昆虫标本DNA提取的研究进展

昆虫标本是研究昆虫遗传变异的重要资源,在昆虫起源与进化和昆虫物种多样性研究中应用越来越广泛。本文综述了造成多年保存的昆虫标本DNA降解的原因,以及昆虫标本DNA的提取方法。     

一种改进的昆虫基因组DNA的提取方法

就昆虫总DNA的提取,介绍了一种简便、快速的提取方法,此方法既可对新鲜标本进行DNA提取、也可对冷冻标本、干标本、酒精泡制标本进行DNA提取,均能得到较完整的大分子DNA片段,并且得率较高.改进的昆虫总DNA提取方法简便、快速,对设备和试剂的要求都不高.     

不同保存方式下金龟甲虫DNA提取方法及28S rDNA序列分析

通过电泳检测和PCR扩增28SrDNA核基因序列的结果,比较了无水乙醇、75%乙醇、针插干制3种金龟甲虫标本的保存方式和SDS-蛋白酶K法、CTAB法、饱和NaCl法3种提取DNA方法.结果显示,SDS-蛋白酶K法、CTAB法提取3种保存方式的标本时,可成功提取DNA并有效扩增目的基因;饱和NaCl法仅能提取无水乙醇保存标本的DNA并扩增目的基因,而75%乙醇保存标本和干制标本的DNA提取和基因扩增均不理想.     

四种消毒剂对昆虫标本消毒效果

采用植物组织培养对选材的消毒处理方法，对昆虫标本进行消毒，选出两种可行的消毒剂，据此为下一步研究用昆虫标本保存方法的改良试验作准备。     

利用RT-PCR技术鉴定人ZP3嵌合肽基因在昆虫细胞中的表达

目的：探讨在转录水平上对人卵透明带蛋白3(hZP3)嵌合肽在昆虫细胞中的表达鉴定．方法：用含目的基因的重组病毒感染昆虫细胞，用LiCl法提取RNA，以其为模板，利用一步法RT-PCR反转录出目的DNA．结果：琼脂糖凝胶电泳显示其PCR产物只有一条DNA条带且与目的基因大小一致，而阴性对照未见任何条带．结论：hZP3嵌和肽基因在重组病毒感染的昆虫细胞中成功转录，初步验证了目的基因的表达．     

螽斯总科昆虫基因组DNA的提取和种内雌雄及体色表现形不同个体间RAPD带型变异的研究

报道了不同保存材料的基因组DNA提取的材料学研究以及对四种螽斯种内雌雄及体色表现型不同个体间RAPD带型变异研究，结果表明，新鲜材料、冰冻保存材料、80％－100％酒精浸泡保存标本及烘干标本均可提取出较好的基因组DNA，同种内雌雄及体色表现型不同个体采用RAPD技术均能准确检出。     

昆虫全基因组DNA的保存及提取

以蚂蚁、天牛、蝗虫等昆虫为实验材料,建立了75%酒精常温浸泡密封保存和福尔马林常温浸泡密封保存昆虫样品2~4周后进行全基因组DNA提取的方法。基因组DNA经紫外分光光度法(260 nm、280 nm)、琼脂糖凝胶电泳、PCR检测,结果表明:从两种方法保存的样品中均能提取到纯净完整的基因组DNA,适用于分子生物学实验。     

螽斯总科昆虫基因组DNA的提取和种内雌雄及体色表现型不同个体间RAPD带型变异的研究

报道了不同保存材料的基因组DNA提取的材料学研究以及对四种螽斯种内雌雄及体色表现型不同个体间RAPD带型变异研究 .结果表明 ,新鲜材料、冰冻保存材料、80 %～ 1 0 0 %酒精浸泡保存标本及烘干标本均可提取出较好的基因组DNA ,同种内雌雄及体色表现型不同个体采用RAPD技术均能准确检出     

茂兰自然保护区蚱总科昆虫的初步调查

对茂兰自然保护区蚱总科昆虫进行了初步研究，经鉴定共有7种，其中有1新种——荔波波蚱Bolivaritettix liboensis．模式标本保存于陕西师范大学动物研究所昆虫标本室．     

昆虫标本制作方法新探

本文通过对标本虫蛀食和霉菌浸染昆明标本的防治的研究，找到了先浸泡再针插的昆明标本制作方法，从而很好地解决了昆虫标本容易被标本虫蛀食或被霉菌浸染的难题，为昆虫标本的保存，特别是贫困地区的昆虫标本的保存起到了一定的积极的指导作用。     

