MAP激酶介导ABA诱导的H_2O_2产生调节水稻幼根生长

本文利用蛋白激酶抑制剂PD98059和H2O2荧光探针H2DCF-DA,探索MAP类蛋白激酶和H2O2在调节ABA抑制水稻幼根生长中扮演的角色及其可能的作用关系.结果显示,ABA以浓度依赖性抑制水稻幼根生长,明显诱导H2O2在伸长区积累.外源H2O2处理可有效模拟ABA抑制水稻幼根生长,该结果暗示,H2O2可能位于ABA下游,参与调节水稻幼根生长.蛋白激酶抑制剂PD98059处理,明显缓解ABA诱导的H2O2产生和对水稻幼根生长的抑制;并逆转ABA诱导的过氧化氢酶(CAT)活力上升.这些结果表明MAP类蛋白激酶通过调节根中H2O2的产生介导ABA调节的水稻幼根生长.     

NO对GA_3延缓蒜苔衰老的影响

实验采用GA3、SNP、GA3+L-NAME、GA3+Na2WO4、GA3+HB处理离体蒜苔基部,定期测定苔苞直径、可溶性总糖、抗氧化酶活性、膜透性、H2O2等指标,研究GA3、NO在蒜苔衰老细胞内含物转运中的生理作用.结果表明:GA3和NO均可抑制苔苞直径增大;提高超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性,顶部POD、CAT活性;抑制基部过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性、H2O2和可溶性糖含量下降以及膜透性的升高;清除NO或抑制内源NO来源的任何一条途径均对GA3和NO的作用结果有影响,由此表明GA3延缓蒜苔物质转运可能通过NO起作用.     

层积和激素处理对大旺山楂种子的生理生化影响

对栽培品种大旺山楂种子进行层积处理,并分别用200 mg/L GA3和ABA处理层积后的种子,测定层积不同阶段和激素处理种子的生理生化变化。结果表明,大旺山楂种子休眠期长,正常采收的成熟种子层积一个冬天难以解除休眠。层积处理使山楂种子的细胞膜透性增加,呼吸加强,SOD和CAT活性增加,POD,G6PDH和PAL活性降低,总糖、还原糖、可溶性蛋白质和游离氨基酸含量降低。GA3处理促进种子萌发,并使种子CAT,SOD,POD,G6PDH和PAL活性降低,而ABA处理抑制种子萌发,除了使SOD活性降低外,对其余各酶的影响与GA3的作用相反。     

脱落酸对水稻根系生长素合成与运输的调控

利用一系列不同浓度的脱落酸(ABA)处理水稻幼苗根系,观察水稻初生根根长、冠根数目、侧根数目及长度、DR5::GUS转基因材料GUS活性、生长素的合成及运输相关基因表达水平等变化.结果表明,ABA可以抑制水稻初生根的伸长、冠根和侧根的发生和伸长,并且抑制效应呈现剂量效应.DR5::GUS活性在整个根系中随ABA处理浓度升高而减弱,但根尖部位的DR5::GUS活性经过ABA处理后表现增强;生长素合成相关基因YUCCA2、YUCCA4、YUCCA7,生长素运输载体基因AUX3、AUX5、PiN1b、PiN2、PiN5a、PiN9、PiN10a均显著下降表达.     

Cd~(2+)对玉米根抗氧化酶活性和丙二醛含量的影响

采用水培方法研究不同浓度(0,15,30,50,70,100 mg/L)Cd2+对玉米根超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量的影响.结果表明:低浓度的Cd2+能提高玉米根SOD、POD和CAT的活性;高浓度Cd2+对它们的活性却有不同程度的抑制作用;玉米根中的MDA含量与Cd2+浓度有关并随其浓度的增加而增加.     

