人组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）在大肠杆菌中的表达、复性及分离纯化

人组织型纤溶酶原激活剂（ｔ—ＰＡ）。ＤＮＡ重组在表达质粒ｐＤＲ７２０中，在Ｅ．ｃｏｌｉＣ６００中获得了表达，表达水平为２％．以醋酸钟显色ＰＡＧＥ凝胶回收ｔ—ＰＡ表达条带，进行复性处理．Ｒ性产物经Ｂｅｎｚａｍｉｄｉｎｅ—Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ，Ｌｙｓｉｎｅ—Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，纯化得到ＳＤＳ—ＰＡＧＥ银染一条带纯度，比活为为４，０００ｍｏｌ／ｓ·ｇ的人ｔ—ＰＡ．     

鱼抗冻蛋白在E.coli和Yeast中高效表达的理论初探

按照Ｅ．ｃｏｌｉ和Ｙｅａｓｔ甚高表达基因中的同义密码子使用、碱基构成和密码子之间的碱基关联的ＥＥＮＳ模式，对鱼抗冻蛋白基因ＡＦＰＩＩＡ７进行了改造，理论上使得ＡＦＰＩＩＡ７基因在Ｅ．ｃｏｌｉ和Ｙｅａｓｔ中的表达水平有了非常显著的提高．未改造的ＡＦＰＩＩＡ７基因在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达，其表达水平为ＣＡＩ＝０．４１１，ＣＥＩ＝３．２４０是较低表达水平的基因，估计值在１０～１０３ｍｏｌ／ｃｅｌｌ之间．经改造后，其表达水平变成甚高表达基因ＣＡＩ＝０．８６８，ＣＥＩ＝５．９７８，估计值在１０４～１０５ｍｏｌ／ｃｅｌｌ之间．在Ｙｅａｓｔ中表达，未改造的ＡＦＰＩＩＡ７基因的表达水平为ＣＡＩ＝０．３５９，ＣＥＩ＝５．８８０，也是较低表达基因．经改造后，此基因为Ｙｅａｓｔ的高表达基囚，ＣＡＩ＝０．７０３，ＣＥＩ＝１１．６６８．本文的方法为异质基因获得高效表达提供了一种理论途径．     

人工繁殖恒河猴血清酯酶、乳酸脱氢酶、淀粉酶、碱性磷酸酶生化位点遗传多态性研究

本文采用聚丙烯酰胺不连续垂直凝胶电泳方法研究了人工饲养恒河猴（Ｍａｃａｃａｍｕｌａｔｔａ）的血清乳酸脱氢酶（ＬＤＨ），醋酶（Ｅｓ），碱性磷酸酶（ＡＫＰ），淀粉酶（Ａｍｙ）等生化位点多态性的分布，结果表明，四种同工酶生化基因位点均具有遗传多态性。ＬＤＨ多态性表现在ＬＤＨ４和ＬＤＨ５有差异，醋酶图谱发现五种酯酶带，其中Ｅｓ－１，Ｅｓ－３、Ｅｓ－５无差异，而Ｅｓ－２和Ｅｓ－４具多态性。     

水稻基因组中U2snRNA基因的结构分析

对水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ）Ｕ２ｓｎＲＮＡ基因的结构分析结果表明单子植物水稻的Ｕ２ｓｎＲＮＡ基因以多基因家族的形式存在,且Ｕ２ｓｎＲＮＡ基因中存在连锁现象。３个新的水稻Ｕ２ｓｎＲＮＡ基因和已报道的ＦＤＲＧＵ２－３一样,编码区上游除含有植物ＵｓｎＲＮＡ基因共有的ＵＳＥ和ＴＡＴＡ元件外,还含有单子叶植物ＵｓｎＲＮＡ所特有的ＭＳＰ元件,且具有保守的四茎环二级结构,基因成员间的同源性最低为８５．１＾     

人组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）在大肠杆菌中的表达,…

人组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）ｃＤＮＡ重组在表达质粒ｐＤＲ７２０中。在Ｅ．ｃｏｌｉＣ６００中获得了表达，表达水平为２％。以醋酸锌显色ＰＡＧＥ凝胶回收ｔ－ＰＡ表达条带，进行复性处理。复性产物经Ｂｅｎｚａｍｉｄｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ，Ｌｙｓｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，纯化得到ＳＤＳ－ＰＡＧＥ银染一条带纯度，比活为４，０００ｍｏｌ／ｓ·ｇ的人ｔ－ＰＡ。     

