直接免疫荧光法分析白血病及骨髓增生异常综合征患者免疫表型

目的 :检测急性白血病 (AL)及骨髓增生异常综合征 (MDS)免疫表型及其临床意义。方法 :用流式细胞仪CD4 5设门直接免疫三标记法 ,检测 4 9例AL及MDS患者免疫表型。结果 :ALL双克隆型 9例 ,其中髓系伴T -ALL 3例 ,髓系伴B -ALL 4例 ,1例为髓系伴T、B标记 (CD13 +CD7+CD19+ ) ,1例同时CD7+CD19+ ;ALL同时表达CD3 4 及HLA -DR最高 (6 0 .0 1%) ,明显高于AML、MDS(P <0 .0 0 5 )。AML双克隆型 2 0例 ,7例为髓系伴CD7+ ,2例髓系伴CD19+ ,11例为同时表达CD3 4 +HLA -DR +。MDS患者骨髓细胞表达髓系成熟抗原CD13 +及CD3 3 +增高 ,未发现淋系抗原的表达。MDS -RAEB、RAEBT及转为白血病病例均高表达CD3 4 及HLA -DR抗原。结论 :用三标记法简便易行 ,提高诊断准确性 ;单抗组合应兼顾髓、淋系同时表达 ;应加胞浆抗原检测。     

Ly+-AML和Ly--AML在FAB和WHO分型中的分布及治疗反应

目的: 探讨伴淋系抗原表达的急性髓细胞白血病(Ly -AML)和不伴淋系抗原表达的急性髓细胞白血病(Ly--AML)在FAB和WHO分型中的分布和它们的治疗反应.方法:117例初发的成人急性髓细胞白血病(AML),用常规瑞氏染色及细胞化学染色对骨髓细胞进行FAB分型,采用白血病免疫分型欧洲协作组(EGIL)积分系统,用单克隆抗体标记,经流式细胞仪对骨髓细胞进行免疫分型.其中115例用G显带技术分析染色体核型,按WHO分型标准进行分型.每个病例用标准方案诱导缓解1个疗程后复查血液学缓解情况.结果:117例FAB分型为AML的病例中,免疫学分型为不伴淋系抗原表达的AML(Ly--AML) 89(76.1%)例,伴淋系抗原表达的AML(Ly -AML)28(23.9%)例.WHO分型中,AML伴有重现性染色体异常在Ly -AML和Ly--AML的发生率分别为23.1%和50.5%(P=0.013).用AML的标准诱导治疗方案1疗程后,Ly--AML患者完全缓解率(CR)69.7%,Ly -AML患者CR率34.6%(P=0.001).结论:白血病细胞免疫分型可客观反映细胞来源及分化阶段, 经标准诱导缓解后,Ly--AML患者CR率高于Ly -AML(P=0.001).     

Hoxa家族基因在白血病中的表达及意义

用流式细胞仪对骨髓细胞进行白血病细胞免疫分型,用RT-PCR方法主要检测了急性白血病样品中Hoxa1-13和Meis1基因的表达.结果表明在所有急性白血病患者中CD45和HLA-DR表达阳性,无T系抗原CD3表达,髓系抗原CD33和CD13阳性比例高(76%),B系抗原CD19阳性率为47%,而CD10和CD20阳性率为24%~29%.在急性白血病中Hoxa9和Meis1表达正相关,Hoxa6和Hoxa2表达大多呈现正相关,Hoxa1和Hoxa3在大多数样品中表达负相关.Hoxa3只在CD19阴性CD7阳性的急性白血病样品中表达.结果提示在急性白血病中Hoxa家族基因的表达异常,具有一定的表达相关性,并且免疫表型具有异质性,免疫抗原与Hoxa基因存在着一定的联系.     

