铁线莲‘朱卡’组织培养技术及再生体系的建立

【目的】以铁线莲‘朱卡’(Clematis ‘Julka’)的带芽茎段为起始材料,通过组织培养方法建立再生体系。【方法】利用腋芽诱导—不定芽增殖—生根和愈伤组织诱导—增殖—分化—生根两种途径,建立该品种的组织培养再生体系,形成铁线莲‘朱卡’完整植株。【结果】铁线莲‘朱卡’组织培养最适宜灭菌条件为质量分数10%次氯酸钠溶液灭菌12min;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+IBA 0.20 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+GA₃ 0.2 mg/L;带芽茎段诱导愈伤组织最适培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织增殖最适培养基为MS+NAA 0.20 mg/L +6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织分化最适培养基为MS+NAA 0.03 mg/L+6-BA 3.0 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.3 mg/L。【结论】首次用两种器官发生方法建立了稳定高效的铁线莲‘朱卡’再生体系。直接形成不定芽时增殖倍数可达5.52。诱导愈伤组织途径的器官发生中,愈伤组织分化率可达76.7%,分化不定芽平均数超过3。两种途径诱导生根率都在90%以上。     

毛酸浆下胚轴组织培养研究

以毛酸浆下胚轴为外植体,研究不同激素配比对其愈伤组织诱导、分化及不定芽生根的影响.结果表明,愈伤组织诱导最佳培养基为MS+6-BA 3mg/L+NAA 0.2mg/L,愈伤组织分化最佳培养基为MS+6-BA 2mg/+IAA 0.2mg/L,不定芽生根最佳培养基为MS+NAA 0.1mg/L或MS+IBA 0.1mg/L.研究结果为毛酸浆的规模化生产、种质资源的保存和遗传转化提供了理论依据.     

珙桐叶片的脱分化和分化诱导研究

研究了以濒危植物珙桐叶片作为外植体诱导愈伤组织及分化再生植株.结果表明:本实验中,诱导愈伤组织的最佳培养基为1/2MS+2.0 mg/L IBA+1.0 mg/L 6-BA;愈伤组织继代的最佳培养基为1/2MS+3.0 mg/L IBA+1.5 mg/L 6-BA最佳分化培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA+0.2 mg/L GA_3,芽分化率为6.2%;生根最佳培养基为1/2MS+0.4 mg/L IBA,生根率为60%.     

番茄高效再生体系的建立

以砧木1号番茄的子叶和下胚轴为外植体进行离体组织培养,研究了IAA和6-BA及NAA和6-BA不同激素配比对外植体诱导不定芽及生根的影响。结果表明:培养基MS+0.2mg/L IAA+1.0mg/L 6-BA为诱导子叶外植体愈伤组织和不定芽的最适培养基,而MS+0.5mg/L IAA+1.0mg/L 6-BA为诱导下胚轴外植体愈伤组织和不定芽的最适培养基;诱导不定芽生根的最佳培养基为MS+0.1mg/L IAA。     

两种东方系百合组织培养快繁技术

以东方系百合索邦和西伯利亚的种球鳞片为外植体,以MS为基本培养基,添加NAA、6-BA、TDZ、KT、IBA、2,4-D等不同植物生长调节剂,筛选鳞片愈伤组织诱导、增殖、分化及再生苗生根的最佳培养基,为百合种质保存、组培快繁及脱毒奠定基础.结果表明,索邦百合在MS+IBA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织诱导效果最好,在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织增殖最好,在MS+NAA 0.3 mg/L+TDZ 0.1 mg/L+KT 0.2 mg/L培养基中分化最好;西伯利亚百合在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织的诱导和增殖最好,在MS+IBA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L培养基中分化效果最好.二者均在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.01 mg/L培养基中生根最好.     

黑果枸杞的组织培养和快速繁殖

本研究以黑果枸杞(Lycium ruthenicum)为对象,对其愈伤组织诱导、不定芽分化、诱导生根的培养条件进行筛选,并探究了黑果枸杞实验室试管苗的大田移栽.结果表明,诱导愈伤组织最适培养基为:MS+0.5mg·L-1 6-BA+0.1mg·L-1 2,4-D+10g·L-1蔗糖,出愈率达88%,愈伤组织生长状态良好;不定芽分化增殖的最适培养基为:MS+0.2mg·L-1 6-BA+10g·L-1蔗糖,不定芽增殖倍数达5.05倍;诱导生根最适培养基为:MS+0.1mg·L-1 IBA+5g·L-1蔗糖,生根率为95%.逐级炼苗后的试管苗大田移栽成活率达90%.     

酸浆的组织培养与植株再生

以酸浆的叶片、叶柄、茎段、子叶、胚轴、胚根为外植体进行离体培养,结果表明:叶柄为酸浆不定芽分化的最佳外植体类型;IAA为诱导叶柄不定芽分化较适合的生长素类型;不定芽分化的最佳培养基为MS 2.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L IAA;丛生芽增殖的最佳培养基为MS 2.0 mg/L 6-BA 0.05 mg/L IAA,增殖系数达5.0;最优的生根培养基为1/2 MS,生根率达91.7%.     