人红细胞生成素受体膜外结构域在大肠杆菌中的融合表达及其纯化

将插入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｂｅ的人红细胞生成素受体ｃＤＮＡ,用ＥｃｏＲＩ和ＢａｍＨＩ酶解,分离得到的基因片段,插入到经ＥｃｏＲＩ和ＲａｍＨＩ消解的表达载体ｐＧＥＸ－３Ｘ中,得到重组表达质粒ｐＧＥＸ－３Ｘ／ｈＥＰＯＲ。重组质粒ｐＧＥＸ－３Ｘ／ｈＥＰＯＲ含有ｔａｃ启动子,ＥＰＯＲ膜外结构域基因５端与谷胱甘肽转移酶（ＧＳＴ）编码基因融合,阳性重组子在大肠杆菌中经ＩＰＴＧ诱导表达ＧＳＴ－ｈＥＰＯＲ,重组表达菌裂解上清液经ＧＳＨ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和柱一步纯化,能除去绝大部分杂蛋白,基本达到纯化的效果。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和免疫杂交分析显示,重组表达产物确系人红细胞生成素受体     

果蝇姊妹种间亲缘关系的聚类分析

本文以聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）技术分析了金色果蝇复合种（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａａｕｒａｒｉａｓｐｅｃｉｅｓｃｏｍｐｌｅｘ）的５个姊妹种共１７个地理种群及其它种类的５个地理种群的８种同工酶酶谱，根据其中７种酶（Ａｍｙ、Ａｏ、Ｅｓｔ、α－Ｇｐｄｈ、Ｍｄｈ、Ｍｅ、Ｔｙｒ、Ｔｏ）的条带特征按Ｆｏｒｇｕｓｏｎ及Ａｑｕａｄｏ　＆Ａｖｉｓｅ的公式分别计算遗传相似系数及遗传距离，以类平均法（ＵＰＧＭＡ）进行了聚类分析，绘制出８个种类共２２个地理种群的生化系统树，结合姊妹种间无选择杂交可能组合的结果讨论了ａｕｒａｒｉａｓｐｅｃｉｅｓｃｏｒｎｐｌｅｘ各姊妹种间的亲缘关系、种化模式及分布在日本Ｋａｍｅｔｏｋｕ岛上的Ｄ．ｔｒｉａｕｒａｒｉａ发生分化的可能性。     

GaAsMESFET模型参数自动提取方法的研究

提出了一种基于ＰＳＰＩＣＥ４．０２通用电路模拟程序与优化技术相结合提取ＧａＡｓＭＥＳＦＥＴ模型参数的方法，根据实例的ＧａＡｓＭＥＳＦＥＴ小信号Ｓ参数与大信号Ｓ参数，利用约束优化技术提取模型等电路元件参数，并利用该电路模型参数设计制作１了３．７ＧＨｚ－４．２ＧＨｚ和５．２ＧＨｚ＝－５．８ＧＨｚ ＧａＡｓＭＥＳＦＥＴ放大器，给出了设计和测试结果并验证了该方法的正确性。     

水稻广陆矮4号基因文库的构建及U2snRNA基因的筛选

水稻广陆矮４号黄化苗总ＤＮＡ经Ｓａｕ３Ａ部分酶切，回收１２－２３ｋｂ片段，经ＣＩＰ脱磷后克隆于ＥＭＢＬ３载体，建立了水稻基因文库。以拟南芥的Ｕ２．２ｓｎＲＮＡ基因为探针，从基因文库中筛选到１３个阳性克隆，经不同酶切鉴定，初步判断有８种不同的克隆，对其中一个克隆ＦＤＲＧＵ２－３的重组ＤＮＡ构建了物理图谱，Ｕ２ｓｎＲＮＡ的一个基因已经定位在该克隆中１．５ｋｇ的Ｓａｌ－Ｉ－ＢａｍＨＩ酶片段上。     

