黔产金钗石斛茎和花中浸出物测定

目的:测定黔产金钗石斛茎和花中浸出物的含量。方法:按照2015版《中国药典》四部(通则2201)浸出物测定法项下,对水溶性和醇溶性浸出物测定法中的冷浸法和热浸法进行实验,优选金钗石斛的最佳浸出物测定法,并对金钗石斛茎和花的浸出物进行测定。结果:金钗石斛的浸出物测定以醇溶性热浸法为佳,溶剂为20%乙醇。不同采收月份的金钗石斛茎中浸出物的含量以2月份平均含量最高,为35.14%,8月份平均含量最低,为16.29%;不同生长年限的金钗石斛茎中浸出物的含量:一年生三年生二年生,其中一年生者浸出物含量为27.33%。不同干燥方式的金钗石斛花中浸出物的含量:阴干60℃烘干30℃烘干晒干。结论:黔产金钗石斛浸出物测定实验结果表明,2月份采收一年生金钗石斛茎质量最佳,金钗石斛花的干燥方法以阴干最好。     

栽培金钗石斛形态鉴别和总生物碱含量研究

以贵州省赤水市12处不同海拔高度地域环境中采集的人工栽培金钗石斛(Harba Dendrolii Nobilis)作为材料,运用简易的植物徒手切片方法,对其茎和叶的解剖结构进行了观察,并对比《中国药典》(2005年版)关于金钗石斛解剖结构的阐述,对采集材料的种类进行了比较;同时,运用常规酸性染料比色法,对其药理成分中的总生物碱含量进行了检测,以评判赤水栽培的金钗石斛作为道地药材的质量情况,期望对我国人工栽培的药用植物种类的快速鉴别和药材质量的评判起到一定的借鉴作用.     

金钗石斛中生物碱提取的动力学分析

将金钗石斛用氨水浸润后,以氯仿为溶剂,在不同液固比、不同提取时间和不同提取温度下提取生物碱,以Fick第二定律为依据,以提取生物碱质量浓度为检测指标,求解提取动力学的表观传质速率方程、速率常数k、相对萃余率和表观活化能Ea等数值,建立金钗石斛生物碱提取过程的动力学模型.结果显示:在液固比为60,提取温度为60℃,提取时间为90 min时,所提取的生物碱质量浓度较高,金钗石斛生物碱提取过程的动力学基本符合一级动力学方程,在不同影响因素下,表观传质速率ln[C_∞/(C_∞-C_0)]、相对萃余率与时间t均有比较好的线性关系,提取动力学方程的活化能Ea为55.075 k J/mol.由此知金钗石斛生物碱提取过程的关键控制步骤为溶质的内扩散步骤.     

黔产道地金钗石斛不同部位多糖含量的测定

目的:通过正交实验对金钗石斛多糖提取条件与显色条件进行优化,确定最佳测定方法。方法:水提醇沉法作为提取方法;采用苯酚-硫酸法进行多糖测定。通过正交试验对提取条件、显色条件进行考察优选。结果:金钗石斛多糖回流提取最优条件为:加入石油醚10 mL回流提取1 h,过滤后挥干溶媒;再加入10 mL 80%乙醇回流1 h,过滤水浴挥干。加入150 mL蒸馏水沸腾后回流2 h。最佳显色条件为:加入苯酚1 mL、浓硫酸4 mL,于90℃水浴锅中加热15 min,取出试管后冰浴冷却5 min,在波长488 nm下进行检测。测得金钗石斛茎、花、叶中多糖含量平均值表现为茎叶花。结论:建立的方法操作简便合理、稳定性及精确度高,可适用于金钗石斛多糖含量的测定。金钗石斛茎、花、叶多糖含量测定结果,可为金钗石斛的开发利用提供参考依据。     

正交试验法优化金钗石斛生物碱的提取工艺

目的:优化金钗石斛生物碱提取工艺。方法:采用正交试验法,以石斛碱提取量为考查指标,用GC法测定石斛碱的含量。结果:最佳提取工艺为75%酸性乙醇(pH3),80℃提取6h,结论:优选得到的工艺简便易行,稳定性好。     

不同采收期金钗石斛总生物碱及多糖质量分数的变化

采用紫外-可见分光光度法测定不同采收期金钗石斛药材中总生物碱和总多糖的质量分数,并对其总生物碱和多糖成分的质量分数变化进行比较.结果表明:在每年的3,9,10,11,12月份采收的金钗石斛中总生物碱的质量分数较高;总多糖的质量分数在每年的10,11月份相对较高.     

