碳源对不同产地香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响

【目的】 探究渗透调节物质种类及其不同浓度对香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响,为提高香樟体胚诱导率、优化体细胞胚胎发生体系奠定理论基础。【方法】 以7月初在湖南省郴州、长沙、娄底及怀化市采集的香樟(Cinnamomum camphora L.)的未成熟合子胚为试验材料,分析不同碳源种类、浓度及组合方式对香樟体胚诱导、芽萌发、生根等方面的影响。【结果】 适合香樟的体胚诱导培养基为MS+1.0 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)+0.3 mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+1.0 mg/L 链霉素+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L水解酪蛋白;增殖培养基为MS+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L 水解酪蛋白;芽萌发培养基为MS+0.1 mg/L 苯基噻二唑基脲(TDZ)+0.5 mg/L 萘乙酸(NAA)+0.1 mg/L 吲哚丁酸(IBA)+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂;生根培养基为MS+1.0 mg/L IBA+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂。【结论】 经过改良,添加15 g/L蔗糖和30 g/L山梨醇的组合碳源,香樟体胚的诱导率明显提高;添加15 g/L蔗糖和15 g/L山梨醇的组合碳源处理的新植株生根条数多、主根明显,生长状况更优。     

蜻蜓凤梨快速繁殖的研究

通过对蜻蜓凤梨快速繁殖进行研究,结果表明:用蜻蜓凤梨试管苗茎的中部进行诱导侧芽效果比较好,培养基为MS 6-BA3.0mg/L IBA0.3mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7g/L;增殖阶段适宜培养基为MS 6-BA3.0mg/L IBA0.3mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7g/L或MS 6-BA4.0mg/L IBA1.0mg/L NAA1.0mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7g/L;生根阶段适宜培养基为1/2MS NAA0.5mg/L 活性碳0.1%.蜻蜓凤梨组培苗容易移栽成活,移栽成活率可达95%以上.     

白及组培苗高效繁育技术研究

为建立白及(Bletilla striata)组培苗高效繁育技术体系,以白及蒴果为外植体,通过设置不同培养基及不同移栽基质对白及种子无菌萌发、原球茎及丛生芽诱导、丛生芽生根及结鳞茎培养、移栽驯化以及驯化苗一年两季培育开展研究。结果表明：白及种子萌发、原球茎及丛生芽诱导最适培养基为1/2 MS+6-苄基腺嘌呤(6-BA) 1.0 mg/L+萘乙酸(NAA) 0.1 mg/L+油菜素内酯(BR) 0.01 mg/L+蔗糖20 g/L液体培养基;丛生芽生根及结鳞茎培养最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+BR 0.02 mg/L+NAA 0.2 mg/L+激动素(KT) 0.5 mg/L+香蕉100 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂5.0 g/L+活性炭1.0 g/L。丛生苗于3-4月移栽,最适宜的移栽基质为泥炭土、珍珠岩和蛭石(2∶2∶1,V∶V∶V)的组合物,移栽成活率为96.33%。一年两季的栽培管理并结合喷施0.02 mg/L BR能明显提高种苗质量。     

红头兰(Tuberolabium quisumbingii)胚培养和快速繁殖

以红头兰的胚为材料,研究了红头兰的胚培养和快速繁殖技术.结果表明:培养基中无机盐的浓度和激素影响胚的萌发,在1/4MS培养基加入0.5mg/L的KT效果最佳;培养基中加入椰子水、土豆提取物、蛋白胨和活性炭均有利于胚的萌发;在继代培养中,适宜的培养基为1/3MS+6-BA2mg/L+NAA0.01mg/L+椰子水10%+蛋白胨2g/L+活性炭2g/L+蔗糖20g/L+琼脂7g/L;分化和壮苗培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA0.5mg/L+蔗糖20.0g/L+AC2.0g/L+蛋白胨2.0g/L+琼脂7g/L。     

美洲商陆快速繁殖实验体系的建立

以美洲商陆(Phytolacca americana L.pokeweed)的茎尖为外植体,建立了美洲商陆的快速繁殖实验体系.茎尖增殖最佳培养基为 MS 0.05mg·L-16-苄基腺嘌呤(6-BA) 0.1mg·L-1赤霉素(GA3) 300mg·L-1水解乳蛋白(LH) 20g·L-1蔗糖 7.0g·L-1琼脂,pH5.8.诱导根的最佳培养基为1/2MS 0.4mg·L-1吲哚丁酸(IBA) 0.1mg·L-1GA3 300mg·L-1LH 15g·L-1蔗糖 7.0g·L-1琼脂,pH5.8.     