高原型和山谷型藏山羊生态特征比较研究

对高原型和山谷型藏山羊的体态、被皮、解剖、生理和生化遗传标记等生态特征的比较研究表明：高原型比山谷型藏山羊体格较大；毛被白色者较多、毛丛较长、单位皮肤面积次级毛囊较多，产线量高；气管、肺和心脏较发达；血液中ＲＢＣ、ＷＢＣ、Ｈｂ均较高；体温、皮温均较低，两型藏山羊的Ｈｂ、Ａｌｂ、Ａｍ经电泳均显示一条带，无多态性，高原型藏山羊的Ｔｆ有３种基因型，即ＡＡ、ＡＢ、ＢＢ，而山谷藏山羊Ｔｆ只有两种基因型，即ＡＡ、ＡＢ。基因频率经ｘ检验差异不显著（Ｐ＞０．０５）。两型藏山羊的ＡＫＰ同工酶均有两种基因型，即ＡＫＰＦ和ＡＫＰＯ，ＡＫＰ基因频率经ｘ检验差异不显著（Ｐ＞０．０５），不论是高原型还是汕谷型藏山羊的ＥＳ同工酶均有多态性，都有３个带，但两者的Ｅ＿ｓ同工酶带有明显差异，区带－Ⅱ－２、带－Ⅲ－３、带－Ⅱ－４、带－Ⅲ－２对应比较，差异极显著（＞０．０１）；带－Ⅰ－１、带－Ⅰ－３、带－Ⅲ－１对应比较差异显著（Ｐ＜０．０５），高原型和山谷型山羊的ＬＤＨ同工酶均有５条带，其活力顺序均为ＬＤＨ＿１＞ＬＤＨ＿３＞ＬＤＨ＿２＞ＬＤＨ＿５＞ＬＤＨ＿４，各带对应比较，两个生态类型藏山羊间ＬＤＨ＿１、ＬＤＨ＿２活力差异极显著（Ｐ＞０．０１）；     

杂交水稻三个基因位点的遗传研究

研究了野败型杂交稻（Oryza SativaL.)两个籼稻（Indica)组成三对性状的遗传特性及其基因位点间的相互关系。本研究中酯酶同工酶E12A的存在对缺如，芽鞘的紫色对绿色和柱头的紫色对绿色分别是显性。三对性状分别受三个基因位点的三对等位基因控制，表现出典型的孟德尔遗传特征。三个基因位点间存在着明显的连锁关系，其排列顺序是紫色芽鞘基因位点（Pc)－紫色柱头基因点（Ps)－酯酶同工酶基因位点03（Est－3）。     

中国沿海真鲷群体遗传多样性的同工酶电泳分析

用同工酶电泳技术研究威海、厦门、北部湾3个海区真鲷群体的遗传多态性和群体之间的遗传趋异，共观测了LDH、MDH和EST3种酶11个基因位点，其中LDH的3个位点在3个群体都为单态，MDH有1个位点、EST有2—4个位点表现多态，3个群体多态位点数量和平均杂合度以威海群体最高(45．5％与0．161)，厦门群体次之(27．3％与0．156)，北部湾群体最低(27．3％与0．120)，北部湾与厦门海区的真鲷在遗传上较为相似，遗传距离0．012，威海海区真鲷与二者的差异较大，遗传距离分别达0．021(与厦门标本)和0．025(与北部湾标本)。     

厚唇光唇鱼(Acrossocheilus labiatus)和侧条光唇鱼(A.parallens)的比较研究

通过对其形态、解剖及部分同工酶表型的比较研究,发现厚唇光唇鱼(Acrossocheiluslabiatus)和侧条光唇鱼(A.parallens)的差别比较显著,认为二者都是有效种,但它们各自占领不同的水域,其分布受到南岭的阻隔.     

小麦异交群体选择效果的同工酶分析

通过对具有太谷核不育基因的小麦异交原始群体和二向选择后的部分子群体进行薄层等电聚焦电泳分析，结果如下：在选择四代中，不同选择方向的群体之间已显示出一定的子群体分化，异交群体内有相当高的遗传变异水平，多态位点百分率、位点的等位基因平均数和平均杂合度分别为１００％、３２９０７和０５７６３．经Ｆ检验，六个子群体的平均杂合度及位点的等位基因平均数均无显著变化．群体内具有很高的多态水平，比较六个子群体，只有４０２％的遗传多样性发生于群体之间，而另有９５９８％的遗传多样性存在于子群体内部．根据聚类分析结果，以Ｌ４子群体的分化程度最高．可见选择是有效的．     

新澄杂种西瓜及其亲本的同工酶分析

对良种西瓜“新澄”杂种及其亲本的酯酶、过氧化物酶同工酶进行分析研究的结果表明,杂种与其亲本的同工酶酶谱有显著差异,杂种除了具有双亲的“互补酶带”外,还出现双亲所没有的“杂种酶带”;同时发现杂种优势与酶谱的变化有密切相关.应用同工酶分析法鉴定这种价值昂贵的杂种种子的纯度,有一定的经济价值.     