胰高血糖素样肽-1改善过氧化氢诱导的血管内皮氧化损伤

目的:探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对过氧化氢(H2O2)诱导的内皮细胞氧化损伤的保护作用及机制.方法:取人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为正常对照组、H2O2组、GLP-1组、H2O2+浓度10 nmol/L GLP-1组、H2O2+浓度100 nmol/L GLP-1组、H2O2+浓度1 000 nmol/L GLP-1组.采用荧光显微镜检测细胞内活性氧自由基(ROS)水平、观察细胞骨架F-actin变化;采用流式细胞仪检测细胞凋亡比率;Western Blotting检测磷酸化的雷帕霉素靶蛋白(p-m TOR)蛋白水平;实时荧光定量聚合酶链反应(QPCR)检测抗氧化酶:过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶2(SOD2)和谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)基因的表达变化.结果:H2O2组细胞骨架破坏明显,细胞内ROS含量增加,细胞凋亡率增加;加入GLP-1后,细胞骨架破坏受到显著抑制,ROS含量减少,凋亡率降低.Western Blotting结果显示,H2O2组p-m TOR表达降低,GLP-1可以提高p-m TOR表达,使蛋白水平趋于正常;加入GLP-1受体拮抗剂艾塞纳肽(9~36)后,GLP-1不能上调p-m TOR表达.H2O2作用后,CAT、SOD2和GPX1基因表达降低,而GLP-1可以逆转这些基因表达的降低.结论:GLP-1通过上调抗氧化应激酶对抗H2O2诱导的内皮细胞损伤,且可能是通过活化m TOR通路起保护作用.     

壳梭孢素与某些植物激素在黄化绿豆下胚轴切段伸长中的相互作用

以黄化绿豆幼苗下胚轴切段为材料,观察IAA、GA、ABA和FC单独或混合对切段伸长的效应,同时也观察前三种植物激素与FC处理先后不同对切段生长的影响.试验得知,FC显著促进切段伸长,IAA也有促进效果,GA促进效应不明显,ABA抑制伸长生长.IAA和ABA分别与FC混合则呈抑制效应,GA和FC混合具相加效应.在作用顺序性方面,无论对IAA、GA或ABA来说,都是FC预处理对切段伸长的效果最好.     

土荆芥组培根分泌物对大豆根尖细胞的氧化损伤

采用生化分析方法,研究了土荆芥根系分泌物对大豆根尖细胞的氧化损伤.结果表明,在土荆芥组培根分泌物处理下,大豆根尖细胞O2.-和H2O2水平升高,丙二醛(MDA)含量增大,其中,100和1 000μg/mL处理组活性氧自由基(ROS)水平升高达到显著程度;随着处理时间延长,根尖细胞的超氧化物歧化酶(SOD)活性和过氧化物酶(POD)活性在1和10μg/mL处理组持续升高,而在100和1 000μg/mL处理组则呈先升高后降低的趋势.过氧化氢酶(CAT)活性变化规律表现出持续升高的态势,在处理24 h后达到最大.电泳分析结果显示处理未造成大豆根尖细胞产生DNA片段.土荆芥组培根分泌物未导致大豆根尖细胞凋亡.     

盐胁迫下内源ROS与NO的产生及其对小麦幼苗生理特性的影响

以小麦新品种陇春27为试材,研究施用过氧化氢酶(CAT、H_2O_2清除剂)、DPI(质膜NADPH氧化酶抑制剂)或PTIO(NO清除剂)对100 mmol/L NaCl处理下小麦幼苗生长、抗氧化反应以及渗透性调节的影响.结果显示:NaCl处理抑制小麦幼苗根、茎的生长,诱导根中活性氧(ROS)和NO的积累.CAT、DPI、PTIO的加入更显著地抑制盐胁迫下小麦幼苗根茎的生长,且DPI的效应最明显.这3种药品能够缓解NaCl诱导的超氧阴离子(·O_2~-)和NO的积累,但DPI或PTIO使NaCl处理的根中H_2O_2含量进一步增加,而CAT或DPI使羟自由基(·OH)含量减少.盐胁迫导致幼苗根中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶活性减弱,而过氧化物酶(POD)活性无显著变化.CAT的加入能缓解NaCl对CAT活性的抑制作用;DPI的加入减缓了盐对SOD、CAT的抑制效应,使POD活性降低;PTIO显著地增加了盐处理根中POD活性.盐处理导致小麦幼苗根中脯氨酸质量分数、可溶性糖质量浓度、可溶性蛋白和丙二醛(MDA)质量分数均增加.DPI导致盐处理根中脯氨酸质量分数、可溶性糖质量浓度均增加.CAT不影响NaCl对根的氧化损伤,DPI的加入导致盐处理小麦根MDA质量分数增加为对照的184%,而PTIO能够缓解盐诱导的氧化损伤.盐处理抑制小麦幼苗根茎的生长,诱导的内源性ROS和NO的产生相互影响,特别是二者共同作用调控幼苗根的生长和抗氧化反应.     

