中国柞蚕血淋巴的盘状电泳

应用聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳法对中国柞蚕血淋巴中的蛋白质进行分离．实验结果表明，昆虫血淋巴中的蛋白质种类远较高等生物和人的少，而且还发现不同品种间的柞蚕血淋巴中蛋白质种类和分子大小也不同，从而为蚕的分类学和饲养提供了理论根据     

中国柞蚕血淋巴的盘状电泳

应用聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳法对中国柞蚕血淋巴中的蛋白质进行分离。实验结果表明，昆虫血淋巴中的蛋白质种类远较高等生物和人的少，而且还发现不同品种间的柞蚕血淋巴中蛋白质种类和分子大小也不同，从而为蚕的分类学和饲节理论根据。     

麻蚕各发育期血淋巴中游离氨基酸的测定

血淋巴中含有大量游离氨基酸,是昆虫生物化学主要特征之一。昆虫血中游离氨基酸的浓度比人血高20—100倍。近年来纸谱分析了许多昆虫血淋巴中的游离氨基酸,组成蛋白质的20种氨基酸都曾在昆虫血淋巴中找到了。在鳞翅目的幼虫及蛹中,曾观察到血淋巴中氨基酸在各发育阶段上的差异,这些差异可能与变态期间体内的代谢有关,近数年来     

锯缘青蟹感染副溶血弧菌后血淋巴中差异蛋白的初步研究

采用蛋白质组学技术对锯缘青蟹受细菌感染后血淋巴中蛋白表达变化的情况进行初步研究.试验中以未感染锯缘青蟹为对照,用密度为每毫升5.0×107个副溶血弧菌的菌液感染锯缘青蟹,于注射后18 h分别抽取活菌注射组、灭活菌注射组、空白对照组的锯缘青蟹的血淋巴,进行蛋白差异分析.结果发现,与对照相比,锯缘青蟹感染细菌后,血淋巴中出现1条明显差异条带.肽质量指纹图谱及生物信息分析表明,该蛋白为cryptocyanin,是血蓝蛋白基因家族中的重要成员,提示cryptocyanin与免疫反应有关.     

从寄主昆虫血淋巴中分离纯化病原真菌菌体的方法

采用正交实验方法，对东亚飞蝗（Locusta migratoria）血细胞裂解及其DNA和RNA降解的条件进行了优化．在优化条件下，不仅去除了感病东亚飞蝗血淋巴中的血细胞及DNA和RNA。而且成功地分离和纯化了绿僵菌（Metarhizium anisopliae）菌体．裂解血细胞及其DNA和RNA的最佳酶解条件为：蛋白酶K的浓度为1mg／mL，作用温度为26℃，时间为60min，脱氧核糖核酸酶（DNAase I）的用量为5U，核糖核酸酶（RNAaseA）的浓度为0．5mg／mL，作用时间为35min，作用温度为30℃．以蝗虫特异引物进行PCR及RT-PCR检测结果表明，从绿僵菌侵染后的蝗虫血淋巴中分离纯化无蝗虫DNA和RNA污染的绿僵菌菌体，为后续分离和克隆绿僵菌侵入蝗虫体内后表达的基因，研究它们在致病机理中的作用奠定了基础．     

家蚕抗菌蛋白Cecropin D和Lysozyme的分离纯化及性质鉴定

经大肠杆菌E．coli K12D31诱导后的家蚕幼虫，其免疫血淋巴经CM-Sepharose CL-6B离子交换层析、Sephadex G-100凝胶过滤层析及HPLC分离后，得到2种抗菌蛋白，经液相色谱-电喷雾质谱（ESI-MS）分析鉴定，纯化的2种抗菌蛋白分别是家蚕抗菌肽eeeropin D和溶菌酶lysozyme酸性电泳（A-PAGE）测活免疫血淋巴得到抗菌蛋白活性谱：cecropin D在8h无显著表达，12h有较强抗菌活性，30h达到最高，以后逐渐降低；lysozyme在8h后检测到表达，12h到达高峰，之后逐渐下降，48h的血淋巴中未检测到明显的表达．研究认为抗菌蛋白lysozyme和cecropin D是家蚕幼虫感染细菌8h后大量表达的抗菌蛋白，主要参与细菌感染12～30h的血淋巴对细菌的清除，是参与家蚕幼虫抗菌免疫的重要蛋白．     

