陆地棉基因转移技术研究初报

应用农杆菌菌株Ａｔ４４０４携带抗卡那霉素基因（氨基葡萄糖磷酸转移酶）、Ｇｕｓ基因（葡萄糖苷酸酶）以及Ｂ．Ｔ毒蛋白基因，对陆地棉４个不同栽培品种鲁棉６号、鲁棉１０２４、中棉１２、中棉１９的无菌苗下胚轴和茎尖分生组织区作基因导入的研究，获得转基因的棉花试管苗．在以胚轴作为转化体系的培养过程中，只有鲁棉６号经过了愈伤组织发生、胚状体形成及植株再生途径．若以３～５ｄ的无菌苗芽顶端分生组织作为转化体系，经转化的茎尖分生组织培养在无激素或低浓度激素的ＭＳ培养基上，则可较容易地从多个品种中获得转基因的再生植株．以此方法进行基因转移，时间短、方法简便、不受品种来源及基因型的限制．这一技术将有利于提高棉花转基因植株的成活率     

转基因抗虫棉与抗逆有关的生理特性

为了确定转基因抗虫棉与常规棉生理生化特性的差异,分别对转Bt基因抗虫棉鲁棉研17和新棉33B以及常规棉品种DGL99102和中棉所12号的幼苗期的POD活性、SOD活性、蛋白质含量、游离氨基酸含量、MDA含量、光合色素含量进行比较分析。结果表明：转基因抗虫棉在同样生长条件下其POD和SOD活性均高于常规棉,并且其MDA...     

农杆菌介导Barnase基因转化番茄

以雄性不育基因barnase作为目的的基因、抗除草剂溴苯腈的bxn基因作为选择标记基因，利用下胚轴和子叶做外植体与农杆菌共培养方法，在番茄的两个品种佳粉1号和佳粉15号中，分别获得38和15株溴苯腈的抗性株，PCR检测结果表明，抗生株含barnase基因，且抗性株的花粉完全丧失活力，证实所得的溴苯腈抗性株为转Barnase基因番茄。     

转Bt基因抗虫棉杂交种成铃分布及棉铃发育动态的研究

在同等肥力条件下，对转Ｂｔ基因抗虫棉照样泗棉３号Ｆ１、Ｆ２代种、苏棉６号Ｆ１、Ｆ２代种与对照泗棉３号、苏棉６号进行了棉铃发育的研究。结果表明：（１）抗虫棉Ｆ，代优质桃比例高于对照。Ｆ２代低于对照：成铃比例玮对照趋势一致，即中部〉下部〉上部，内围〉外围。（２）在棉铃发育性状上，Ｆ１代杂交优热明显，长度、横径、体积都 对照，Ｆ２代则表明有一定退化；（３）单铃籽棉重及籽棉产量均表现为Ｆ１代高于对照，Ｆ２     

用根癌农杆菌介导法建立抗真菌病害油菜育种体系的研？…

用含β－１,３－葡聚糖酶和几丁质酶串联基因双价载体质粒ｐＢＬＧＣ的根癌农杆菌侵染甘蓝型油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａｎａｐｕｓ）带柄子叶和下胚轴的方法,初步建立了抗真菌病害油菜高效基因转化育种体系,研究了不同种类和不同深度伯激素对带柄子叶和下胚轴不定芽诱导的影响,试验结果表明卡那霉素（ｋａｎ）筛选,含６ｍｇ／６－ＢＡ的ＭＳ培养基中带柄子的叶的出苗率及绿苗分化率最高,分别为１００％和２５％,下胚轴在含１ｍｇ     

用根癌农杆菌介导法建立抗真菌病害油菜育种体系的研究初报

用含β－１,３－葡聚糖酶和几丁质酶串联基因双价载体质粒ＰＢＬＧＣ的根癌农杆菌侵染甘蓝型油菜（Ｂｒａｓｉｃａｎａｐｕｓ）带柄子叶和下胚轴的方法,初步建立了抗真菌病害油菜高效基因转化育种体系．研究了不同种类和不同浓度的激素对带柄子叶和下胚轴不定芽诱导的影响,试验结果表明经卡那霉素（ｋａｎ）筛选,含６ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ的ＭＳ培养基中带柄子叶的出苗率及绿苗分化率最高,分别为１００％和２５％;下胚轴在含１ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ和０．１ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的ＭＳ培养基中出芽率及绿苗分化率最高,分别为１００％和２３％．绿苗在含５０ｍｇ／Ｌｋａｎ的诱根培养基中培养后移栽于花盆,套袋自交,自交种子所得无菌苗的带下胚轴子叶再经含５０ｍｇ／Ｌｋａｎ的ＭＳ培养基筛选培养,结果小苗全部生根成活,初步证明目的基因已转入油菜植株中,经诱导不定芽阶段和生根阶段两次ｋａｎ筛选是有效的     