番茄高效再生体系的建立

比较了不同基本培养基,不同激素及其不同浓度组合对番茄愈伤组织的增殖、不定芽分化及其生根的效果.结果表明:MS+NAA0.02～0.10mg·L-1+6-BA3.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1(pH=5.8)均可诱导愈伤组织的增殖,但以MS+6-BA3.0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+蔗糖30g·L-1最佳;MS+IAA0.1mg·L-1+6-BA2.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1培养基对愈伤组织分化不定芽的效果最佳;MS+IAA0.1mg·L-1+蔗糖20g·L-1培养基对生根较好.     

“三月花”黄花菜的组织培养研究

采用单因素和正交实验方法对"三月花"黄花菜的组织培养技术进行了探索.结果显示:幼叶用0.1%升汞灭菌12 min时效果最佳,外植体污染率、死亡率均为0, 14 d后外植体启动率为62.5%.最佳愈伤诱导培养基为MS+2 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L 6-BA,外植体出愈率为86.67%;愈伤组织最适分化培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,愈伤组织分化率达到80%,平均每块愈伤组织不定芽个数为1.72.最佳生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L NAA,生根率达到93.33%,平均每个芽苗生根数为5.83条,试管苗炼苗移栽后,成活率达95%.利用该组织培养技术,幼叶外植体通过愈伤组织途径获得"三月花"黄花菜再生苗.     

益母草愈伤组织分化及无性系建立的研究

以益母草根颈为材料,进行了愈伤组织诱导、增殖与分化,分化芽生根,试管苗移栽、定植的研究.结果表明：MS＋6-BA 0.5mg·L-1＋NAA 0.6mg·L-1＋2,4-D1.2mg·L-1是愈伤组织诱导培养的理想培养基;MS＋6-BA0.5mg·L-1＋NAA0.1mg·L-1＋2,4-D 1.5mg·L-1是愈伤组织继代增殖培养的理想培养基;1/2MS＋6-BA 0.2mg·L-1＋NAA 0.1mg·L-1是愈伤组织分化培养和分化芽继代分化增殖培养的理想培养基;N6＋IAA0.2mg·L-1培养基是益母草分化芽生根培养的理想培养基.移栽成活率为94.4%;定植成活率为99.1%;定植成活的试管苗保持野生益母草的所有植物学性状.     

大叶常绿杜鹃叶片离体培养及不定芽再生

以大叶常绿杜鹃无菌苗的嫩叶为试验起始材料,研究了其离体培养和不定芽再生的过程。结果表明:培养基为MS+ZT(1.0 mg/L)+ NAA(0.1 mg/L)时,大叶常绿杜鹃叶片可直接诱导再生不定芽,诱导率达70%; 也可以通过愈伤组织途径间接诱导出不定芽,愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D(2.0 mg/L)+KT(0.2 mg/L),增殖最佳培养基为MS+ZT(0.5 mg/L)+IBA(0.1 mg/L),愈伤组织分化的最佳培养基为MS+ZT(0.04 mg/L)+NAA(0.01 mg/L); 分化率最高为70%,分化苗数为6～10株; 生根培养基为MS+NAA(0.2 mg/L)+IBA(0.4 mg/L)时,生根率可达90%。腐殖土、黄沙、珍珠岩配比为4:1:1的混合基质较适合常绿杜鹃试管苗的炼苗移栽,成活率为90%。     

白三叶高频组织培养再生体系的研究

以白三叶的子叶节为外植体,对影响白三叶愈伤组织的诱导、丛生芽的分化及生根的激素种类和浓度进行了优化.结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为:MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.4 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂,诱导率为62.67%;诱导从生芽分化的最佳培养基为:MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂,分化率为92.33%;诱导生根的最佳生根培养基为:MS+NAA 0.2 mg/L+1.5%蔗糖+0.8%琼脂,生根率达100%;建立了一个高频的白三叶再生体系,为白三叶基因工程奠定基础.     

八宝景天茎段的组织培养和快速繁殖①

以八宝景天茎段为外植体,以MS为基本培养基,对八宝景天外植体消毒、不定芽诱导、继代增殖和生根培养基进行筛选试验,建立了八宝景天组织培养快繁技术体系。结果表明:75%C_2H_5OH 30s+0.1%HgCl_2 6min为八宝景天茎段消毒的最佳方法;MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1 mg/L为不定芽诱导的最佳培养基;MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.1mg/L为继代增殖培养的最佳培养基;不定芽诱导生根的最佳培养基为1/2MS+NAA 0.1 mg/L或1/2MS+IBA 0.1 mg/L,生根率达100%。     

植物生长调节剂对五鹤续断组织培养的影响

通过不同植物生长调节剂的组合和配比,对五鹤续断茎尖、幼嫩茎段和叶进行愈伤组织的诱导、丛生芽分化和增值及生根培养,确定了五鹤续断组织培养的最佳培养基为:(1)初代培养基为MS+6-BA1.5 mg/L+NAA0.1mg/L;(2)丛生芽培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.6 mg/L;(3)生根培养基为1/2MS+IBA 0.4 mg/L+PP3330.4mg/L.     