微量农药和大肠杆菌诱导蓖麻蚕产生抗菌物质的研究

用微量除虫菊酯类农药和大肠杆菌(E·coli)诱导蓖麻蚕(Philosamiacynthia ricini)蛹后,其血淋巴经聚丙烯酰胺凝胶电泳测活和葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶层析分离后,在蛹血淋巴中至少可分离到4种具有抗菌活性的物质,3种为偏碱性的抗菌蛋白和抗菌多肽,1种为偏酸性的大分子抗菌蛋白。蓖麻蚕蛹免疫血淋巴中的抗菌物质以抗菌蛋白为主,其分子量为7万-7.5万和2.3万-2.4万道尔顿。两种小分子抗菌物质的含量较少,按其电泳位置推测,分子量为4000道尔顿左右。诱导前和诱导后3hr内注射放线菌素D均能抑制抗菌物质的合成。     

KK-42对日本沼虾蜕皮激素及其受体表达的影响

用1.95×10-4 mol.L-1的KK-42处理日本沼虾1min,不同时刻抽取血淋巴、解剖肝胰腺.HPLC测定血淋巴中20E滴度,RT-PCR测定EcR和RXR mRNA水平.结果:KK-42处理后3h,6h,20E滴度分别比对照组增加了121.71%(P<0.05)、268.96%(P<0.01);EcR mRNA水平在处理后6h,12h,分别比对照组提高了233.56%(P<0.01)、110.73%(P<0.05);RXR mRNA水平在处理后3h、12h,分别比对照组提高了195.53%(P<0.01)、80.83%(P<0.05).表明KK-42可显著提高血淋巴中20E的滴度,并诱导肝胰腺中EcR和RXR的基因转录.     

马尾松毛虫感染绿僵菌后体壁组织和血淋巴的病理生化 …

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，分析金龟子绿僵菌感染马尾松毛虫３￣４龄幼虫在３天４天、６天后，体壁组织中蛋白质和过氧化物酶及血淋巴中过氧化物酶的变化情况。结果表明，金龟子绿僵菌对马尾松毛虫体壁组织蛋白质代谢产生很大影响，过氧化物酶活性有减弱趋势。     

马尾松毛虫感染绿僵菌后体壁组织和血淋巴的病理生化分析

利用聚内烯酰胺凝胶电泳技术，分析金龟子绿僵菌感染马尾松毛虫3～4龄幼虫在3天、4天、6天后，体壁组织中蛋白质和过氧化物酶及血淋巴中过氧化物酶的变化情况。结果表明，金龟子绿僵菌对马尾松毛虫体壁组织蛋白质代谢产生很大影响，过氧化物酶活性有减弱趋势。     

香菇深层发酵菌丝体多糖的提取及其抗感染抗肿瘤试验

深层发酵的香菇菌丝体,以热水煮沸和乙醇沉淀提取其多糖,经适当稀释、蒽酮法定量和高压灭菌后,按每千克体重约1.10mg腹腔注射到小鼠体内,连续6d,然后用禽多杀性巴氏杆菌攻毒,其LD_(50) 值为对照组的2.5倍.若注射量为每千克体重19mg,连续10d,并在用多糖后的次日皮下植入S_(180)肿瘤细胞,10d后捕杀检查所有小鼠,发现肿瘤重及肿瘤与体重之比值均显著低于对照组的(P<0.005).证明香菇深层发酵菌丝体的多糖同样具有抗感染、抗肿瘤、增强机体免疫力等功效.     