重金属Pb对烟草愈伤组织的生长和抗氧化系统的影响

Pb污染是重金属污染中的一种重要形式.利用烟草叶片作为实验材料,以加入不同浓度Pb2+的MS培养基作为基本培养基诱导烟草叶片产生愈伤组织,观察经不同浓度Pb2+处理后烟草叶片产生愈伤组织的生长情况,并测定愈伤组织中活性氧水平和SOD、CAT等抗氧化酶的活性变化.结果表明:烟草叶片的出愈率随着Pb2+处理浓度的升高而下降,且愈伤组织出现的时间也随着Pb2+处理浓度的升高而延迟.愈伤组织中O-.2产生速率在培养第53天时达到最大值.在培养第49天SOD活性会显著下降,且SOD活性在稳定后随着Pb2+处理浓度的上升呈先上升后下降趋势.H2O2含量在培养第49天时含量达到最高,且随着Pb2+处理浓度的升高H2O2含量上升趋势越大.H2O2含量的上升会激活CAT的活性,使其活性在培养第53天即显著上升.除80 mg/L Pb2+处理下的CAT活性上升趋势受到部分抑制外,其他浓度Pb2+处理下的CAT活性上升趋势与H2O2上升趋势相同.     

黄瓜组织培养与蛋白含量及抗氧化酶活性的变化

通过对黄瓜子叶组织培养,研究了黄瓜子叶外植体龄对愈伤组织诱导的影响及体内可溶性蛋白含量,CAT,POD,SOD几个生理指标的变化及其与愈伤组织诱导的关系.结果表明:接种在MS(MS+6-BA(1 mg/L)+AgNO3(2 mg/L))培养的3～5 d子叶外植体的愈伤组织诱导能力最强.子叶的抗氧化酶活性及蛋白含量与诱导愈伤组织能力之间存在明显相关性,CAT和SOD与愈伤组织诱导呈负相关,POD和蛋白含量与愈伤组织诱导呈正相关.     

耐氨固氮菌浸种对几种蔬菜SOD,POD等活性的影响初探

蔬菜种子经耐氨固氮菌浸种处理后,测定了三叶一心期幼苗中SOD、POD、CAT及PPO活性,结果表明:4种蔬菜幼苗体内SOD活性均有明显提高(P<0.05或P<0.01),甘蓝、菜心中POD活性、白菜中CAT活性和甘蓝、莴苣、白菜中PPO活性也显著增加,而白菜根中POD活性、菜心中CAT、PPO活性却显著降低,这说明种子经耐氨固氮菌浸种处理后能一定程度上提高蔬菜幼苗的抗氧化功能。     

杏树休眠期枝芽内抗氧化系统酶活性变化的研究

以金太阳杏为试材，对休眠期间温室杏树和大田杏树枝芽内H2O2含量变化、抗氧化系统酶活性变化测定．试验结果表明：(1)在休眠期，低温可促进杏枝芽内H2O2含量的升高，打破休眠后，温室杏树枝芽内H2O2含量下降，大田杏树其含量则升高．(2)抗氧化系统酶类SOD、POD、CAT活性变化动态不同，SOD活性在休眠前期较高，随着低温不断累积，其活性先降低再逐渐上升，休眠结束后温室杏树枝芽内SOD活性略有下降；POD、CAT活性休眠前期较低，随着休眠进程的不断进行，POD活性一直升高，解除休眠后大田杏树枝芽内POD活性下降，而CAT活性迅速上升，自然休眠结束后大田杏树枝芽内CAT活性呈急剧下降趋势．     

