结果治疗结束后,A组总有效率为95.6%,显著高于C组(82.6%,χ~2=3.90,P0.05).B组与A组、C组总有效率比较差异均无统计学意义(χ~2=0.19,2.58,P0.05).治疗后,A组、B组子宫内膜厚度均较C组明显降低(P0.05).A组、B组治疗后子宫内膜厚度比较差异均无统计学意义(P0.05).治疗后,各组FSH,LH及E2水平均明显下降,A组、B组下降幅度明显高于C组(P0.05).A组、B组治疗后性激素水平比较差异均无统计学意义(P0.05).A组、B组、C组不良反应的发生率分别为11.1%,15.2%,17.4%,差异无统计学意义(χ~2=0.74,P0.05).A组1 a复发率为4.4%,显著低于C组复发率(17.4%,χ~2=3.98,P0.05).结论达英-35、炔诺酮治疗AUB具有更好的疗效与安全性,尤其是达英-35在缩短阴道流血时间、改善子宫内膜增生及内分泌环境、调节内分泌激素、减少复发等方面具有明显的优势.