关节腔内注射碘乙酸快速建立小鼠骨关节炎模型

摘要:目的 观察分析不同剂量碘乙酸(M IA)对于小鼠软骨和骨组织的损害,找出适合不同程度的骨关节炎小鼠模型的浓度。方法 C57BL/6小鼠随机分为4组,每组左右腿互为对照注射不同剂量的碘乙酸和对照用PBS,1,2,4周后测量膝关节宽度,进行相关评分,分析病变情况。结果 注射后出现不同程度病L变化。实验组关节评分明显大于对照组(P<0.05),且实验组中表现出较大剂量组(≥0.1 mg)与较小剂量组(<0.1 mg)两对组间差异。结论 推荐0.1 mg为较大剂量组代表剂量,产生明显软骨组织破坏和炎症反应,0.05 mg为较小剂量组代表剂量,产生轻度软骨组织的破坏和可逆炎症反应。     

泻心汤不同剂量配伍的抗炎作用比较研究

目的不同剂量配伍时泻心汤的抗炎作用的对比分析,其抗炎作用有何影响。方法采用角叉菜胶导致小鼠炎症模型,经口灌胃小鼠不同剂量配伍的泻心汤水提液,连续灌胃给药5 d后,测定足肿胀度;试验测定丙二醛(MDA)含量和一氧化氮(NO)含量,查看其抗炎作用的活性。结果对比模型炎症对照组,生理盐水组、地塞米松组及各个剂量配伍组的足肿胀度均比模型对照组低,差异有统计学意义(P0.05);与剂量配伍4组相比较,剂量配伍2组足肿胀度下降,差异有统计学意义(P0.05)。与模型对照组比较,生理盐水组、地塞米松组及各个剂量配伍组MDA含量和NO含量均低于模型对照组组,差异有统计学意义(P0.05);与剂量配伍4组进行对比,剂量配伍2组NO含量和MDA的含量均下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论三黄泻心汤的不同剂量配伍时抗炎作用不一样。     

健脑益寿胶囊对衰老模型小鼠体内LPO的影响

观察健脑益寿胶囊的抗衰老作用,并初步探讨其作用机理.选用6月龄小鼠随机分为6组,分别为健脑益寿胶囊高、中、低剂量组、模型组、维生素E组、空白对照组.另取2月龄小鼠10只,作为青龄对照组.除空白对照组、青龄空白组外均颈背部sc给予D-半乳糖,剂量为120 mg/kg,造成衰老模型,并同时灌胃给予健脑益寿胶囊高、中、低3个剂量组健脑益寿胶囊,剂量分别为3.744、1.872、0.936 g/kg,维生素E组灌胃给予维生素E,剂量为20 mg/kg(模型组不给药),连续造模、给药6周,6周后处死小鼠,分别测定心、肝组织的脂质过氧化产物(LPO)含量.健脑益寿胶囊可不同程度降低D-半乳糖所致衰老小鼠心、肝组织的LPO含量.健脑益寿胶囊能降低体内脂质过氧化产物的含量,具有明显的延缓衰老作用,其抗衰老作用机理可能与其降低体内脂质过氧化产物的含量有关.     