理想,在如雪的海洋里沸腾

李汝忠，从事棉花遗传育种研究20多年。他先后参加或主持完成了国家“六五”至“九五”棉花育种攻关、“十五”国家“863”及其他10多项省部级以上重大课题研究。先后参加和参与主持选育出了鲁棉9、10、11号，主持选育出了鲁棉研15、19、21号等多个棉花新品种。有的已分别获省科技进步二、三等奖、省农科院科技进一等奖和全国农牧渔业丰收一等奖，有的目前正在生产上大面积推广应用。他主持研究的抗虫杂交棉鲁棉研15号，被誉为是山东省继鲁棉1号之后的又一表现突出的棉花新品种，代表了国内外杂交棉育种的最高水平。平静，当记者很少见到的那种平静出现在李汝忠脸上的时候，没有丝毫的惊奇，在记者看来，这一切都显得那么朴实和自然，就像外貌平实的棉桃里充盈着雪白的棉絮一样，因了它的真实的内在而释放出光彩……     

抱茎獐牙菜愈伤组织的诱导与初步培养

本文报道了以抱茎獐牙菜（Ｓｗｅｒｔｉａ ｆｒａｎｃｈｅ ｔｉａｎａ Ｈ．Ｓｍｉｔｈ）的胚轴、未成熟种子和幼叶作外植体，在２，４－Ｄ加有６－ＢＡ的ＭＳ、Ｂ５．Ｎ６三三种培养基上诱导出愈伤组织的实验结果。结果表明，在上述三咱培养基中加有２．４－Ｄ３ｍｇ／Ｌ和６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基诱导率最高，胚轴为１００％，未成熟种子为９８．４％，幼叶为２９．３０％。这一结果，对抱茎獐牙菜组织培养的选材具有     

影响花生下胚轴丛生芽再生因素的研究

以花育22号成熟种子萌发后的下胚轴为外植体，分析了激素配比、外植体萌发日龄、AgNO3、NAA以及不同基因型对花生下胚轴植株再生的影响．结果发现，MS＋6-BA（12mg/L）＋NAA（0．8mg/L）的组合对下胚轴芽的分化较好，萌发4～5d的外植体用于丛生芽诱导较佳，3mg／L的AgNO3可提高下胚轴芽的分化率并有效减轻下胚轴的褐化，1mg/L的NAA利于组培苗生根，组培苗移栽后能正常开花、结实．不同基因型花生的芽诱导率存在差异．     

大白菜组织培养

介绍在MS基本培养基中分别添加KT或ANN或AgNO3成份，组合成3种培养基，进行大白菜(B.pekinensis)“早熟五号”子叶及下胚轴愈伤组织的诱导，确定了适合该白菜品种子叶和下胚轴最优化愈伤组织培养的培养基。     

HD2基因调控拟南芥下胚轴发育的功能研究

为探究组蛋白去乙酰化酶HD2基因在拟南芥下胚轴发育中的调控作用,本研究采用野生型（Col-0）、HD2突变体以及过表达植株为材料,研究其在1/2MS以及1/2MS+100 mmol/L甘露醇培养中下胚轴的表型特征,并结合转录组测序数据进一步分析. 实验结果显示,四种过表达株系下胚轴长度较Col-0长,伸长百分比为7.1%～19.5%,差异显著;甘露醇处理后,过表达植株下胚轴较Col-0更长,伸长百分比为14.6%～32.8%,差异更加显著,缩短幅度也更小. hd2a/hd2b和hd2a/hd2c双基因突变体植株在有无甘露醇时,下胚轴长度均显著短于Col-0,但干旱胁迫后变短幅度无明显增加. 转录组数据揭示,HD2基因调控光合系统响应基因影响植株暗形态建成反应,从而影响下胚轴发育. 甘露醇处理后,HD2基因诱导产生非生物刺激响应因子,帮助下胚轴抵抗不良环境. 综上所述,HD2基因在拟南芥下胚轴发育中承担重要调控作用.     