MicroRNA在白血病中的研究新进展

微小RNA(microRNA,miRNA)是在真核生物中发现的一类内源性非编码RNA,其长度为21 ～ 25个核苷酸大小.miRNA在基因表达调控中发挥了重要作用.miRNA不仅在白血病中存在明显的表达失调,而且与白血病的诊断和预后有关.本文着重综述了白血病中急性髓系白血病(AML),急性淋巴细胞性白血病(ALL)和慢...     

急性髓系白血病微小残留病灶检测方法的建立及其应用

目的 依据白血病相关免疫表型的抗原表达规律,建立急性髓系白血病微小残留病灶检测方法.方法 应用多参数流式细胞术对白血病细胞特征性抗原进行检测,所用荧光抗体涵盖了抗原跨系表达、抗原跨阶段表达,并注意抗原过度、过低或缺失表达以及光散射异常等情况,计算白血病细胞占全部检测细胞百分率,即MRD检测量.结果 23例患者抗原不同步表达CD33\CD13\CD15\CD34\CD45的抗体组合应用最多,占56.52％(13/23);CD33\CD13\CD15\CD117\CD45的抗体组合占21.74％(5/23).抗原跨系表达的抗体中CD33\CD13\CD19\CD34\CD45和CD33\CD13\CD7\CD34\CD45比例相对较少,分别为17.39％(4/23)和4.35％(1/23).生存期大于2 a的患者MRD数值明显低于生存期小于2 a的患者,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 急性髓系白血病微小残留病灶检测是临床预后判断的重要参考指标.     

嵌合抗原受体T细胞疗法的研究进展及在急性淋巴细胞白血病中的应用

嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞)疗法是使用基因转移技术重新编程内源性T细胞以针对特定的肿瘤抗原。随着不断的研究和CAR-T细胞的不断优化,CAR-T细胞疗法被越来越广泛的用于各种肿瘤的治疗,其中也包括血液恶性肿瘤。急性淋巴细胞白血病(ALL)的治疗主要包括造血干细胞移植以及化疗,但复发/难治性急性淋巴细胞白血病(R/R ALL)仍然是一个难题,而CAR-T细胞疗法被研究表明对R/R ALL的治疗有着可观的疗效。文章就国内外CAR-T细胞疗法以及应用于ALL中的研究进展进行综述,为ALL的临床治疗提供参考。     

流式细胞术微球阵列法检测急性白血病血清IL-6、IL-10和TNF水平

目的:探讨流式细胞术微球阵列法(CBA)在细胞因子检测中的应用及血清肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素10(IL-10)在不同亚型急性白血病(AL)中的表达水平.方法:采用BD CBA Flex Set IL-6、IL-10、TNF试剂盒和流式细胞术检测29例急性白血病患者和20例正常人血清样本中3种细胞因子水平.结果:AL患者IL-6、IL-10和TNF水平显著高于正常对照组,急性淋巴细胞白血病(ALL)的IL-10和TNF水平较急性非淋巴细胞白血病(ANLL)有显著性提高(P<0.05).在ANLL亚型中,Ml型IL-6水平最高.结论:CBA法能快速、准确地定量检测细胞因子;AL血清中IL-6、IL-10和TNF水平升高,可能与疾病的发生发展存在相关性.     

血小板输注疗效影响因素探究及其与预后的关系

目的:研究影响急性白血病患者血小板输注疗效的相关因素,探究输注疗效对患者预后的影响.方法:对中山大学附属第一医院血液内科113例急性白血病(AL)患者预防性输注的1 921次血小板的影响因素进行分类分析,并依据血小板增加指数值(CCI),将患者分为血小板输注有效组和无效组,对无效组及有效组患者进行预后分析.结果:血小板输注疗效与患者起病时的血象、脾脏大小有关,而与患者的年龄、性别、血型、疾病类型等并无统计学差异.无效组患者死亡率(45.2%)高于有效组患者(25.8%),且有统计学差异(P0.05).急性淋巴细胞白血病(ALL)患者无效组中位生存期(10.4月)远低于有效组(17.2月),具有统计学差异(P0.05),急性髓系白血病(AML)患者无效组及有效组中位生存期均未到达,两组无统计学差异(P0.05).结论:起病时伴有贫血(血红蛋白质量浓度60 g/L)、血小板降低(血小板计数20×10~9/L)、白细胞升高(白细胞计数50×10~9/L)等血象异常的急性白血病患者更易发生血小板输注无效,血小板输注无效的患者的疾病预后差于输注有效的患者.     