水稻细胞质雄性不育系小孢子发育过程中的同工酶分析

以新选育出的籼型水稻细胞质雄性不育系马协Ａ有其相应保持系马协Ｂ为材料,分别取不育系和保持系处于花粉母细胞形成期、减数分裂４分体时期、单核期、２核期、３核期的花药进行过氧化物酶同工酶、细胞色素氧化酶同工酶电泳分析及酶活性测定分析。不育系与相应保持系比较发现,不育系过氧化物酶同工酶电泳酶谱带型丰富,酶活性较高;细胞色素氧化酶同工酶电泳酶电泳酶谱带型较小,酶活性较低。这现象是从单核期花药开始表现,并随发     

日本囊对虾野生群体杂合性的研究

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究了日本囊对虾9个野生群体10种等位酶的杂合子缺失及过量状况.在所研究的22个位点中有5个位点(Sod-1、Est-1、Est-2、Amy-3、Mdh-1)是多态位点.汕头群体的Est-2,北海群体的Mdh-1和Sod-1,湄洲群体的Mdh-1,连江群体的Sod-1和漳浦群体的Mdh-1位点符合H-W平衡标准(P＞0.05);其余的多态位点均显著或极其显著地偏离H-W平衡标准(0.01＜P＜0.05或P＜0.01).另外,日本囊对虾9个群体的Est-2位点均表现出杂合子缺失(F＞0);Amy-3和Est-1(除了泉州群体的Est-1)位点均表现出杂合子过量(F＜0).研究表明日本囊对虾野生资源杂合性状况较好.     

中国两性生殖卤虫种群PO同工酶基因的表达特征

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法对中国两性生殖卤虫 14个品系和伊朗的 1个两性生殖品系的过氧化物酶 ( PO)同工酶基因的表达特征进行了研究 .实验结果表明 :( 1)中国卤虫种群 Artemia sinica各品系和伊朗的 A.urmiana各自有其独特的 PO同工酶基因型 ;( 2 )在两性生殖卤虫各品系 PO同工酶基因表达过程中多数品系 PO-1、PO-3座位均未发现 aa基因型 ;PO-2座位测定不到 aa基因型 ;( 3 )存在品系内和品系间的多态现象 .     

不同寄主尖孢镰刀菌同工酶异质性的研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定了来自不同寄主枯萎病原菌尖孢镰刀菌过氧化物酶同工酶(POD)和酯酶同工酶(EST).结果表明,过氧化物酶同工酶共有3条主酶带,其迁移率分别为:Rf=0.08,Rf=0.20和Rf=0.4.但不同寄主的尖孢镰刀菌POD同工酶存在着明显的差别,来源于花生的尖孢镰刀菌只有2条POD同工酶酶带,其迁移率为:Rf=0.20和Rf=0.08;来源于甜瓜的尖孢镰刀菌只有1条POD同工酶酶带,其迁移率为:Rf=0.20;来源于不同寄主的镰刀菌的EST同工酶谱之间也存在着较大的差别.来源于黄瓜、甜瓜和西瓜的镰刀菌的EST酶谱较为相似,都具有Rf=0.018,Rf=0.114和Rf=1.000的3条酶带,其它寄主来源的镰刀菌的EST酶谱间互相则存在着很大的差别.但这些菌株基本上都存在着Rf为0.018和1.000的2条酯酶同工酶酶带.     

两种粉螨不同虫态同工酶比较研究

采用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳(PAGE)的分析方法对不同虫态的椭圆食粉螨EST、MDH和腐食酪螨EST同工酶进行了比较研究。结果表明,粉螨不同时期的同工酶酶谱有一定的相似相异性,利用粉螨的幼、若螨同工酶酶谱进行种间分类具有可行性。