草莓不同基因的再生能力比较

为选择 生能力较好的草莓品种并建立基因转化受体系统，本试验对草莓４个栽培品种Ｈ６、哈尼、明晶，长虹１号进行了基因型筛选。结果表明，在这４仃品种中，明晶的再生能力最强，长虹１号次之，Ｈ５与哈尼的再生系统则不易建立。     

番茄基因转化研究初报

番茄子叶及下胚轴切段能被含ｎｐｔ－Ⅱ基因和ｍｔｌＤ基因的根癌农杆菌感染，目前已获Ｋａｎ￣ｒ的愈伤组织     

花生再生和转化体系的初步研究

以4d龄的泉花10号花生小叶伤为外植体，从25种培养基中筛选出MS＋AgNO3(1.0) 6-BA5.0 NAA2.5培养基为最佳长芽点培养基，MS＋AgNO3(1.0) 6-BA5.0 NAA1.0培养基为最佳长愈伤组织培养基；以4d龄小叶，子叶，胚轴，及子叶与胚轴相连处为外植体在MS＋AgNO3(1.0) 6-BA5.0 NAA2.5培养基上培养，结果小叶是诱导长芽的最佳外植体；研究还发现儿茶酚对农杆菌侵染力有较大的影响。     

水稻线粒体atp6基因的克隆及其结构分析

以玉米线粒体ａｔｐ６基因为探针所作的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂文结果显示，水稻野败型细胞质雄性不育系与其保持系（珍汕９７Ａ，Ｂ）的ａｔｐ６基因存在结构上的差异。不育系只有一个ａｔｐ６基因拷贝，而相应的保持系却有两个拷贝．从保持系线粒体ＤＮＡ的Ｌａｍｄａ ＥＭＢＬ３基因文库中筛选出了以上两个ａｔｐ６基因克隆，并根据制作的物理图谱将它们分别定位在２．７５ｋｂ的ＰｓｔＩ／ＰｖｕⅡ和１．６３ｋｂ的Ｓａｌ／ＥｃｏＲ     

蓝光抑制har1中胚轴伸长中ABA含量和相关基因的表达变化

分析了蓝光介导的高粱航空诱变突变体har1中胚轴伸长抑制过程中,蓝光信号途径关键组分基因SbCRY1 b、SbCOP1和SbHY5的表达水平变化,研究表明,har1对蓝光的超敏感可能与其中SbCRY1 b表达水平升高有关.外源ABA增加了蓝光对R111中胚轴的伸长抑制程度,抑制剂NAP(Naproxen)在一定程度上可以缓解蓝光对har1中胚轴的抑制.同时,蓝光处理后har1中胚轴中内源ABA含量增加程度较R111更为显著,初步表明ABA参与蓝光介导的高粱幼苗中胚轴伸长抑制反应.     

播娘蒿子叶及下胚轴诱导再生植珠的研究

用播娘蒿种子，在附加６－ＢＡ０．５～１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上获得无菌苗，幼苗的下胚轴在含６－ＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上出愈情况最佳，将来自下胚轴的愈伤组织培养于含有６－ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上分化出的丛生芽状态最好，最佳生根培养基为１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ．     

陆地棉显性无腺体品系与常规品种间杂种优势利用研究 Ⅱ.配合力分析

以７个显性无腺体品系和４个常规品种（系）为材料，按ＮＣⅡ设计，对２８个组合的杂种Ｆ１进行分析，结果表明，１１个性状中，株高、衣分、纤维长度和马克隆值主要受基因加性效应控制，而籽棉产量、皮棉产量、单株铃数、铃重、籽指等同时受基因的加性和非加性效应控制。显无０７３是丰产的显性无腺体品系，而显无２６０是较好的优质品系，组合显无０７３×泗棉２号在重要性状上表现较好。     

利用基因枪法向高羊茅导入bar基因的研究

利用基因枪法,以bar基因转化高羊茅(Festuca arundinacea Schreb.)的下胚轴愈伤组织,对获得的再生植株进行的PCR检测和点杂交分析表明,外源bar基因片段已经整合至高羊茅基因组中.同时,对转基因植株进行的草丁膦涂抹实验发现,转基因植株对除草剂的耐性提高.     

对BR促进绿豆上胚轴生长的有关因素的探讨

本文研究了绿豆的种质差异、光照、真叶和下胚轴与ＢＲ促进的绿豆上胚轴生长的关系。发现绿豆品系的差异显著地影响上胚轴对ＢＲ的响应；ＢＲ可抵消光对上胚轴生长的抑制作用；真叶和下胚轴可显著地影响ＢＲ促进的上胚轴的生长；ＢＲ不能促进已停止生长的、发育成熟的下胚轴细胞的伸长，但可促进下胚轴中ＲＮＡ的大量合成，主要是ｒＲＮＡ的合成，对ＤＮＡ和ｍＲＮＡ的合成没有影响。认为下胚轴增加ＢＲ促进的上胚轴的伸长作用与ＲＮＡ在下胚轴中大量地合成有关。