血常规指标的变化特征和散点图异常对白血病的诊断价值

探讨血常规指标在白血病诊断中的应用价值。选取2018年6月～2019年6月在甘肃省中医院确诊为白血病的128例患者为观察组,急性早幼粒细胞白血病(AML-M3)27例,急性淋巴性白血病(ALL)25例,其他急性髓细胞白血病(AML)76例,选取同期入我院体检的100例健康人群作为对照组。比较两组血常规指标,统计观察组患者血细胞数目和形态异常情况,对其血常规检测结果及散点图进行综合分析。观察组白细胞计数、红细胞计数均较对照组升高,血小板计数较对照组降低(P0.05)。观察组白细胞异常率为98.44%(126/128),红细胞异常率为25.78%(33/128),血小板升计数异常率为70.31%(90/128)。血涂片检查显示白细胞异常率为96.88%(125/128),红细胞异常率为15.63%(20/128),血小板异常率为17.97%(23/128),血细胞形态异常率达98.44%(126/128)。对照组血常规散点图共有5个区域,五分类有其固定区域;AML-M3患者散点图可见全血细胞不能分类的灰区,单核细胞群明显增多等变化;ALL患者散点图可见淋巴细胞与单核细胞群重叠,有淋单切迹、淋巴细胞群增多、淋巴细胞群朝上移位等变化;AML患者散点图可见区域间模糊不清,出现颗粒团重叠、切迹或单核细胞群朝上移位显示占比升高等变化。观察血常规指标和散点图异常情况可为白血病的诊断提供重要依据。     

Elf-1基因在急性髓细胞性白血病中的表达情况

目的:建立实时定量PCR检测Elf-1基因表达水平的方法,了解急性髓细胞性白血病(AML)患者外周血Elf-1基因表达水平.方法:采用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR和相对定量分析法检测33例AML患者:M2型17例、M3型6例、M5型10例和20例健康人外周血的单核细胞的Elf-1表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用公式2~(-△Ct)×100%计算Elf-1基因表达水平.结果:AML组Elf-1表达水平(13.518±19.197)%明显高于健康对照组(2.044±1.321)%(P<0.01),不同AML亚型之间Elf-1的表达水平没有显著性差异(P=0.52),但各亚型AML的Elf-1的表达水平均与健康对照组比较均有显著性差异(P<0.01).结论:建立SYBR Green Ⅰ荧光实时定量PCR分析外周血Elf-1表达水平的方法,检测急性髓细胞性白血病Elf-1基因高表达情况.     

白血病G6PD蛋白表达的研究

目的:观察白血病患者骨髓中白血病细胞葡萄糖-6磷酸脱氢酶(G6PD)蛋白的表达情况,探讨G6PD与白血病的关系。方法:应用免疫组化方法检测35例白血病患者和35例非恶性血液病患者骨髓组织标本中白血病细胞G6PD蛋白的表达,比较白血病患者和非恶性血液病患者G6PD蛋白表达率的差异。结果:G6PD蛋白在白血病骨髓组织白血病细胞中呈现弱阳性表达。35例白血病患者骨髓组织中G6PD蛋白阳性表达率为25.7%(9/35),而35例非恶性血液病患者骨髓组织中G6PD蛋白阳性表达率为2.9%(1/35),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:白血病可能存在G6PD蛋白的表达上调,值得进一步研究。     

错配修复基因hMSH2在肺癌组织中的表达及意义

目的研究人类错配修复基因hMSH2在肺癌组织中的表达及意义.方法运用免疫组织化学SP法对56例肺癌组织中hMSH2的表达进行检测;统计学处理采用2检验或Fisher's精确概率法.结果56例肺癌组织中有16例hMSH2表达阳性(28.6%),分化程度越低阳性率越低(P<0.01);有淋巴结转移者hMSH2阳性率低于无淋巴结转移者(P<0.05);不同病理组织学类型之间hMSH2表达无显著差异(P>0.05).结论hMSH2基因的缺陷可能参与了肺癌的发生发展过程并与分化程度及有否淋巴结转移有关.     