五鹤续断中总生物碱的质量分数分析

采用索氏提取法对不同生长时期的五鹤续断中总生物碱进行提取并分离,探讨用紫外分光光度法测定总生物碱质量分数的方法.结果表明:随着生长年限的增加,其根中总生物碱的质量分数积累呈现出递增趋势.但是茎、叶中总生物碱的质量分数很低.因此,三年生的五鹤续断根为较好的药材,具有较好的药用价值和开发价值.     

高纯度金钗石斛生物碱提取工艺的开发

通过设置不同pH、温度、酶解时间、酶用量和乙醇浓度等梯度条件,确定酶法提取生物碱的最适条件为酶用量7 mg酶/g石斛粉、缓冲液pH=5、酶解温度40℃、酶解时间2 h;提取条件在75%的乙醇、固液比为1∶12,碱化后在pH=8时,效果最好。将乙醚重结晶3次母液合并,以20 kg石斛作为原料,可获得20 g以上纯度为98.4%的产物,经气质联用法(GC-MS)鉴定提取物为石斛碱。结论:酶法提取生物碱的效果较好,可用于金钗石斛总生物碱的分离纯化。该方法简单快速,稳定高效,具有潜在工业生产价值,为金钗石斛总生物碱的工业化生产提供了实验依据。     

2种石斛属植物和小叶石仙桃多糖的组织化学定位

为对不同年龄的铁皮石斛(Dendrobium candidum)、铜皮石斛(D.moniliforme)及石斛伪品-小叶石仙桃(Pholidota chinensis)不同器官中的多糖进行组织化学定位,选择具有较高药用价值的石斛类药用植物和药用部位,确定铁皮石斛的最佳采收期,根据多糖的理化性质,材料经冰冻切片,用改良的高碘酸-席夫试剂(PAS)对多糖进行组织化学定位;结果表明,多糖类物质主要存在茎的薄壁细胞、根的皮层细胞、叶的叶肉细胞中。其总多糖含量有如下顺序:二年生的铁皮石斛茎>铜皮石斛茎≈>小叶石仙桃茎,铁皮石斛根≈铜皮石斛根>小叶石仙桃根,铁皮石斛叶≈小叶石仙桃叶>铜皮石斛叶。另外,在不同的器官中,铜皮石斛的多糖含量呈现“茎≈根>叶”和小叶石仙桃的多糖含量呈现“叶>茎≈>根”的规律,而二年生的铁皮石斛则为“茎>叶>根”。这表明在种间及同种植物的不同器官、不同年龄,其多糖的含量存在差异。而3种兰科植物中,以二年生铁皮石斛茎的多糖含量最高,表明其药用价值也最高。     

气相色谱法测定金钗石斛中石斛碱的含量

目的:测定贵州不同产地金钗石斛中石斛碱的含量。方法:采用气相色谱法,OV1701石英毛细管柱(30×0.32mm,0.25μm),以FID为检测器。结果:贵州赤水产金钗石斛的石斛碱含量最高,达0.259%,罗甸、兴义、独山产金钗石斛石斛碱含量分别为0.199%、0.09%和0.118%。结论:本实验建立的方法简便快捷,结果稳定,可作为中药金钗石斛中石斛碱含量测定的方法。     

四种不同培养基对诱导金钗石斛幼苗生根的影响

为有效提高金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl)的人工繁殖,选用金钗石斛无菌幼苗在4种不同生根培养基上,作试管苗诱导生根对比试验,结果表明:配方3中生长的幼苗生根情况最好,平均生根5.87条/株,平均根长4.39cm,生根率为100%.     

金钗石斛试管苗移栽基质的初步研究

金钗石斛为名贵中药材,自然繁衍慢,野生金钗石斛难以满足药用市场的需求.新兴的植物组织培养技术能够提高金钗石斛的繁衍速度,使大规模人工栽培成为可能,但试管苗移栽的基质严重地影响其成活率及生长情况.本文对金钗石斛试管苗出瓶移栽基质进行了初步的研究.结果表明:以兰石和树皮混合作为金钗石斛试管苗基质成活率高、效果最好.     