铁线莲‘Multi Blue’体细胞胚诱导和植株再生

以铁线莲品种‘Multi Blue’的茎尖为外植体,1/2MS为基本培养基,进行胚性愈伤组织和体细胞胚的诱导及植株再生条件的选择。结果表明：茎尖外植体在1/2MS+TDZ(1.0 mg/L)+NAA(0.5 mg/L)+2 %蔗糖+0.7 %琼脂的固体培养基中培养时可形成淡黄色块状至颗粒状愈伤组织,经继代培养后可逐渐形成胚性愈伤组织;体细胞胚诱导以1/2MS+TDZ(0.2 mg/L)+IBA(0.1 mg/L)+ABA(0.3 mg/L)+CH(0.5 g/L)为佳,诱导率可达96 %;而适宜的体细胞胚萌发培养基为1/2MS+6-BA(0.2 mg/L)+IBA(0.05 mg/L)。体胚再生植株经驯化后,移 栽成活率可达80 %以上。     

组培过程中菇娘试管苗玻璃化防控技术研究

在组培快繁过程中,菇娘组培苗易发生玻璃化现象,影响繁殖效率.研究了6-BA、琼脂含量、蔗糖浓度对玻璃化的影响.结果表明:在基础培养基MS中适当降低培养基中6-BA与增加琼脂的含量能显著降低组培苗玻璃化的比例,其最佳质量浓度分别为1.0 mg/L和7.0 g/L;蔗糖浓度对组培苗玻璃化无显著影响.已经玻璃化的植株,无法通过调整6-BA及琼脂含量恢复正常生长.本研究为菇娘的组培快繁及试管苗的玻璃化防治提供了科学依据.     

文山三七块根的植物组织培养研究

选择云南文山三七块根为外植体,采用全面实验法或正交实验法,研究组织培养过程中外植体最佳表面消毒方案和最佳愈伤组织诱导、分化生芽、生根方案.试验结果表明,三七块根最佳表面灭菌方案为75%乙醇消毒10 s,再用2%次氯酸钠溶液消毒15 min;最佳愈伤组织诱导培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L+KT1.0mg/L+2,4-D1.0mg/L,批pH=5.8;生芽生根培养基可以选择MS+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L+2,4-D0.5 mg/L+NAA1.0mg/L NAA+6-BA1.0mg/L,pH=5.8.     

黑果枸杞组培繁殖培养基选择

以黑果枸杞种子为材料,通过配比不同质量浓度植物生长调节剂的方法,研究在其组织培养快速繁殖过程中培养基的选择.结果表明:MS培养基适合黑果枸杞种子萌发与生长;无菌苗在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA培养基中可以形成较好的愈伤组织;在MS+0.4 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA培养基中不定芽数量较多;适宜生根的培养基为1/2 MS+1.5 mg/L IBA,生根率为98%.组培苗在泥炭土、蛭石、珍珠岩(2∶1∶1)混合基质中移栽成活率高达93%.     

金钗石斛兰组培苗的生根培养和移栽

以1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的NAA、IBA和6-BA,配置16种培养基进行试验,筛选最适宜于金钗石斛兰生根的培养基.结果显示:1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA及1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.2 mg/L IBA培养基最适宜于金钗石斛兰生根,生根率达100%,而且根系生长健壮.将金钗石斛兰生根组培苗移栽于6种不同的基质中,结果表明,以棕榈外壳作为移栽基质最佳,移栽成活率达100%,且幼苗生长良好.     

叠鞘石斛组织培养及植株再生体系优化

以叠鞘石斛成熟种子为材料，使用IBA、6-BA和NAA共3种生长调节剂与香蕉泥和椰子汁有机物等组合，采用3因素3水平正交设计及单因素设计进行组织培养研究.结果显示，最佳叠鞘石斛原球茎培养基为MS+50 g/L椰子汁+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂，40 d增殖系数为6.75,分化率为84.38%;最佳叠鞘石斛壮苗生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂.通过该技术，可以在较短时间获得大批量优质叠鞘石斛种苗，为大规模叠鞘石斛药材生产提供基础.     