云南怒族八种红细胞血型抗原调查分析

目的 :了解云南怒族ABO、Rh、MN、P、GPC、GPA、KeLL、Wrb血型系统抗原分布情况 ,为解决临床输血及人类学、遗传学、分子生物学提供理论依据。方法 :在怒族自然村采用随机抽样调查128人 ,进行血清学检测定型的方法。结果 :云南怒族ABO血型系统中表现型A>O>B>AB ;基因频率r>p>q。Rh血型系统中Rh( -D)阴性率占4 69 % ,d基因频率为0 2165 ,分布较高于我国各民族(除新疆维吾尔族外) ,该民族表现型CCDee居多 ,占31 25% ,其分布特征为CCDee>CcDee>CcDE>ccDE>ccdee>ccDee。MN血型系统中表现型M>MN>N ;基因频率m>n,该系统中的Mur抗原阳性率特别高为22 65%(29/128) ,与上海汉族阳性率为0 66%(6/900)相比 ,怒族Mur抗原分布明显高于汉族Mur抗原。P血型系统中基因频率P2(0 7552)>P1(0 2448) ;GPC、GPA、KeLL、Wrb血型皆为阳性。结论 :不同民族的血型抗原存在一定的差异性 ,怒族的血型分布有自己的特点。     

ELISA检测姜片虫病患者抗体的研究

研究了姜片吸虫成虫冷浸抗原检测姜片吸虫病患者血清抗体的敏感性和特异性及其在流行病和临床上的应用价值．超声粉碎制备姜片吸虫成虫冷浸抗原．以评价ELISA法检测姜片虫病血清抗体的敏感性、特异性和交叉反应性．按常规ELISA方法操作，目视与酶标仪判断结果．普查2189人中姜片吸虫卵阳性者168例；168例中165例ELISA阳性，ELISA与改良加藤法的阳性符合率98．21％；健康居民血清147份，阳性6份，阳性率4．08％；与血吸虫病交叉阳性为9．38％，肺吸虫病交叉阳性为5．36％．姜片吸虫成虫冷浸抗原1：3500工作浓度包被酶标板，检测姜片虫病血清抗体具有敏感性高、特异强和交叉反应率低的特点．     

骨髓涂片检测急性淋巴细胞白血病微小残留病的意义

为了建立一种简便、快速的微小残留病的检测方法,采用聚合酶链反应技术,选择３年内的急性淋巴细胞白血病骨髓涂片标本,进行免疫球蛋白 Ｉｇ Ｈ 和 Ｔ 细胞受体ｒ 链基因重排的检测．其结果１８ 例初诊病例的骨髓涂片标本中, Ｉｇ Ｈ 阳性率７２ ．２ ％ ,与初诊骨髓液标本的 Ｉｇ Ｈ 阳性率７３ ．７ ％ 对比基本一致［１］ ．说明骨髓涂片能进行微小残留病的检测,这对于临床考察急性淋巴细胞白血病的缓解和预测其早期复发均具有一定的临床意义     