金钗石斛试管苗壮苗培养和光合速率的检测

选用金钗石斛(Dendrobium nobileL ind l)种子播种在固体、半固体、液体、滤纸拱桥液体培养基上,作种子萌发对比试验,最终研究结果:滤纸拱桥液体培养基上萌发率最高,可达90%以上。试管苗在添加或者未添加苔藓植物提取液壮根壮苗培养基上培养,最终研究结果为:前者平均每天苗净增长0.054 g,后者平均每天苗净增长0.082 g。这一实验结果充分证实了金钗石斛在未添加苔藓植物提取液的生长超过添加苔藓植物提取液生长的51.85%。光合速率的测定得出实验结果:金钗石斛第一功能叶的光合速率最高,其它功能叶依次递减。所有功能叶光合速率总平均值为2.60μmol.m-2.s-1。     

金钗石斛茎段培养再生绿色植株

报道了用金钗石斛 (DendrobiumnobileLindl)的茎段作离体培养和快速繁殖 ,已诱导出丛生芽并发育形成试管苗 ,试管苗经过“炼苗处理” ,移栽成活。同时还试验了 3种培养基对试管苗生长的影响     

金钗石斛营养成分分析研究

采用国家标准分析法测定了贵州省赤水市龙泉原生态石斛产业实业有限公司所种植金钗石斛的营养成分。结果显示水分含量为84.45%、粗纤维含量为9.10%、蛋白质含量为0.94%、还原糖含量为1.13%、粗脂肪含量为0.12%,此外共测出12种氨基酸和8种无机元素。可以看出贵州省赤水市龙泉原生态石斛产业实业有限公司所种植金钗石斛含有丰富的蛋白质和氨基酸,并含有丰富的Ca、Mg、P等无机元素,具有较高的营养价值。     

生长调节物质对金钗石斛器官分化的影响

在植物的组织培养和快速繁殖过程中,外源激素对植株的器官分化有着非常重要的作用.作者采用了不同种类和浓度的激素对金钗石斛的试管苗进行了对比研究,结果表明:低浓度的6-BA、NAA和IBA均有利于诱导金钗石斛试管苗芽的分化,高浓度激素则起抑制作用;NAA和IBA具有促进试管苗根分化的作用,6-BA则抑制根的分化;6-BA和2,4-D能诱导试管苗开花,NAA和IBA则抑制开花;2,4-D能诱导原球茎的分化,而6-BA却抑制愈伤组织的形成.     

金钗石斛兰组培苗的生根培养和移栽

以1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的NAA、IBA和6-BA,配置16种培养基进行试验,筛选最适宜于金钗石斛兰生根的培养基.结果显示:1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA及1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.2 mg/L IBA培养基最适宜于金钗石斛兰生根,生根率达100%,而且根系生长健壮.将金钗石斛兰生根组培苗移栽于6种不同的基质中,结果表明,以棕榈外壳作为移栽基质最佳,移栽成活率达100%,且幼苗生长良好.     

贵州几种野生石斛的引种栽培和繁殖技术

近年来 ,在贵州不同地区采集了石斛 (D .nobileLindl)、密花石斛 (D .densifiorumLindl.ex.wall)、美花石斛(D .loddigesiiRolfe)和细叶石斛 (D .hancockiiRolfe)共 4种 ,并进行人工模拟野生环境室内、室外的栽培试验和无土栽培 ,同时探索出较好的栽培技术、繁殖技术和栽培管理措施 ,现已引种成功     

金钗石斛种子非共生萌发和种质保存

报道了用金钗石斛(DendrobiumnobileLindl)已开裂果实的种子经无菌处理,播种在改良的KC培养基上培养,研究结果表明:种子萌发成原球茎,原球茎分化成幼苗。同时对原球茎、幼苗和茎芽进行冷冻保存和低温贮藏。最终研究结果为:冷冻保存的原球茎其分化率为51%,幼苗和茎芽存活率分别是35%、43%。低温贮存的原球茎分化率为75%,幼苗和茎芽的存活率分别是95%、97%。