三种血液基因组 DNA 提取方法的比较研究

摘要: 目的 比较采用 3 种不同 DNA 提取方法提取豚鼠血液基因组 DNA 之间的差异。方法 分别用新鲜抗凝血 NaI 手提法、血凝块手提法和试剂盒 DNA 提取法提取 20 只豚鼠血液基因组 DNA,用分光光度计测定、琼脂糖凝胶 电泳、PCR 扩增等方法对提取的 DNA 片段的完整性、浓度、纯度和用于 PCR 扩增的效果等方面进行比较研究。结 果 新鲜抗凝血 NaI 手提法提取的 DNA 完整性、浓度和纯度均为最高; 血凝块法提取的 DNA 浓度和抗凝血提取的 DNA 浓度接近但纯度最低,有一定程度的断裂和降解; 试剂盒法提取的 DNA 浓度最低,纯度和完整性处于中间,但 三种方法提取的 DNA 都可用于 PCR 扩增反应。结论 3 种方法都可以提取基因组 DNA 并且所提取的 DNA 均能 满足后续 PCR 扩增实验的要求,但每种方法各有利弊,可根据具体的条件选择适宜的方法。     

珙桐休眠期种子高质量基因组DNA的提取及分析

在对传统CTAB法进行改进的基础上,提取了沙藏珙桐休眠期去中果皮种子高质量基因组DNA,琼脂糖电泳及紫外分光光度分析,表明其OD260nm／OD280nm在1．8—2．0之间,用所提取的基因组DNA作为模板,S17为引物,进行RAPD扩增,获得了清晰的扩增图谱．     

酒精和冷冻处理对肌肉组织基因组DNA提取的影响

提取基因组DNA的质量对于后续的基因扩增、酶切以及测序等分子生物学研究具有关键的影响,对肌肉组织进行不同的酒精和冷冻处理会显著影响提取DNA的质量。经过-80℃超低温冷冻数日的黄鳝样品解冻,取肌肉组织放入75%酒精处理后提取的基因组DNA完整性差、降解厉害;经过-80℃超低温冷冻数日的黄鳝样品直接取肌肉组织提取的基因组DNA比较完整、降解程度低;活体采取的黄鳝新鲜肌肉组织样品经过75%酒精处理,在-80℃超低温冷冻数日然后提取的基因组DNA质量也较好,电泳条带明晰而锐利,弥散降解带较少。后两种处理方法对黄鳝肌肉组织中DNA酶活性降低显著,因此提取的肌肉组织基因组DNA质量较高,可以有力支持后续的酶切、PCR扩增等分子生物学实验。     

蝴蝶干标本DNA的提取及RAPD分析

通过对3种基因组DNA提取方法的实验比较，提出了适合蝴蝶干标本基因组DNA的提取方法，并成功地应用于RAPD-PCR的扩增，表明该方法可行．     

林木病害标本制作实验方法比较研究

林木病害标本是重要的教学辅助材料,典型、直观的标本能将抽象的病理现象及时具体化、形象化,从而加强学生对病理学的认识,提高教学效果。文中从标本采集、标本制作与保存技术方面的实验着手,在阐述学生采集、制作标本方法基础上,以不同年级不同实验方法制作的标本为对象,对比分析历年不同方法制作标本的保存效果。研究显示干燥法较浸渍法简单经济、实用,有利于大量标本制作与保存,而浸渍法适用于特殊植物材料,保存期较短,占地面积大,可用作示范标本保存。     

绿尾大蚕蛾核型多角体病毒DNA抽提与鉴定

绿尾大蚕蛾(Actias selene ningPoana Felder)核型多角体病毒DNA(As NPV DNA),用酚-SDS法从病毒粒子中抽提。紫外吸收光谱测定最高和最低吸收值分别在258nm和232nm处。在0.7％琼脂糖凝胶电泳中,NPV DNA呈均一片段,经测定其T_m值为86℃,G C含量为41％。抽提的DNA经注射寄主幼虫,有一定的感染活性,感病虫表现核多角体病的典型症状。     

从蔷薇科果树硅胶干燥叶片中制备DNA

以6种蔷薇科主要树种特别是杏属植物为试材，从DNA提取、模板DNA电泳分析、RAPD扩增和S-基因型特异PCR4个方面对硅胶干燥的样品与传统液氮冷冻的样品进行了综合对比研究，结果表明：硅胶保存的样品完全可以与传统液氮冷冻的样品得到同样的PCR扩增结果，甚至在减小褐变影响方面优于后者，且干制样品的DNA纯度均比液氮速冻样品高。研究表明，用硅胶干燥法保存的植物样品可以满足后期有关RAPD等分子生物学研究的需要，且能保证野外考察时植物样品的DNA在运输过程中不被降解。     

不同方法提取水溞基因组DNA的比较

为获取抽提水溞基因组DNA的最适方法,本研究采用酚-氯仿法,CTAB法和试剂盒法3种方法提取水溞基因组DNA,并用琼脂糖凝胶电泳检测DNA提取的效果.结果表明3种DNA提取方法均获得较好的DNA,其中试剂盒方法提取的DNA最为理想,完全可满足后续分子生物学实验.     

葡萄DNA提取与纯化方法的比较研究

以巨峰葡萄叶片为试材,在ＣＴＡＢ法,ＳＤＳ法及高盐低ｐＨ法基础上加以改进,应用５种方法对葡萄ＤＮＡ提取,纯化方法进行了比较研究。结果表明,高盐低ｐＨ法和区室化提取法是２种适合于葡萄属植物ＤＮＡ提取的方法。