绿豆胰蛋白酶抑制剂与猪胰蛋白酶复合物三方晶体的晶体生长和初步结晶学研究

丝氨酸蛋白酶抑制剂广泛存在于植物、动物组织以及细菌中,尤其在植物的贮藏器官和组织(种子和根茎)中含量较高。按照Laskowski和Kato按抑制药中二硫桥的排布,它们可分成10类。其中Kunitz型抑制剂,Kazal型抑制剂以及链霉素枯草杆菌酶型抑制剂的立体结构均已报道。它们的立体结构以及它们与相应的酶的复合物立体结构的研究加深了人们对蛋白质分子之间相互作用的本质以及酶催化机理的理解。     

尿胰蛋白酶抑制剂的空间结构预测

尿中的胰蛋白酶抑制剂(urinary trypsin inhibitor,简称UTI)是丝氨酸蛋白酶抑制剂的一种,存在于人类的尿液中,可抑制胰蛋白酶、弹性蛋白酶等多种蛋白酶的活性,是治疗急性胰腺炎的特效药。迄今为止,UTI的三维结构仍属未知。它是一种糖蛋白,含糖量高达50％,同时,它也是一种双结构域蛋白,它的结构信息对于我们研究蛋白质结构域间的相互作用也极有益。鉴于UTI重要的生物学功能以及特殊的结构意义,我们对UTI的空间结构进行了预测,所用的方法是已被众多结构生物学家认可的同源结构预测法,它的基本思想是:蛋白质的空间结构比一级序列更为保守。     

豇豆胰蛋白酶抑制剂抗虫转基因烟草的获得

主要农作物、园艺作物以及林木由于受到多种害虫的严重危害,造成巨大的经济损失。即使每年喷洒大量农药,也不能得到有效控制。害虫易产生抗性,而且造成严重的环境污染。因此,培育广谱抗虫的作物有重要的现实意义。植物蛋白酶抑制剂是一类天然的抗虫物质。与     

底物对醛缩酶被胰蛋白酶消化时的保护作用

曾经有人观察到醛缩酶的底物果糖-1,6-二磷酸(FDP)能保护酶活力不受胰蛋白酶消化的影响,其他若干同系物也有类似的保护作用,但关于保护的条件和机制,至今末见报导。我们对用胰蛋白酶消化醛缩酶时的底物保护作用以及醛缩酶结构和活力的关系,特别是对在底物保护下经胰蛋白酶处理过的醛缩酶和天然醛缩酶在结构上的异同,     

绿豆胰蛋白酶抑制剂Fe-S络合物的穆斯堡尔谱研究

Mortenson等人在1962年命名了铁硫蛋白为铁氧还蛋白。近年来,这些蛋白质引起了广泛的注意,因为这些蛋白质参予了生命过程中所有的氧化还原反应。是一种人们正在努力探索,但还未完全搞清楚的电子传递体。我们采用合成的方法,模拟自然界的植物型铁氧还蛋白(2Fe-2S)。所用的配体是绿豆胰蛋白酶抑制剂。它是一种从绿豆中分离纯化、对热和酸稳定的小分子量酸性蛋白质的结晶,分子量约为8900,由73个氨基酸组成,含有7对S—S键。     

植物抗虫基因工程中大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制基因的研究

主要农作物、林木以及园艺植物由于受到多种害虫的危害,造成了较大的经济与营养损失.目前,普遍采用化学杀虫剂控制害虫的危害.这在一定程度上破坏了生态平衡,且造成了环境污染.另一个更为严重的问题是,由于长期施放农药,害虫已逐步对其产生抗性,有些害虫已达到很难用药物控制的程度.因此,利用植物抗性基因工程培育广谱高抗虫     

绿豆胰蛋白酶抑制剂及其酶复合物的晶体生长和X-射线晶体学参数测定

绿豆胰蛋白酶抑制剂属于Bowman Birk类抑制剂,MW约8000,有7对二硫键,其一级结构已经测定。它有两个活性区域,活性中心分别为Lys-Set及Arg-Ser,可以以1:2或1:1的克分子比和胰蛋白酶络合。经胃蛋白酶降解后的两个活性片段也已分离提纯。这一切为开展X-射线晶体结构测定提供了有利条件。在以往对绿豆抑制剂及其酶复合物能形成晶体     

绿豆胰蛋白酶抑制剂Fe-S配合物的穆斯堡尔谱研究(二)

在前文的报道中,我们采用了小分子量的酸性蛋白质——绿豆胰蛋白酶抑制剂为配体,人工模拟了天然植物型(2Fe-2S)铁氧还蛋白。用穆斯堡尔效应对这种模拟物Ⅰ进行了研究,在室温下就得到了很好的穆斯堡尔谱:有两组双峰,一组我们称之为S峰,一组我们称之为C峰。模拟物IS峰的Q.S.值及I.S.值与天然植物型Fd(2Fe-2S)的穆斯堡尔谱参     

猪胰凝乳蛋白酶与胰蛋白酶的若干种复合物的晶体生长和初步的晶体学研究

胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶的晶体结构是研究得较早、较清楚的蛋白质结晶学成果之一。1970年Stroud等人解出了分辨率为2.7的牛胰蛋白酶的三维结构。1972年Birktoft等人发表了2分辨率的牛胰凝乳蛋白酶的结构数据。1974年Janin等人报道了猪胰蛋白酶的研究成果。这些成果对确定这两种酶的活性中心,探索它们的高效高选择性的催化机理以及关于蛋白质分子的进化等方面的研究起了巨大的推动作用。使人们从分子水平上了解了丝氨酸蛋白酶,为研究酶学理论及分子的进化提供了宝贵的资料。