肺癌患者BALF细胞端粒酶活性检测的诊断意义

目的 :对支气管肺癌患者经纤维支气管镜行支气管肺泡灌洗并检测回收液中细胞端粒酶的活性 ,评估端粒酶活性检测对支气管肺癌诊断的临床应用价值。方法 :临床确诊支气管肺癌 15例 ,其它良性非肿瘤性病变 15例 ,除了常规的影像学检查外 ,均行常规电子支气管镜检查并作支气管肺泡灌洗收集回收液 ;采用TRAP -PCR -ELISA测定回收液中端粒酶活性 ;评价端粒酶活性诊断的效能并比较其和临床确诊、支气管镜诊断的两两关系。结果 :15例肺癌患者中端粒酶活性阳性 11例 ,阳性率 73% ,漏诊 4例 ,漏诊率 2 7% ;良性病变中端粒酶活性阳性 3例 ,误诊率 2 0 % ;诊断的敏感性和特异性分别为 73%和 80 % ,阳性预测值和阴性预测值分别为 78%和 75 % ,阳性似然比和阴性似然比分别为 3.6 5和 0 .338,诊断正确率为 77% ,阳性优势比为 3.5 5 ,Youden指数J值为 0 .5 3。端粒酶活性和临床确诊比较 χ2 =0 .14,P >0 .0 1;端粒酶活性和支气管镜诊断比较 χ2 =0 .5 ,P >0 .0 1。结论 :支气管肺泡灌洗液中端粒酶的检测可作为临床诊断支气管肺癌的一项辅助手段     

急性白血病患者血管内皮生长因子含量的测定及意义

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）与急性白血病（AL）诊断及预后的关系.方法应用定量酶联免疫吸附实验测定25例不同病期AL患者（10例初诊未治、10例完全缓解期、5例复发患者）和9例正常对照者血清中VEGF的质量浓度.结果初诊未治、复发AL患者的VEGF含量高;完全缓解患者的VEGF质量浓度下降;VEGF高者完全缓解...     

急性白血病化疗后骨髓组织印片与涂片的同步观察

目的：探讨急性白血病化疗后骨髓增生程度的判断及残留白血病细胞分析的更为有效的方法。方法：常规髂后上嵴骨髓穿刺涂片，用环钻法获取骨髓组织制成印片，印片与涂片同时进行染色并进行细胞分类计数及形态观察。结果：在有核细胞增生程度及白血病细胞分布和数量的观察上，骨髓印片优于涂片检查。结论：骨髓涂片与印片同步观察是判断急性白血病化疗后骨髓增生程度及白血病细胞残留情况分析的有效方法，骨髓组织印片可作为常规检查方法以弥补涂片检查的不足。     

运动一组胺激发试验对支气管哮喘的诊断价值

目的探讨运动-组胺激发试验(EHIA)对支气管哮喘的诊断价值。方法对20例健康者、118例支气管哮喘、22例过敏性鼻炎、24例慢性支气管炎患者进行运动-组胺激发试验,并与单纯运动激发试验及组胺激发试验进行比较。结果运动-组胺激发试验对哮喘患者的诊断阳性率达97.4％,特异性100％,且EHIA阳性所吸入的组胺量也反映了哮喘患者非特异性气道高反应性。结论运动-组胺激发试验对提高早期或非典型支气管哮喘的确诊具有应用价值。     

日本血吸虫病与乙肝病毒感染的关系

目的 :研究日本血吸虫病与乙肝病毒 (HBV)感染间的相互关系。方法 :通过体检、直肠镜、B超等方法诊断慢性 (慢血 )及晚期血吸虫病人 (晚血 ) 2 16例 (慢血 118例 ,晚血 98例 )。所有病人用乙肝血清标志物试剂盒检查血清标志物。结果 :2 2 .2 % (48例 )的病人血清标记物阳性 ,其中慢血 HBV感染率为 14.4% ,晚期血 HBV感染率为 31.6 % ,41～ 5 0岁年龄组 HBV感染率高达 5 0 %。18.1% (39例 )的病人 Hbs Ag阳性。结论 :血吸虫病人 HBV感染率明显高于自然人群。血吸虫病合并肝硬化的病人 HBV感染率明显高于非肝硬化病人。血吸虫病与 HBV感染间的关系在于血吸虫病人免疫机能受损使易感性增高 ,而乙肝病毒又可促进血吸虫病人肝脏纤维化。