黄柏煎剂的抗炎、抗菌作用研究

摘要: 目的 观察黄柏煎剂的抗炎、抗菌作用。方法 昆明种小鼠 50 只按体质量随机分为 5 组,小鼠连续灌胃黄 柏煎剂 7 天后小鼠左耳廓内外侧涂 20 μL 二甲苯致炎,右耳不涂作为对照,计算各组耳肿胀度及抑制率; SPF 级 SD 大鼠 40 只在左、右前肢分别埋入无菌塑料环致肉芽肿,然后按体质量随机分为 5 组并按照相应剂量连续灌胃黄柏 煎剂 7 d,计算各组肉芽肿质量; 昆明种小鼠 60 只,根据性别和体质量随机分为 6 组,分别按照相应剂量连续灌胃 黄柏煎剂 7 d。第 7 天给药 1 h 后各组小鼠腹腔注射金黄色葡萄球菌菌液,6 h 再给药 1 次。观察小鼠在 72 h 内的 死亡率。结果 与对照组比较,黄柏煎剂各剂量组均能不同程度的抑制小鼠耳廓肿胀度,差异具有统计学意义( P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ,其中以低剂量组的作用最好; 与对照组比较,黄柏煎剂低剂量组能显著降低大鼠肉芽肿质量 ( P ＜ 0. 05) ; 高、中剂量组有一定的降低趋势,与对照组比较,差异无统计学意义( P ＞ 0. 05) ; 黄柏高、中、低剂量组 的死亡率分别是 50% 、40% 、20% 。与对照组比较,中、低剂量组可降低感染小鼠的死亡率( P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) 。 结论 黄柏煎剂具有良好的抗炎、抗菌作用。     

芪参益气滴丸对过氧化氢所致体外心肌细胞损伤的保护作用

目的：探讨芪参益气滴丸对过氧化氢所致心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法：采用纯化培养的心肌细胞建立体外过氧化氢损伤模型。实验分5组,每组8孔细胞（24孔细胞培养板）：正常对照组;过氧化氢损伤模型组;芪参益气滴丸高、中、低3个不同剂量组。其中损伤模型组过氧化氢浓度为200μmol·L^-1。芪参益气滴丸组在200μLmol·L^-1过氧化氢损伤的基础上,分别加入15、30、45μg·L^-1芪参益气滴丸。加入过氧化氢损伤的同时加入芪参益气滴丸,共同孵育12h后测定结果。利用试剂盒分别测定细胞培养液上清中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸磷酸激酶（CPK）和心肌细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）及还原型谷胱甘肽（GSH）的含量。结果：损伤模型组细胞培养液中LDH,CPK含量明显高于正常对照组（P〈0．05）和芪参益气滴丸组（P〈0．05）;损伤模型组心肌细胞内SOD,CAT,GPx和GSH的含量,均明显低于正常对照组（P〈0．05）和芪参益气滴丸组（P〈0．05）。结论：芪参益气滴丸可明显减轻体外培养条件下过氧化氢所致心肌细胞损伤。     

五味保肝丸对酒精性肝损伤小鼠的保护作用及机制研究

为探讨五味保肝丸对酒精性肝损伤小鼠的保护作用及其作用机制,将健康雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、五味保肝丸低、中、高剂量组,每组10只进行实验。五味保肝丸组分别给予不同剂量五味保肝丸混悬液,正常对照组和模型组灌胃给予20 g/L羧甲基纤维素钠溶液,灌胃给药2 h后,除空白对照组外,给予56%白酒灌胃12 mL/kg,连续10 d,建立小鼠酒精性肝损伤模型。检测ALT、AST活性,肝微粒体CYP450含量以及CYP2E1蛋白的表达。研究结果表明：与模型组相比,五味保肝丸各剂量组可抑制急性酒精性肝损伤小鼠血清中ALT、AST含量的增加,增加CYP450含量,抑制CYP2E1蛋白的活化表达,其中,五味保肝丸中、高剂量组具有显著性差异（P<0.05）。五味保肝丸对小鼠酒精性肝损伤具有一定的保护作用,可能是通过保护细胞色素P450酶活性、抑制CYP2E1异常活化,发挥保肝降酶的作用。     

117β-雌二醇对小鼠脾脏CD11c阳性树突状细胞白细胞介素和TNF-α表达的影响

在mRNA水平上研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对小鼠脾脏CD11c阳性树突状细胞(spleenCD11c-positive dendritic cells,SDCs)合成的细胞因子IL-6,IL-10,IL-12和TNF-α的调节作用.方法:免疫磁珠法纯化小鼠CD11c阳性SDCs,用不同浓度的...