金叶复叶槭水培嫩枝组织培养体系研究

【目的】筛选基本培养基、增殖和生根培养基最佳激素组合,探索炼苗移栽方法,建立金叶复叶槭组织培养体系,为该树种优良种苗规模化生产提供新途径。【方法】以金叶复叶槭水培嫩枝为试材,通过单因子逐步筛选法,研究MS、WPM、B₅培养基对初代培养,6-BA、TDZ和NAA对增殖培养,IBA和NAA对生根培养,以及相对湿度对移栽成活的影响。【结果】MS和WPM诱导外植体腋芽萌发率显著高于B₅培养基,但MS培养基在促进新芽伸长生长方面优于WPM。6-BA、NAA与低浓度的TDZ联合使用可有效地提高不定芽增殖系数,在MS附加0.5 mg/L 6-BA、0.01 mg/L TDZ、0.06 mg/L NAA的增殖培养基中,每个外植体可增殖5.8个新芽。添加生长素可显著提高增殖芽生根率,添加IBA生根效果显著好于NAA,1/2 MS附加0.05 mg/L IBA即可使生根率达100%。85%的相对湿度条件下组培苗移栽成活率可达95%。【结论】适宜金叶复叶槭水培嫩枝组培快繁的基本培养基为MS培养基,最佳增殖培养基为MS + 0.5 mg/L 6-BA + 0.01 mg/L TDZ + 0.06 mg/L NAA;最佳生根培养基为1/2 MS + 0.05 mg/L IBA;金叶复叶槭组培苗对移栽基质要求不高,保湿是关键。     

蝙蝠葛根茎愈伤组织培养及试管苗分化的研究

为保护蝙蝠葛的野生资源,该研究以嫩茎为材料,进行了愈伤组织生长、愈伤组织分化培养,生长芽生根及试管苗移栽和定植的研究。结果证明:MS+琼脂0.46%+蔗糖37 g/L+ZT 0.5 mg/L+La(NO3)3.6H2O 0.3 mg/L+2,4-D 2.4 mg/L是嫩根茎段愈伤组织生长培养的适宜培养基;1/2 MS+AgN030.6 40 g/L+琼脂0.47%+蔗糖3.3%+NAA 0.075 mg/L+BA 0.45 mg/L是愈伤组织分化培养的适宜培养基;White+琼脂0.48%+ABT2号0.6 mg/L+蔗糖1.4%+IAA 0.1 mg/L是生长芽生根培养的适宜培养基;试管苗移栽成活率为89.2%;定植成活率为98.9%。定植的试管苗次年正常开花结果,保持了野生蝙蝠葛的植物学性状。     

辣蓼铁线莲根芽愈伤组织试管苗培养研究

为保护辣蓼铁线莲野生药材资源,以根芽为材料,采用组织培养方法,进行了愈伤组织培养与分化、无根苗生根培养、试管苗的移栽和定植的研究.结果表明:适宜的愈伤组织生长培养基是1/2 MS+琼脂4.5 g/L+蔗糖40 g/L+ZT 0.3 mg/L+2,4-D 2.5 mg/L;适宜的愈伤组织分化培养基是MS+NAA 0.1 mg/L+AgNO30.4 mg/L+琼脂4.8 g/L+蔗糖3.0%+ZT 0.8 mg/L;适宜的无根芽生根培养基是White+蔗糖12 g/L+琼脂5 g/L+IAA1.2 mg/L;试管苗移栽成活率为89.7%;定植成活率为98.2%;定植的试管苗能保持辣蓼铁线莲全部植物学性状.     

百脉根植株高频再生体系的建立

以百脉根的下胚轴为外植体材料,探究不同激素种类和不同浓度对百脉根愈伤组织的诱导、分化增殖及生根的影响.结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为:MS+2,4—D 2.0 mg/L+KT 2.0 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂;诱导愈伤组织分化最佳培养基为:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂;诱导不定芽生根的最佳生根培养基为:MS+NAA 0.01 mg/L+2%蔗糖+0.7%琼脂,生根率达100%;实验建立了一个高频的百脉根再生体系,为百脉根基因工程操作奠定了基础.     

