酶解法去除宣木瓜中单宁酸

采用酶解法去除宣木瓜中的单宁酸。对影响反应的工艺参数如加酶量、酶解温度、时间、和pH进行了研究,确定了最佳工艺条件。结果表明,单宁酶的最佳作用条件为加酶量为0.2g,水解温度30℃,酶解时间40min,pH 4.5,酶解后宣木瓜汁中剩余单宁酸含量可降低为0.390mg/mL。     

乳酸杆菌中单宁酶基因的克隆、表达与纯化

利用基因工程的方法从乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum ATCC14917T)中克隆单宁酶基因,构建重组表达载体pNIC28-Bsa4-tanLpl,转化大肠杆菌(BL21-DE3)进行表达,并对单宁酶进行了纯化及简单的性质测定.亲和层析纯化后单宁酶产量大约为80 mg/L菌液,SDS-PAGE分析在50 kD处有单一的目的条带,用五倍子酸甲酯作为酶的底物对单宁酶性质的研究显示该酶在温度为30℃,pH为8的条件下活性最高(390 U/mg).     

固定化木瓜蛋白酶的制备及其性质

用固定化单宁通过吸附法制备固定化木瓜蛋白酶,研究了固定化的条件和固定化酶的性质、在200毫克固定化单宁加入200单位木瓜蛋白酶、5℃,pH8.5的条件下进行固定化,固定化木瓜蛋白酶活力可达260单位/克固定化酶(湿重)。固定化酶和自然酶的最适pH及最适温度相同,分别为pH6及75℃;但固定化酶的温度及贮存稳定性明显优于自然酶。在室温下用其连续澄清啤酒,使用半衰期为8天。     

大豆蛋白酶解物抗氧化及促进微生物生长研究

研究Alcalase蛋白酶对大豆蛋白的水解作用,通过正交设计确定酶解最佳条件,探讨最佳水解条件下不同酶解时间酶解物的抗氧化性和促进微生物生长的作用.结果表明,酶解最佳条件为:pH 9.0、温度65℃、底物酶量比100 g/mL;酶解90 min的酶解物清除自由基能力最强,酶解30 min的酶解物对酵母菌生长有促进作用,酶解60 min酶解物对酵母菌的代谢作用显著;酶解60、90 min的酶解物对黑曲霉的生长均有较好的促进作用.可见,酶解时间不同,酶解物的抗氧化活性与促进微生物生长作用有差别.     

黑曲霉单宁酶的纯化及部分性质研究

黑曲霉在五倍子单宁的诱导下产生单宁酶。通过（ＮＨ４）２ＳＯ４分形沉淀,ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１５０凝胶过滤,从黑曲霉的发酵液和菌丝中纯化得到凝胶电泳均一的单宁酶。酶作用的最适温度为３０℃,最适ｐＨ值为５．５,在温度１０－３０℃和ｐＨ４－６之间保持稳定,金属离子对单宁酶没有的激活作用,Ｆｅ＾２＋和Ｍｎ＾２＋则对酶有抑制作用。     

胡芦巴半乳甘露聚糖酶法改性的工艺条件

采用正交实验法优选纤维素酶降解胡芦巴半乳甘露聚糖的最佳工艺条件,以黏均分子质量和还原糖得率为指标,考察了酶解温度、酶解时间、酶用量及pH对降解效果的影响.结果表明,纤维素酶降解最佳工艺条件为:酶用量1500U/g,酶解温度50℃,pH 5.0,酶解时间150min,影响降解工艺的主次因素顺序为:酶解温度>酶用量>酶解时间＞pH.所得产物的黏均相对分子质量1.2×105,还原糖得率5.1%.     

酶消化法和匀浆法获得河蟹游离精子的比较研究

在pH 7.4的条件下，以不同的温度（27 ℃,32 ℃,37 ℃,42 ℃和47 ℃）、酶浓度（0.05 %,0.10 %,0.15 %,0.20 %和0.25 %）和酶作用时间（5 min,10 min,15 min,20 min和25 min），通过正交试验，研究了胰蛋白酶消化中华绒螯蟹精荚获得游离精子的最佳反应条件.以每克精荚获得的精子数量为判据，发现酶作用时间是主要的影响因子，其次是温度和酶浓度.酶消化的最适反应条件是：温度为37 ℃，酶浓度为0.20 %，作用时间为5 min.酶消化法与机械匀浆法的比较研究发现，酶消化法从每克精荚中获得的精子量为7.41×108个，显著高于匀浆法，且精子的死亡率为4.75 %，显著低于匀浆法.此外，用人工诱导顶体反应法进一步检测酶消化法以及机械匀浆法所获得精子的顶体反应能力，酶消化法获得精子的顶体反应率为62.3 %，而匀浆法为64.5 %，两者无显著性差异.结果表明，酶消化获得游离精子的方法明显优于机械匀浆法.     

黑荆树皮中缩合单宁的提取

采用微波法、超声波法和高压蒸煮法从黑荆树皮中提取缩合单宁,探索了它们的最佳提取工艺条件,并对这些提取方法进行了比较.实验发现微波法是提取缩合单宁的最佳方法.用IR、UV、TG-DTA分析和XRD分析对微波法在最佳条件下提取的缩合单宁进行了表征.     

不同温度处理对两种木麻黄单宁提取的影响

研究了在不同的烘干温度（40、60、80、105℃）条件下，粗枝木麻黄（Casuarina glauca）和细枝木麻黄（c．cunning-hamiana）中可提取的总酚、可溶态缩合单宁、纤维素结合态缩合单宁、蛋白质结合态缩合单宁含量的变化．结果表明：粗枝木麻黄在60℃时可提取的总酚含量最多；细枝木麻黄在80℃可提取的总酚含量最多．粗枝木麻黄中的可溶态缩合单宁在80℃时有最大提取量；细枝木麻黄中的可溶态缩合单宁在60℃时有最大提取量．两种木麻黄的纤维素结合态缩合单宁和蛋白质结合态缩合单宁含量均随着温度的升高呈上升趋势．本实验为进一步探讨干样中单宁的最适提取条件奠定了基础．     

产单宁酶真菌的筛选及产酶条件

从铁冬青等4种植物的新鲜茎、叶组织中分离得到52株真菌,经平板透明圈法初筛得到18株产单宁酶菌株。初筛所得菌株经液体发酵,显示1株木霉属真菌(Trichoderma viride)(No.MYP07)酶活力最高,达0.248 μmol/(min·mL)。采用单因素结合正交实验,得到菌株MYP07的最佳发酵条件为：单宁100 g/L,蔗糖10 g/L,(NH4)2SO4 3 g/L,装液量为30 mL(250 mL锥形瓶),起始pH为5.0,温度30 ℃,转速140 r/min。在此条件下,菌株MY-P-07发酵48 h酶活力达到0392 μmol/(min·mL)。