水杨酸对NaCl胁迫下黄芩幼苗生长的影响

温室条件下研究NaCl(0·5%)胁迫和外施不同浓度的水杨酸(salicylicacid,SA)对黄芩幼苗生理活动的影响.NaCl胁迫处理的幼苗与未经过NaCl胁迫处理相比,叶绿素a、叶绿素b含量明显下降,SOD、POD、CAT活性上升后急速下降,引起H2O2和MDA含量显著增加;外施不同浓度的SA和0·5%NaCl共同处理的黄芩幼苗与NaCl胁迫处理相比,叶绿素a、叶绿素b都有不同程度增加,H2O2和MDA含量则有不同程度降低,SOD、CAT活性上升,POD活性显著上升.其中S2,S3在提高NaCl胁迫抗性时效果最佳.以上结果表明适当浓度SA对黄芩幼苗生理活性有一定的改善,增强了植株对盐胁迫的抗性.     

Expression pattern of GASA,downstream genes of DELLA,in Arabidopsis

Separation and functional research of related components involved in gibberellins （GAs） signaling are important to clarify the mechanism of GA functioning. Research on the downstream components of DELLA, the key factor of the GA signaling pathway, is limited at present. GASA （GA-Stimulated in Arabidopsis） family contains 15 genes usually regulated by GA in Arabidopsis thaliana. All GASA proteins have a cleavable signal peptide in N terminus and a conserved GASA domain including 12 cysteines in C terminus. RT-PCR analysis revealed that the expression of GASA4 and GASA6 were down-regulated, but GASA 1 and GASA9 were up-regulated in the DELLA mutants, gai-t6 and rga-24, as well as the double mutant, consisting with the results that GASA4 and GASA6 were induced, but GASA1 and GASA9 were inhibited by exogenous GA3. In addition, the expression patterns of other GASA genes were regulated by GA and ABA, separately or cooperatively. Most of GASA genes were expressed in roots, stems, leaves, flowers and developing siliques. GUS gene driven by the promoters of GASA6, GASA7, GASA8, GASA9, GASAIO, GASA11 and GASA12were used as reporters and it was found that all GASA genes expressed in the growing and differentiating organs and abscission zones, suggesting the role of these genes in cell growth and differentiation. This study provided an important basis for functional study of the GASA gene family in the GA and ABA signaling pathway.     

硼对草坪草CAT和POD活性的影响

以暖季型草坪草海滨雀稗和419（狗牙根）为材料,以沙、珍珠岩与砾石为基质进行培养试验,通过在Hoagland营养液中不加硼和加硼处理,在冬夏季测定草坪草过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）的活性。结果表明：不论在冬季和夏季,施硼可提高两种草坪草CAT活性;但同一草种在冬、夏季施硼和不施硼之间均未达到显著差异;施硼可提高两种草坪草过氧化物酶（POD）活性,同一草种在冬、夏季施硼和不施硼之间均达到极显著差异。随夏季温度升高,CAT、POD酶活性呈增加的趋势。     

两面针抗性生理的测定

利用两面针试管苗及其野生苗,研究其过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)和电导率(EC)的变化.实验结果表明:两面针试管苗的过氧化物酶活性、过氧化氢酶活性都比野生两面针苗的强,电导率大于野生苗,从生理生化角度阐明培养环境对两面针试管苗影响.     

水稻愈伤组织根分化过程相关基因的初步筛选

水稻愈伤组织在N6培养基上可以保持稳定的增殖而不分化,而培养在含有ABA的N6培养基上的愈伤组织就可以被诱导分化,进而形成根.根据这种生理学特征,分别提取了生长在两种不同培养基上的愈伤组织的RNA,与水稻cDNA芯片杂交.通过分析两种愈伤组织基因表达的差异,共找到271个与水稻愈伤组织根分化过程相关的cDNA克隆,其中107个基因表达被诱导,164个基因表达被抑制.这些初步结果为进一步研究愈伤组织分化生根的分子机理提供了研究线索.