红阳猕猴桃叶片再生体系的建立

文章以红阳猕猴桃组培苗的叶片为外植体,研究了不同植物生长调节剂对愈伤组织的诱导、不定芽的分化及生根的影响。结果表明,MS+0.5mg/L ZT(玉米素)+0.5mg/L 2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)诱导产生淡黄色疏松的愈伤组织,MS+3.0mg/L 6-BA(6-苄基腺嘌呤)+1.0mg/L NAA(萘乙酸)诱导产生绿色致密的愈伤组织,愈伤组织诱导率均为100%。在MS+5.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA培养基上愈伤组织的不定芽分化率达到100%。在1/2 MS+1.2mg/L IBA(吲哚丁酸)培养基上不定芽生根率为83.3%。     

香根草愈伤组织的诱导和快速繁殖

为了寻找大批量快速繁殖香根草的有效办法,以香根草的茎段、茎节为实验材料进行愈伤组织的诱导和快速繁殖的实验.用不同浓度的6-BA、IAA、2,4-D对其不同的外植体进行试验.结果表明:在愈伤组织诱导实验中,MS培养基附加6-BA 0.5mg/L 2,4-D 2.0mg/L的激素组合对茎段愈伤组织诱导效果最佳;将产生的愈伤组织团转入分化培养基中,诱导不定芽,其最适分化培养基为MS附加6-BA 3.5mg/L IAA 0.2mg/L;再生苗在MS培养基附加6-BA 3.0mg/L IAA 0.5mg/L的培养基上,进行生根培养效果较好.可见,茎段和茎节均可作为外植体.考虑到茎段数量较大,易取材,且效果明显优于茎节,认为茎段是香根草组培快繁的理想外植体.     

麻疯树花药愈伤组织诱导分化与生根培养

以麻疯树花粉处于单核中晚期的花药作为实验材料,探讨了麻疯树花药培养从愈伤组织诱导,愈伤组织分化芽,壮苗,生根的整个过程.其中愈伤组织诱导的最好培养基为N6+2,4-D 1.0 mg/L+KT 0.4 mg/L+10%蔗糖,避光培养;在愈伤组织分化芽的过程中,TDZ起到了非常明显的效果,最佳的培养基为MS+TDZ 2.0 mg/L+IAA 2.0 mg/L+水解酪蛋白1g/L+3%蔗糖;最合适的壮苗培养基为MS+GA3 1.0mg/L+6-BA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L+3%蔗糖;生根效果     

正交设计在驱蚊草组织培养中的应用

以驱蚊草茎、叶为外植体,筛选诱导愈伤组织、丛生芽增殖及生根的最佳培养基.结果表明:MS 6-BA0.1 mg/L NAA0.1mg/L 2,4-D0.1 mg/L AgNO31.0mg/L对愈伤组织的诱导效果最好;MS 6-BA0.2 mg/L NAA0.1mg/L AgNO31.0mg/L为丛生芽增殖的最佳培养基;1/2MS NAA0.3mg/L AgNO31.0mg/L生根效果最好.     

美洲商陆高频再生体系的建立

美洲商陆为商陆科多年生草本植物,在工业、农业和医药上具有很高的应用价值.本实验拟从外植体选择、激素组合、GA3和AgNO3等物质应用角度进行试验,分析各条件对愈伤组织诱导,不定芽分化、伸长以及不定根诱导等方面的影响,旨在构建美洲商陆稳定高效的再生体系.实验结果表明:愈伤组织诱导和不定芽分化的最适外植体为茎节;将无菌苗的上部经诱导培养基转接、壮苗后,再取茎节进行愈伤组织诱导和不定芽分化,可以显著提早不定芽分化、提高芽增殖系数;不定芽诱导分化最佳培养基为MS+6-BA(3.0 mg/L)+NAA(0.01 mg/L)+TDZ(0.02 mg/L),增殖系数达12.7;不定芽伸长的最佳培养基为MS+TDZ(0.02 mg/L)+6-BA(3.0 mg/L)+NAA(0.01 mg/L)+GA3(2.0 mg/L);生根最佳培养基为1/2MS+NAA(0.4 mg/L),生根率可达91.7%以上.AgNO3处理抑制了美洲商陆不定芽的分化.     

唐古特白刺愈伤组织诱导及再生体系的研究

以唐古特白刺(Nitraria tangutorum Bobr.)子叶、下胚轴、根为外植体, 接种在不同浓度激素配比的培养基中, 研究愈伤组织的诱导及植株再生.结果表明: 子叶和下胚轴是诱导愈伤组织的良好外植体; 以MS补加2,4-D(0.5～1.0 mg·L-1)或6-BA(1.0～2.0 mg·L-1)+NAA(0.5～1.0 mg·L-1)可100%高频产生愈伤组织;在MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1培养基上,下胚轴可产生不定芽; 最佳增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA(0.5～1.0 mg·L-1),增殖系数为5.75; 最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L-1,生根率达94.6 %.