翼柄山莴苣愈伤组织分化及试管苗培养的研究

为保护翼柄山莴苣的野生资源,满足栽培对种苗的需求,以嫩茎为材料,进行了愈伤组织诱导及分化培养、生长芽试管苗培养、试管苗移栽与定植的研究,成功培养了生长旺盛的试管苗。结果表明:MS+琼脂4.6g/L+蔗糖34 g/L+ZT 0.7 mg/L+2,4-D 2.2 mg/L是嫩茎愈伤组织培养的适宜培养基;在光照强度4 000 Lx的条件下,MS+La(NO3)3·6H2O 0.5 mg/L+蔗糖36 g/L+琼脂0.52 g%+IAA 0.05 mg/L是愈伤组织分化培养的适宜培养基;1/3 MS+蔗糖36 g/L+琼脂0.52 g%+IAA 0.05 mg/L+NAA 0.15 mg/L是生长芽试管苗培养的适宜培养基;试管苗移栽成活率为86.9%,定植成活率为97.5%。定植的试管苗保持了野生翼柄山莴苣的植物学性状。     

中间锦鸡儿组织培养体系的建立

以中间锦鸡儿茎段为外植体,建立了它的组织培养体系,具体条件如下:愈伤组织诱导培养基为MS+GA30.15mg/L+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.4mg/L+AC 0.1g/L+蔗糖25g/L+琼脂6g/L,愈伤诱导率达33.33%;丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖25g/L+琼脂6g/L,诱导率为13.33%;诱导生根培养基为MS+IAA 0.5mg/L+GA30.15mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L,生根率达60%;将生根幼苗移至蛭石和营养土体积比为2∶1的基质中,移栽成活率高达100%.     

益母草试管苗愈伤组织培养及其生物碱含量的测定

以种子萌发的试管苗叶片为外植体,采用正交试验探究了其愈伤组织的形成,并测定了其生物碱含量。结果表明:1.5 mg/L 6-BA利于种子萌发,其萌发率最高达26.39%;叶片愈伤组织诱导适宜培养基组合为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+20 g/L蔗糖+7 g/L琼脂,诱导率可达80.00%;适宜愈伤组织增殖激素组合为2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L 2,4-D,增殖率可达88.05%,但各激素组合对愈伤组织生物碱的含量并无显著性差异。     

独蒜兰优质种苗快速培育研究

建立独蒜兰优质种苗快繁体系,为实现独蒜兰植物工业化育苗、保护野生植物资源和发展人工育种技术提供新的途径.本研究从不同基本培养基对独蒜兰种子萌发影响、丛生芽诱导增殖培养和无根苗生根壮苗等方面开展研究.筛选出影响独蒜兰种子萌发的最佳基本培养基为B5,培养30 d统计种子萌发率为92％;丛生芽诱导增殖的最佳培养基为B5+TDZ 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+200.0 mg/L肌醇+2.0 g/L活性炭+20.0 g/L蔗糖,培养60 d丛生芽率诱导率为98.00％,平均产生丛生芽数为6.80个;最佳生根壮苗培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg/L+6-BA 0.1 mg/L+2.0 g/L活性炭+30.0 g/L土豆泥+20.0 g/L蔗糖,培养60 d后统计生根率为100％,平均生根数为3.20条,平均鲜重为21.11 g.     

铁线莲'Multi-Blue'体细胞胚诱导和植株再生

以铁线莲品种'Multi-Blue'的茎尖为外植体,1/2MS为基本培养基,进行胚性愈伤组织和体细胞胚的诱导及植株再生条件的选择.结果表明:茎尖外植体在1/2MS+TDZ(1.0mg/L)+NAA(0.5mg/L)+2%蔗糖+0.7%琼脂的固体培养基中培养时可形成淡黄色块状至颗粒状愈伤组织,经继代培养后可逐渐形成胚性愈伤组织;体细胞胚诱导以1/2MS+TDZ(0.2mg/L)+IBA(0.1mg/L)+ABA(0.3mg/L)+CH(0.5g/L)为佳,诱导率可达96%;而适宜的体细胞胚萌发培养基为1/2MS+6-BA(0.2mg/L)+IBA(0.05mg/L).体胚再生植株经驯化后,移栽成活率可达80%以上.